纳米级靶向性液态氟碳脂质微球超声造影剂的制备及其体外寻靶实验研究
发布时间：2017-08-18 17:48
本文关键词：纳米级靶向性液态氟碳脂质微球超声造影剂的制备及其体外寻靶实验研究
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【摘要】：目的:优化制备出具有高效性的肝脏去唾液酸糖蛋白受体的配体半乳糖化多聚赖氨酸,以其为载体制备一种新型的具备特异性肝脏靶向性能的超声造影剂-携半乳糖化多聚赖氨酸的脂质包裹的纳米级液态氟碳微球超声造影剂,研究其在体外的肝细胞寻靶能力,为今后对其在体内肝脏寻靶能力的研究做好基础,对评价肝脏不同损伤程度的超声靶向显影提供实验依据。方法:首先采用还原胺化法[1],优化制备肝脏去唾液酸糖蛋白受体的配体-半乳糖化多聚赖氨酸,再将二棕榈酰磷脂酰胆碱、DSPE-020PA、胆固醇按照一定比例溶于三氯甲烷中,最后旋转蒸发仪蒸发成脂质膜,用制备成功的半乳糖化多聚赖氨酸溶液将脂质膜溶解洗脱下来,并逐滴加入液态氟碳,通过超声波细胞粉碎机进行振荡获得目标靶向超声造影剂,并观察其形貌、检测其粒径及电位,并采用以上同样方法,将脂质膜洗脱液半乳糖化多聚赖氨酸溶液更换位为磷酸盐缓冲溶液,制备出非靶向超声造影剂;将制备成功的靶向与非靶向超声造影剂均滴入贴壁生长的处于对数期状态的正常大鼠肝细胞(BRL)及正常人肝细胞(LO2)中,在电子显微镜、倒置荧光显微镜及激光共聚焦显微镜下对比观察两组细胞中两种造影剂的靶向结合效果。结果:成功制备出肝脏去唾液酸糖蛋白受体的配体半乳糖化多聚赖氨酸,并合成了液态氟碳微球超声造影剂,其镜下观形态圆整、大小均一,平均粒径约在200nm左右,电位约在㧏35mV左右,性质稳定;靶向超声造影剂能靶向聚集于BRL及LO2细胞膜周围,而非靶向超声造影剂对BRL及LO2细胞膜并无靶向结合能力。结论:自制的携半乳糖化多聚赖氨酸的脂质包裹的纳米液态氟碳微球超声造影剂具有粒径均一、形态良好、性质稳定的优点,能高效聚集在肝细胞周围,对今后实时在体监测并定量评估肝脏损伤程度的超声显影研究提供了前期基础。
【关键词】：去唾液酸糖蛋白受体 液态氟碳 超声造影剂 纳米 靶向
【学位授予单位】：川北医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R445.1
【目录】：
- 致谢4-5
- 摘要5-7
- Abstract7-11
- 引言11-14
- 第一部分 肝脏去唾液酸糖蛋白受体的配体制备研究14-20
- 材料与方法14-16
- 结果16
- 讨论16-20
- 第二部分 肝脏靶向纳米级液态氟碳微球超声造影剂的制备20-25
- 材料与方法20-21
- 结果21-22
- 讨论22-25
- 第三部分 肝脏靶向液态氟碳超声造影剂的体外寻靶实验研究25-30
- 材料与方法25-27
- 结果27
- 讨论27-30
- 结论30-31
- 附图31-38
- 参考文献38-41
- 综述：肝脏去唾液酸糖蛋白受体的研究进展41-53
- 参考文献49-53
- 个人简历53
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