E-cadherin蛋白表达及CDH1基因启动子区CpG岛甲基化与宫颈鳞癌的相关性研究
本文关键词：E-cadherin蛋白表达及CDH1基因启动子区CpG岛甲基化与宫颈鳞癌的相关性研究
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【摘要】：目的研究宫颈鳞癌组织中E-cadherin蛋白表达及其编码基因CDH1启动子区Cp G岛甲基化水平,并分析两者与宫颈鳞癌临床病理参数的相关性。方法采用免疫组织化学方法、Western-blot方法检测宫颈鳞癌组织中E-cadherin蛋白表达;甲基化特异性聚合酶链反应检测宫颈鳞癌组织中E-cadherin蛋白编码基因CDH1启动子区Cp G岛的甲基化状态。结果免疫组织化学结果显示E-cadherin蛋白在宫颈鳞癌组和正常宫颈组中的阳性表达率分别为56.67%(34/60)和100%(30/30),宫颈鳞癌组低于正常宫颈组,差异有统计学意义(p㩳0.05)。E-cadherin蛋白表达与宫颈鳞癌临床手术病理分期、组织病理学分化程度、肌层浸润深度有关,E-cadherin蛋白阳性表达率I期高于II期,高分化组和中分化组均高于低分化组,无浸润组和浸润深度≤1/2组高于浸润深度1/2组、无浸润组高于浸润深度≤1/2组,差异均有统计学意义(p值均0.05),而E-cadherin蛋白阳性表达率与年龄无相关性(p0.05)。Western-blot结果示E-cadherin蛋白在宫颈鳞癌组织中的表达低于正常宫颈组织中的表达(0.566±0.186vs 1.170±0.592),差异有统计学意义(p㩳0.05)。E-cadherin与HPV16E6蛋白表达呈负相关(rp=-0.647,p㩳0.05)。甲基化特异性聚合酶链反应结果显示CDH1基因启动子区Cp G岛在正常宫颈组织中未检测到甲基化,在宫颈鳞癌组织中的甲基化阳性检出率为65%(26/40)。CDH1基因启动子区Cp G岛甲基化率与宫颈鳞癌临床手术病理分期、组织病理学分化程度有关,CDH1基因启动子区Cp G岛甲基化阳性率Ⅲ期高于Ⅰ期和Ⅱ期,低分化组高于高分化组和中分化组,差异均有统计学意义(p㩳0.05),CDH1基因启动子区Cp G岛甲基化阳性率与年龄无相关性(p0.05)。CDH1基因启动子区Cp G岛甲基化组E-cadherin蛋白表达低于非甲基化组,差异有统计学意义(p㩳0.05);HPV16E6蛋白高表达组CDH1基因启动子区Cp G岛甲基化率高于HPV16E6蛋白低表达组,差异有统计学意义(p0.05)。结论CDH1基因启动子区Cp G岛高甲基化及E-cadherin蛋白低表达可作为宫颈癌生物学行为的指标。E-cadherin蛋白表达减少与CDH1基因启动子区Cp G岛高甲基化相关。HPV16E6蛋白表达与CDH1基因启动子区Cp G岛高甲基化及E-cadherin蛋白表达减少相关。
【关键词】：E-cadherin CDH1 甲基化 HPV16E6 宫颈鳞癌
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.33
【目录】：
- 摘要4-6
- Abstract6-10
- 中英文缩略词对照表10-11
- 第一章 引言11-13
- 第二章 材料与方法13-27
- 2.1 实验材料13-16
- 2.1.1 石蜡标本的收集13
- 2.1.2 新鲜组织标本来源13-14
- 2.1.3 试剂和耗材14-15
- 2.1.4 仪器和设备15
- 2.1.5 主要试剂的配制15-16
- 2.2 实验方法16-27
- 2.2.1 免疫组织化学方法16-18
- 2.2.2 Western-blot18-22
- 2.2.3 甲基化特异性聚合酶链反应22-25
- 2.2.4 实验数据的统计分析25-27
- 第三章 结果27-37
- 3.1 免疫组织化学结果27-29
- 3.1.1 E-cadherin蛋白在正常宫颈组织、宫颈鳞癌组织中的表达27-28
- 3.1.2 E-cadherin蛋白表达与宫颈鳞癌临床病理参数之间的关系28-29
- 3.2 Western-blot结果29-32
- 3.2.1 E-cadherin蛋白在正常宫颈组织、宫颈鳞癌组织中的表达29-30
- 3.2.2 HPV16E6蛋白在正常宫颈组织、宫颈鳞癌组织中的表达30-31
- 3.2.3 E-cadherin与HPV16E6蛋白表达的相关性31-32
- 3.3 甲基化特异性聚合酶链反应结果32-37
- 3.3.1 CDH1基因启动子区CpG岛在宫颈鳞癌中的甲基化率32-33
- 3.3.2 CDH1基因启动子区CpG岛高甲基化与宫颈鳞癌临床病理参数间的关系33-34
- 3.3.3 宫颈鳞癌组织中CDH1基因启动子区CpG岛甲基化组与非甲基化组中E-cadherin蛋白表达34-35
- 3.3.4 HPV16E6蛋白表达与CDH1基因启动子区CpG岛甲基化的相关性35-37
- 第四章 讨论37-41
- 4.1 E-cadherin蛋白表达与宫颈癌的相关性37-38
- 4.2 E-cadherin蛋白与HPV16E6蛋白表达的相关性38
- 4.3 CDH1基因启动区区CpG岛甲基化与宫颈癌的相关性38-41
- 第五章 结论41-43
- 参考文献43-47
- 综述47-56
- 参考文献51-56
- 攻读学位期间主要的研究成果56-57
- 致谢57
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，本文编号：1027646
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