不同辅助孵化方式对小鼠囊胚孵化率的影响

发布时间：2017-10-14 19:20

  本文关键词：不同辅助孵化方式对小鼠囊胚孵化率的影响

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【摘要】：辅助孵化(Assisted Hatching, AH)是一种能够帮助胚胎从透明带中孵出的技术。体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer, IVF-ET)过程中的着床率低下现象,一直是困扰人们的问题。临床上,运用AH技术能够有效提高囊胚孵化率以及胚胎着床率。目前,人工辅助孵化的方法主要有机械法、化学法、酶消化法、激光法以及压电脉冲(piezo)显微操作法。AH的具体操作方法包括对卵母细胞的透明带进行打孔或削薄等方法,进行辅助孵化处理时所选择的胚胎发育时期也各不相同。然而,究竟哪种AH方法最有效,选择哪一发育时期的胚胎进行AH操作能够得到最理想的效果,还没有具体研究。本实验利用piezo显微操作法,针对小鼠成熟卵母细胞及着床前各时期胚胎进行不同方式的AH处理,统计各种方法处理后胚胎的发育率和囊胚的孵化率,以探明最佳的AH处理方式。本研究采用的AH方法分别为：(1)透明带打小孔(small hole, SH),开孔长度约为10μm；(2)透明带打大孔(large hole, LH),开孔长度约为50μm；(3)透明带削薄小区域(small length thinner, ST),削薄区域直径约为50μm；(4)透明带削薄大区域(large length thinner, LT),削薄区域直径约为120μm。选择不同发育时期的卵母细胞或胚胎分别进行AH处理,各时期分别为：(1)MⅡ期卵母细胞；(2)IVF体外培养得到的2-cell胚胎；(3)IVF体外培养得到的4-cell胚胎；(4)IVF体外培养得到的桑椹期胚胎。我们的研究结果表明：不同AH方法中,SH处理后囊胚孵化率较高,且多数胚胎为不完全孵出；LT处理后胚胎完全孵化率较高。我们的结果还表明在桑椹胚期进行AH处理效果最好。本实验的结论为：利用piezo对小鼠着床前胚胎进行辅助孵化处理,在桑椹胚期进行SH处理可以获得最高的囊胚孵化率。该研究将为临床上人类胚胎的辅助孵化技术提供基本依据。
【关键词】：辅助孵化 piezo 透明带打孔 透明带削薄
【学位授予单位】：内蒙古大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R714.8
【目录】：

• 摘要5-7
• ABSTRACT7-11
• 缩略词表11-12
• 第一章 实验研究12-45
• 1.1 引言12-13
• 1.2 实验材料13-14
• 1.2.1 实验动物13-14
• 1.2.2 主要设备14
• 1.2.3 实验试剂14
• 1.3 实验方法14-18
• 1.3.1 卵母细胞的采集14-15
• 1.3.2 孤雌激活和体外受精15
• 1.3.3 AH处理15-17
• 1.3.4 数据统计分析17-18
• 1.4 实验结果及分析18-37
• 1.4.1 相同的胚胎时期进行不同的AH方式18-27
• 1.4.2 不同的胚胎时期进行相同的AH方式27-37
• 1.5 讨论37-41
• 参考文献41-45
• 第二章 文献综述45-59
• 辅助孵化的研究进展45
• 2.1 透明带的结构和功能45-46
• 2.2 囊胚孵化46
• 2.3 辅助孵化的机理46
• 2.4 AH的种类46-52
• 2.4.1 机械法47-49
• 2.4.2 机械性的扩大透明带49
• 2.4.3 化学法49-50
• 2.4.4 蛋白酶消化法50
• 2.4.5 激光法50
• 2.4.6 piezo显微操作法50-52
• 2.5 AH适用对象52-53
• 2.6 AH作用的时间53
• 2.7 AH潜在的危险53
• 2.8 展望53-55
• 参考文献55-59
• 附录59-62
• 致谢62-64
• 攻读学位期间已发表学术论文64

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

1 徐瑜;辅助孵化在IVF-ET中的应用进展[J];国外医学(计划生育分册);2003年01期

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3 洪焱;刘敏利;骆荣;黄绘;胡皓睿;;激光辅助孵化对快速玻璃化冻融妊娠结局的影响[J];中国计划生育学杂志;2011年03期

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本文编号：1032718