培养箱内二甲苯、甲醛对小鼠体外受精及胚胎发育的影响

发布时间：2017-10-17 18:03

  本文关键词：培养箱内二甲苯、甲醛对小鼠体外受精及胚胎发育的影响

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【摘要】：目的本研究以小鼠为研究对象,取其卵细胞及精子为实验材料,研究不同浓度二甲苯、甲醛对小鼠体外受精及胚胎发育的影响,为控制人类辅助生殖技术实验室挥发性有机化合物的浓度提供实验数据。方法将温度37℃、6%CO2、饱和湿度的培养箱内二甲苯、甲醛浓度分别调至0、0.3、1.5、3.0、15mg/m3及0、0.1、0.5、1.0、5.0mg/m3等共10个浓度点,选择年龄为10-12周龄,体重为20-25g的ICR雌性小鼠及雄性小鼠为研究对象。每个浓度点随机分配雌鼠10只,雄鼠5只,常规取出卵母细胞及精子后放在设置好的培养箱内进行体外受精及胚胎培养,观察、计数受精率、卵裂率、囊胚形成率、囊胚孵出率,激光共聚焦显微镜下检测胚胎纺锤体变化。结果二甲苯组中,不同二甲苯浓度组比较受精率、卵裂率、囊胚形成率、囊胚孵出率不同(P0.05),差异有统计学意义,并且随着二甲苯浓度的升高受精率、卵裂率、囊胚形成率、囊胚孵出率均逐渐下降,二甲苯浓度与受精率、卵裂率、囊胚形成率、囊胚孵出率之间存在剂量-反应关系。在倒置显微镜下观察,随着二甲苯浓度的升高,胚胎出现退化、死亡较明显。二甲苯浓度超过1.5 mg/m3以上时,纺锤体出现断裂、形态欠规则等改变。甲醛组中,不同甲醛浓度组比较受精率、卵裂率、囊胚形成率、囊胚孵出率不同(P0.05),差异有统计学意义,并且随着甲醛浓度的升高受精率、卵裂率、囊胚形成率、囊胚孵出率均逐渐下降,甲醛浓度与受精率、卵裂率、囊胚形成率、囊胚孵出率之间存在剂量-反应关系。在倒置显微镜下观察,随着甲醛浓度的升高,胚胎出现退化、死亡较明显。甲醛浓度超过1.0mg/m3以上时,纺锤体出现断裂、形态欠规则等改变。结论1随着培养箱内二甲苯浓度的升高,小鼠体外受精率、卵裂率、囊胚形成率、囊胚孵出率逐渐下降,二甲苯浓度与受精率、卵裂率、囊胚形成率、囊胚孵出率之间存在剂量-反应关系。当二甲苯浓度超过1.5 mg/m3以上时,纺锤体出现断裂、形态欠规则等改变。2随着培养箱内甲醛浓度的升高,小鼠体外受精率、卵裂率、囊胚形成率、囊胚孵出率逐渐下降,甲醛浓度与受精率、卵裂率、囊胚形成率、囊胚孵出率之间存在剂量-反应关系。当甲醛浓度超过1.0 mg/m3以上时,纺锤体出现断裂、形态欠规则等改变。3当培养箱内存在二甲苯、甲醛等VOCs时,会对小鼠体外受精及胚胎发育产生不利影响,提示应随时监测实验室内VOCs。
【关键词】：体外受精-胚胎移植 挥发性有机化合物 小鼠
【学位授予单位】：华北理工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R714.8
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 英文缩略表10-11
• 引言11-13
• 第1章 实验研究13-39
• 1.1 材料与方法13-20
• 1.1.1 实验材料13-15
• 1.1.2 实验分组15
• 1.1.3 实验技术路线15-16
• 1.1.4 实验步骤16-19
• 1.1.5 统计分析19-20
• 1.2 实验结果20-28
• 1.2.1 不同浓度的二甲苯气体对小鼠体外受精及胚胎发育的影响20-23
• 1.2.2 不同浓度的甲醛气体对小鼠体外受精及胚胎发育的影响23-28
• 1.2.3 激光共聚焦实验结果28
• 1.3 讨论28-35
• 1.3.1 VOCs的来源28-29
• 1.3.2 VOCs的影响29-30
• 1.3.3 实验中VOCs浓度的选择30-31
• 1.3.4 实验动物的选择31
• 1.3.5 纺锤体的观察31-32
• 1.3.6 激光共聚焦显微技术32-34
• 1.3.7 关于实验室VOCs浓度的建议34
• 1.3.8 实验室VOCs的控制34-35
• 1.4 结论35-36
• 参考文献36-39
• 第2章 综述 影响体外受精及胚胎发育环境因素的研究进展39-50
• 2.1 体外受精-胚胎移植39-41
• 2.1.1 年龄39-40
• 2.1.2 配子质量40
• 2.1.3 促排卵方案40-41
• 2.2 环境因素对体外受精及胚胎发育的影响41-45
• 2.2.1 培养系统41-42
• 2.2.2 温度42-43
• 2.2.3 湿度43
• 2.2.4 PH值43
• 2.2.5 挥发性有机化合物43-45
• 2.3 总结与展望45
• 参考文献45-50
• 结论50-51
• 附录 人类体外受精-胚胎移植技术规范51-55
• 致谢55-56
• 导师简介56-57
• 作者简介57-58
• 学位论文数据集58

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本文编号：1050254