miR-200a，miR-200b和上皮—间质转化在卵巢子宫内膜异位症中的研究
发布时间：2017-10-18 08:26
本文关键词：miR-200a，miR-200b和上皮—间质转化在卵巢子宫内膜异位症中的研究
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【摘要】：目的本研究旨在探讨卵巢子宫内膜异位症是否发生了上皮-间质转化现象,以及miR-200家族重要成员miR-200a,miR-200b在内异症中的表达情况及与上皮-间质转化的关系,意义在于从分子水平上进一步阐明内异症侵袭转移的机制。方法1.标本采集病例组:2014.5-2014.7在天津市中心妇产科医院就诊并行手术治疗的卵巢子宫内膜异位症患者的异位内膜及其在位内膜组织各80例,患者的平均年龄为36.74±7.56岁,术后病理诊断全部是子宫内膜异位症。根据1997年美国生育学会修正的子宫内膜异位症分期标准(r-ASRM)进行分期,I-II期21例,III期30例,IV期29例。对照组:收集在同一家医院同期因卵巢单纯性囊肿行手术患者的子宫内膜组织43例,患者的平均年龄为38.57±5.02岁,均经病理证实是正常子宫内膜组织,所有的宫腔内膜均处于分泌期。所有患者均月经周期正常,近六个月未接受过性激素治疗,并且未经过内异症药物治疗,无其他内外科疾病,无恶性肿瘤史。2.方法2.1病例组与对照组标本离体后,即刻放入冻存管中,保存于液氮罐中,存以备用。2.2 RNA和蛋白提取:将病例组与对照组标本各取出50-100mg,在液氮中研磨,提取组织RNA和蛋白。2.3采用RT-PCR方法检测miR-200a、miR-200b在各组织中的表达情况。2.4采用Western blot方法检测EMT相关蛋白ZEB1、ZEB2、E-cadherin、N-cadherin、Snail和Slug蛋白在各组织中的表达情况。2.5数据分析:实验数据用SPSS软件分析结果1.病例组与对照组中miR-200a,miR-200b的表达情况在不同内膜组织中,miR-200a,miR-200b均有不同程度的表达。与正常子宫内膜组织相比,在位内膜及异位内膜组织中的表达水平明显降低,且异位内膜中表达水平较在位内膜组织下调。2.病例组与对照组中EMT相关蛋白的表达情况在不同内膜组织中,ZEB1,ZEB2,N-cadherin,Snail,Slug,E-cadherin均有不同程度的表达。与正常内膜组织相比,在位内膜及异位内膜中的E-cadherin表达水平明显降低,且异位内膜中E-cadherin表达水平明显低于在位内膜。相反,与正常内膜组织相比,在位内膜及异位内膜中ZEB1/2,N-cadherin,Snail,Slug表达量明显升高,且异位内膜中的表达水平明显高于在位内膜组织。3.miR-200a,mi R-200b的表达量与E-cadherin,ZEB1/2表达量的相关性分析经Pearson Correlation Coefficients检验方法统计,miR-200a,miR-200b的表达量和其对应组织中的E-cadherin的表达呈显著的正相关,与ZEB1/2的表达量呈显著的负相关。4.miR-200a,mi R-200b与内异症rASRM分期及评分的关系病例组异位内膜及在位内膜中miR-200a,miR-200b与内异症rASRM分期及评分无显著性相关。结论1内异症在位及异位内膜中miR-200a/b表达下调,而ZEB1/2的表达增加,提示它们可能参与了内异症的发生、发展过程。2 miR-200a/b在内异症中的表达与ZEB1/2的表达之间存在明显相关性,在miR-200a/b表达上调时,会出现ZEB1/2的低表达,提示ZEB1/2可能是miR-200a/b的靶基因,它们共同参与了内异症的EMT过程。3内异症在位内膜中miR-200a/b表达较正常内膜明显下调,进一步证实了在位内膜决定论,通过检测和靶向改变在位内膜中mi R-200a/b的表达有助于内异症的诊断和治疗。
【关键词】：子宫内膜异位症 子宫内膜 microRNA-200 上皮-间质转化 ZEB1/2
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R711.71
【目录】：
- 中文摘要4-6
- Abstract6-10
- 缩略语/符号说明10-11
- 前言11-13
- 研究现状、成果11-12
- 研究目的、方法12-13
- 对象与方法13-24
- 1 试验仪器与设备13
- 2 主要耗材13
- 3 主要试剂与配制13-17
- 4 研究对象17
- 5 实验方法17-22
- 6 统计学分析22-24
- 结果24-36
- 1 miR-200a, miR-200b在各组织中的表达24-28
- 2 E-cadherin、N-cadherin、ZEBs、Snail、Slug在不同内膜组织中的表达28-32
- 3 miR-200a，miR-200b的表达量与E-cadherin，ZEB1/2 表达量的相关性分析32-34
- 4 miR-200a、miR-200b与内异症rASRM分期及评分的关系34-36
- 讨论36-43
- 1 子宫内膜异位症的发病机制36
- 2 微小RNA-200家族36-37
- 3 上皮-间质转化37-40
- 4 miR-200a、miR-200b与上皮-间质转化的关系40-41
- 5 局限性及展望41-43
- 结论43-44
- 参考文献44-49
- 发表论文和参加科研情况说明49-50
- 综述 miRNA-200家族与妇科肿瘤上皮-间质转化的研究进展50-62
- 综述参考文献57-62
- 致谢62-63
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