人乳头瘤病毒（HPV）相关疾病中HPV16E2、E6、E7基因突变及E6、E7抗原表达的研究

发布时间：2017-11-07 12:09

  本文关键词：人乳头瘤病毒（HPV）相关疾病中HPV16E2、E6、E7基因突变及E6、E7抗原表达的研究

  更多相关文章： 人乳头瘤病毒 亚型 致癌基因 抗原表达 基因突变

【摘要】：【目的】研究人乳头瘤病毒(HPV)相关疾病中HPV亚型分布,HPV16的E2、E6、E7基因突变和E6、E7抗原表达,及其与疾病临床特征间的相关性。【方法】1、标本收集:收集厦门大学附属中山医院病理科2007~2013年HPV相关疾病的库存石蜡包埋组织共91例,包括31例尖锐湿疣(CA)、11例2级宫颈上皮内瘤变(CIN2)、23例3级宫颈上皮内瘤变(CIN3)、3例鲍温样丘疹病(BP)、9例鲍温病(BD)和14例派吉特病(PD)。2、从福尔马林固定-石蜡包埋组织中提取HPV基因组DNA,用PCR-膜杂交法检测HPV DNA并做HPV分型。3、应用DNA测序法测定HPV16的E2、E6和E7基因序列,并应用BLAST软件将测序结果与基因库中野生型HPV16序列(GeneBank NC001526)比对,以分析HPV16的E2、E6和E7基因突变。4、应用免疫组织化学S-P法检测HPV16的E6和E7抗原表达。5、分析HPV相关疾病中HPV亚型分布、HPV16的E2、E6和E7基因突变、HPV16的E6和E7抗原表达与疾病临床特征(性别、年龄、部位、组织病理特征等)间相关性。6、统计学分析:HPV DNA检出率差异比较采用x2检验,设p0.05为差异具有显著统计学意义。【结果】1、HPV分型:91例标本中检出10个HPV亚型,其中14/31例CA(45.2%)、5/11例CIN2(45.5%)、14/23例CIN3(60.9%)和1/9例BD(11.1%)中检出HR-HPV DNA,3/31例CA(9.7%)、2/11例CIN2(18.2%)、8/23例CIN3(34.8%)和1/9例BD(11.1%)中检出HPV16 DNA,但14例PD和3例BP中未检出HPV DNA,所有标本中都未检出HPV18 DNA。男性CA患者检出HPV均为LR-HPV,但女性CA患者检出LR-HPV和HR-HPV混合感染。女性CA患者HR-HPV检出部位主要为宫颈,且年龄50岁组HR-HPV检出率高于年龄50岁组,但差异无统计学意义。CIN3患者HPV、HR-HPV和HPV16 DNA检出率均略高于CIN2,但差异无统计学意义。2、HPV16的E2、E6和E7基因突变:1例CA和1例CIN3中检出HPV16的E2基因置换突变,2例CIN3中检出HPV16的E2、E6和E7基因置换突变。HPV16的E2基因中共检出10个碱基置换突变:G2827A(Asp→Asn)、C3158A(Thr→Lys)、G3248A(Arg→Gln)、T3383C(Ile→Thr)、C3409T(Pro→Ser)、G3448A(Glu→Lys)、C3683A(Thr→Lys)和C3786A(Asp→Gln)为错义突变;HPV16 E6基因中共检出5个碱基置换突变,其中G94A置换突变位于起始密码子之前导致一个调控氨基酸改变,G132T(Arg→Ile)、T178A(Asp→Glu)、T178G(Asp→Glu)和C278G(Pro→Ala)为错义突变,T178A(Asp→Glu)和T178G(Asp→Glu)突变后编码的氨基酸相同;HPV16的E7基因中共检出4个碱基置换突变,其中A647G(Asn→Ser)为错义突变。3、HPV16的E6和E7抗原表达:14例HPV16 DNA阳性标本中1例BD、1例CA、1例CIN2和3例CIN3呈HPV16 E6抗原阳性,1例BD和3例CIN3呈HPV16 E7抗原阳性。【结论】1、女性CA中存在LR-HPV和HR-HPV混合感染,HR-HPV检出部位主要为宫颈。2、CIN中检出的HR-HPV主要为HPV16。3、发现CA中存在HPV16 E2基因突变。4、HPV16 E2、E6和E7基因置换突变可能与CA、CIN2和CIN3的发生和进展有关。5、HPV16 E7抗原只在癌前病变或原位癌中检出,因此可能作为疾病恶性指标之一。6、PD可能与所检测HPV亚型无关。
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.33

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 邱峰;袁丽娜;黄宪章;;宫颈病变患者人乳头瘤病毒16亚型E2基因多态性检测[J];南方医科大学学报;2012年10期

2 王玉婷;王言奎;赵成琳;;HPV16 E6和E7基因序列多态性与宫颈癌临床病理特征相关性[J];齐鲁医学杂志;2011年04期

，

本文编号：1152345