胎盘组织中脂联素、PLGF的表达与重度子痫前期发病关系的研究

发布时间：2017-11-21 22:27

  本文关键词：胎盘组织中脂联素、PLGF的表达与重度子痫前期发病关系的研究

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【摘要】：子痫前期是一种严重的妊娠期并发症,以广泛的血管功能下降为特征,并导致孕20周后蛋白尿(尿蛋白≥0.3g/24h或随机尿蛋白(+))和高血压(BP≥140/90mm Hg)为主要特征的一种妊娠期特发性疾病,在全世界发病率是2%-8%。本病基本病理生理变化是全身小血管痉挛、内皮损伤及局部缺血,全身各系统、各脏器灌流减少,造成对母儿危害,甚至导致母儿死亡。子痫前期的病因尚未完全阐明,因该病在胎盘娩出后症状得以缓解或自愈,有学者称之为“胎盘病”,但很多学者认为是母体、胎盘、胎儿等众多因素作用的结果。目前的研究表明子痫前期发病可能与子宫螺旋小动脉重塑不足、免疫因素、炎症反应、血管内皮功能障碍、营养障碍及高胰岛素素血症等有关。全身小血管痉挛是本病的基本病理生理变化,引起血管炎症反应、血管生长因子和抗血管生成因子失衡,造成血管内皮功能障碍。脂联素、胎盘生长因子(PLGF)与血管生成及病变有关,并均在胎盘滋养细胞表达。本研究旨在检测胎盘组织中脂联素、PLGF的表达量以探讨其与子痫前期发病及其围产儿结局的关系。脂联素(Adiponectin)是一种激素蛋白,主要由白色脂肪组织的脂肪细胞分泌。具有保护血管内皮细胞、抗炎、抗动脉粥样硬化及改善胰岛素抵抗等特性,可能在子痫前期的发病中发挥了重要作用。脂联素在肝脏、心肌、骨骼肌、结肠、唾液腺、胎盘和脑垂体都有表达。它主要通过两种不同的跨膜转运受体(Adipo R1和Adipo R2)发挥作用。脂联素通过激发血管内皮氧化酶和NO的产生参与了子痫前期的发生,但是关于子痫前期中脂联素的表达量一直存在争议。胎盘生长因子的碱基序列与血管内皮生长因子(VEGF)有高度同源性,属于VEGF家族中的成员,是血管形成的关键因素。研究表明,PLGF能够促进血管内皮细胞的增殖并调控细胞凋亡过程,还可以促进单核细胞及内皮细胞的游走,并增加内皮细胞的通透性。研究发现,PLGF丰富表达于胎盘组织,主要位于合体滋养细胞,并与滋养层细胞凋亡有关。胎儿的正常生长发育依赖于完整的胎盘脉管系统和良好的子宫胎盘循环。缺血缺氧导致了子痫前期中血管生成因子的不平衡,为此我们进行如下研究探讨脂联素和PLGF在重度子痫前期发病和发展中的意义。目的本研究通过比较脂联素m RNA和PLGFm RNA在正常晚孕组和重度子痫前期组胎盘组织中的表达有无差异,免疫组化定位脂联素和PLGF在两组胎盘组织中的位置,初步探讨脂联素和PLGF在胎盘组织中的表达量与围产儿结局的关系。材料和方法选择于2014年2月至2014年10月在郑州大学第三附属医院住院分娩的产妇100例,其中正常足月妊娠孕妇50例,重度子痫前期患者50例。重度子痫前期诊断标准按美国妇产科医师协会标准(2002)。所有研究对象均排除慢性高血压、糖尿病、肾病、多囊卵巢综合征、胎儿畸形和多胎妊娠。参与该研究的所有对象均签署知情同意书;该研究经郑州大学第三附属医院伦理委员会审核批准。2方法胎盘取材:(1)待胎盘娩出后15分钟内,立即在其母面中央取一1.0 cm×1.0cm×1.0 cm胎盘组织,以生理盐水清洗3次后,放入10%中性福尔马林液中固定,并制成石蜡块;(2)另外取一0.5cm×0.5cm×0.5cm母面胎盘组织,生理盐水清洗(尽量洗出血液)后,置于-80°C冰箱备用。取材时注意避开出血、坏死及钙化部位。采用Real-time PCR技术,比较妊娠晚期重度子痫前期组和正常晚孕组胎盘组织中脂联素和PLGFm RNA表达有无差异,免疫组化定位脂联素和PLGF在子痫前期孕妇和正常孕妇胎盘组织中的位置。3统计学处理采用SPSS19.0软件进行统计学分析,计量资料采用x±s表示,符合正态分布的计量资料组间比较采用两组独立样本t检验,不符合正态分布者采用秩和检验,相关性分析采用Spearman相关分析。以P0.05为差异有统计学意义。结果1重度子痫前期组和正常对照组孕产妇一般资料比较重度子痫前期组孕妇平均年龄和孕时体重指数(BMI)与正常对照组孕妇比较,差异均具有统计学意义(P均0.05)。两组孕妇的分娩孕周比较差异有统计学(P0.05);两组新生儿平均体重比较差异有统计学意义(分别为2144.2±656.13g,3349.8±386.36g,p0.05);两组新生儿平均身长分别为43.68±3.88cm,51.24±2.39cm,差异有统计学意义(p0.05);两组胎盘重量分别为378.52±56.54g,575.20±90.63g,差异有统计学意义(p0.05)。(见表3.1)2两组胎盘组织中脂联素、PLGFm RNA的表达2.1脂联素m RNA在重度子痫前期组和对照组中的表达脂联素m RNA在两组胎盘组织中均有表达,脂联素m RNA相对表达量在重度子痫前期胎盘组表达高于正常组(分别为4.18±1.80,1.00±0.51),相比差异有统计学意义。(P0.05)(表3.2,图3.1)2.2重度子痫前期组与正常对照组胎盘组织中PLGFm RNA的表达PLGFm RNA在两组胎盘组织中均有表达,PLGFm RNA在重度子痫前期组胎盘组织中的相对表达量低于正常对照组(分别为1.00±0.50,3.19±1.09),差异有统计学意义,P0.05)。(表3.3,图3.2)3.重度子痫前期组与正常对照组晚孕期胎盘组织中脂联素、PLGF蛋白的表达定位脂联素和PLGF蛋白主要表达在胎盘合体滋养层细胞与细胞滋养细胞,本研究发现,脂联素和PLGF在两组胎盘组织中均有表达,脂联素蛋白在重度子痫前期组中表达明显高于正常组(P0.05),而PLGF蛋白在重度子痫前期组胎盘组织中的染色强度明显低于正常对照组(P0.05)。(表3.4,表3.5,图3.4,图3.5)4.相关性分析在重度子痫前期孕妇胎盘组织中,脂联素和PLGF表达呈负相关(r=-0.575,P0.05);脂联素m RNA相对表达量与新生儿体重成负相关(r=-0.580,P0.05);与BMI指数成正相关(r=0.261,P0.05);与年龄无相关性(r=0.242,P0.05)。PLGFm RNA相对表达量与新生儿体重成正相关(r=0.625,P0.05);与BMI指数成负相关(r=-0.374,P0.05);与年龄无相关性(r=0-0.146,P0.05)。(表4.1,表4.2)结论1.脂联素m RNA及其蛋白在重度子痫前期胎盘组织的表达均高于正常对照组;在重度子痫前期胎盘组织中PLGFm RNA及蛋白表达低于正常组,提示脂联素和PLGF可能参与了重度子痫前期的发病。2.脂联素和PLGF在重度子痫前期中负相关,提示它们可能通过某些相关分子机制影响重度子痫前期的发生发展;脂联素和PLGF与BMI指数的相关性,提示二者与重度子痫前期患者孕期体重增加相关;脂联素和PLGF分别与新生儿体重均有相关性,提示脂联素和PLGF与重度子痫前期围产儿结局相关。
【学位授予单位】：郑州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R714.244

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