RANKL通过增强宫颈癌细胞间交互对话促进其增殖的机制研究

发布时间：2017-11-22 16:12

  本文关键词：RANKL通过增强宫颈癌细胞间交互对话促进其增殖的机制研究

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【摘要】：目的:研究宫颈癌细胞是否表达RANKL及RANK;RANKL/RANK对宫颈癌细胞生存活力的调控作用和可能机制及其与白细胞介素8(IL-8)的相互作用关系。方法:通过免疫组化检测宫颈癌组织和癌旁组织RANKL及RANK的表达水平。流式细胞术检测宫颈癌细胞株HeLa和SiHa细胞表面RANKL和RANK的表达水平、分析RANKL对HeLa和SiHa细胞中IL-8受体表达水平的影响及RANKL和IL-8对HeLa和SiHa细胞中增殖、凋亡相关分子表达水平的影响。ELISA法检测HeLa和SiHa细胞中可溶性RANKL的分泌水平及RANKL对HeLa和SiHa细胞分泌IL-8的影响。BrdU法分析RANKL和IL-8对HeLa和SiHa细胞增殖能力的影响。Annexin V/PI细胞凋亡检测法分析RANKL和IL-8对HeLa和SiHa细胞凋亡能力的影响。结果:相比癌旁正常组织,宫颈癌组织明显表达RANKL/RANK。HeLa和SiHa细胞均表达细胞膜表面RANKL(mRANKL)和其受体RANK,且分泌可溶性RANKL(sRANKL)。人重组RANKL(rhRANKL)对HeLa和SiHa细胞的生存活力没有影响,而以抗RANKL中和性抗体α-RANKL或人重组OPG(rhOPG)阻断细胞表面RANKL/RANKL可以抑制HeLa和SiHa细胞的增殖能力而促进其凋亡能力。低密度接种的HeLa和SiHa细胞增殖能力明显低于高密度接种的细胞,且α-RANKL抑制HeLa和SiHa细胞增殖的效果在细胞高密度接种时更明显。α-RANKL和rhOPG均明显降低Ki-67和Bcl-2的表达水平,上调Fas和Fas L的表达水平。α-RANKL导致HeLa和SiHa细胞中IL-8的分泌水平下降,而IL-8受体的表达水平升高。rhIL-8可以逆转α-RANKL对HeLa和SiHa细胞增殖、凋亡能力及增殖、凋亡相关分子表达水平的调控作用。结论:宫颈癌细胞高表达RANKL/RANK,细胞膜表面RANKL/RANK通过增强宫颈癌细胞之间的交互对话和刺激IL-8的分泌促进宫颈癌细胞的增殖活力,参与宫颈癌的发病与发展过程。
【学位授予单位】：江南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R737.33
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本文编号：1215280