ST7L基因对卵巢癌细胞生长、迁移和侵袭的影响
本文关键词：ST7L基因对卵巢癌细胞生长、迁移和侵袭的影响 出处：《天津医科大学》2016年硕士论文 论文类型：学位论文
【摘要】：目的:卵巢癌(ovarian cancer)在世界范围内是女性生殖器官常见的恶性肿瘤之一,其发病率和死亡率仅次于子宫颈癌和子宫内膜癌,列居女性生殖器官恶性肿瘤的第三位,其中卵巢上皮癌的死亡率占各类妇科肿瘤的首位,影响着妇女的健康与生命。因此,阐明卵巢上皮癌的发生和发展具有重要意义。据文献报道,卵巢上皮癌的发生、发展主要与癌基因和抑癌基因的异常表达有密切联系,抑癌基因的失活可促进肿瘤细胞的形成和向恶性化的发展。ST7L基因定位于七号染色体,作为抑癌基因ST7的同源物被发现。Chen等人报道,在神经胶质瘤细胞中,ST7L可抑制细胞的增殖能力和侵袭能力,诱导细胞凋亡的发生。而其在卵巢癌中的功能及具体分子机制迄今尚未充分阐明。本课题拟研究ST7L对卵巢癌细胞OVCAR3和SKOV3的生长、迁移和侵袭的影响,初步阐明其分子调控机理。方法:首先通过PCR扩增构建ST7L的过表达质粒(pcDNA3/ST7L)及生物合成寡核苷酸构建ST7L的敲降质粒(pSilencer/ST7L),应用实时荧光定量PCR方法和Western blot技术检测ST7L在mRNA水平和蛋白水平的变化,进而通过MTT实验,平板克隆形成实验,细胞划痕实验,Transwell侵袭实验来进一步阐述ST7L基因对卵巢癌细胞活性、生长能力、迁移能力、侵袭能力的调控作用;随后运用流式细胞术检测ST7L对卵巢癌细胞周期进程的影响,Western blot检测ST7L基因对卵巢癌细胞上皮间质转化的影响,进一步阐明ST7L基因在卵巢癌细胞迁移和侵袭能力的作用机理。结果:在临床样本中,通过实时定量PCR检测发现卵巢癌组织较癌旁组织中ST7L基因低表达。在系列功能学实验中,MTT检测发现在OVCAR3和SKOV3细胞中ST7L基因的过表达可抑制其生长活性;平板克隆形成实验表明ST7L抑制卵巢癌细胞的生长能力;细胞划痕实验和transwell侵袭实验证实ST7L能抑制卵巢癌细胞的迁移和侵袭能力。流式细胞术检测发现ST7L能抑制卵巢癌细胞的周期进程。Western blot分别检测上皮标志物和间皮标志物,发现ST7L能抑制卵巢癌细胞上皮向间质的转化。结论:ST7L抑制卵巢癌细胞生长活性和增殖能力,是由抑制细胞周期进程来完成的;通过抑制上皮间质转化降低卵巢癌细胞的迁移和侵袭过程。以上数据均表明,ST7L在卵巢癌细胞中发挥着抑癌基因的作用。ST7L在卵巢癌中的具体分子机制及其相关通路有待进一步深入研究。
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R737.31
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，本文编号：1336963
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