miR-424对宫颈鳞癌细胞侵袭迁移的抑制作用及调控

发布时间：2018-01-15 13:22

  本文关键词：miR-424对宫颈鳞癌细胞侵袭迁移的抑制作用及调控　出处：《暨南大学》2016年硕士论文　论文类型：学位论文

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【摘要】：目的:探讨mi R-424对宫颈鳞癌细胞侵袭迁移的抑制作用及调控。方法:1.通过茎环RT-PCR检测宫颈鳞癌组织中mi R-424的含量;2.Transwell小室实验检测Si Ha细胞侵袭能力;划痕实验检测迁移能力;3.采用生物信息学方法预测靶基因,并用双荧光素酶报告基因实验验证;4.通过免疫组化方法检测靶基因的表达;5.利用RT-PCR和Westernblot检测内源性靶基因及下游靶基因分子的m RN A和蛋白表达变化。结果:1.宫颈鳞癌组织中mi R-424的含量明显低于癌旁组织;2.过表达mi R-424能抑制宫颈鳞癌Si Ha细胞的侵袭迁移能力;3.生物信息学表明,mi R-424的靶基因之一是Wnt3A,双荧光素酶报告基因实验证明Wnt3A是mi R-424的靶基因。4.免疫组化结果表明,宫颈鳞癌组织中的Wnt3A表达阳性;5.过表达mi R-424,宫颈鳞癌Si Ha细胞中Wnt3A的表达降低,MMP2活性降低。结论:本研究发现宫颈鳞癌组织中的mi R-424表达含量低于癌旁正常组织;mi R-424可以通过靶向作用Wnt3A,下调MMP-2活性,从而抑制宫颈鳞癌Si Ha细胞的侵袭迁移,为未来逆转宫颈癌的转移、寻找新的药物作用靶点,提高宫颈癌治愈率提供理论和实验依据。
[Abstract]:Objective: to investigate the inhibitory effect and regulation of mi R-424 on invasion and migration of cervical squamous carcinoma cells. Methods: the content of mi R-424 in cervical squamous cell carcinoma was detected by stem ring RT-PCR. 2. The invasion ability of SIHA cells was detected by Transwell chamber assay. The migration ability was detected by scratch test. 3. The target gene was predicted by bioinformatics and verified by double luciferase reporter gene experiment. 4. The expression of target gene was detected by immunohistochemistry. RT-PCR and Westernblot were used to detect the expression of MRNA and protein in endogenous target gene and downstream target gene. Results: 1. Mi in squamous cell carcinoma of cervix cervix. The content of R-424 was significantly lower than that of paracancerous tissue. 2. Overexpression of mi R-424 could inhibit the invasion and migration of squamous cell carcinoma (SIHA) cells. 3. Bioinformatics indicates that one of the target genes of Mi R-424 is Wnt3A. Double luciferase reporter gene experiment showed that Wnt3A was the target gene of miR-424. Immunohistochemical results showed that Wnt3A expression was positive in cervical squamous cell carcinoma. 5. Overexpression of mi R-424 resulted in a decrease of Wnt3A expression in SIHA cells of cervical squamous cell carcinoma. Conclusion: the expression of miR-424 in cervical squamous cell carcinoma is lower than that in adjacent normal tissues. Mi R-424 can down-regulate the activity of MMP-2 by targeting Wnt3A, thus inhibit the invasion and migration of squamous cell carcinoma (SIHA) cells, and reverse the metastasis of cervical cancer in the future. To find a new drug target to improve the cure rate of cervical cancer provides theoretical and experimental basis.
【学位授予单位】：暨南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R737.33

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本文编号：1428528