卵巢子宫内膜异位症IVF-ET结局及卵泡液炎性因子对其影响的研究

发布时间：2018-01-19 00:21

本文关键词： 卵巢子宫内膜异位症 IVF-ET 卵母细胞炎症颗粒细胞凋亡　出处：《天津医科大学》2016年博士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的子宫内膜异位症(Endometriosis EM)影响着10%-15%的育龄妇女,且至少50%EM妇女合并不孕。EM患者有较差的辅助生殖技术临床结局,具体明确的理论依据尚未明了。卵巢型子宫内膜异位症(Ovarian Endometriosis OEM)患者,因其病变主要异位于卵巢,而卵巢又是卵母细胞发育、成熟的场所,有可能对卵母细胞的成熟、受精影响较大,故对其具体情况进行分析。卵母细胞的形态变化有可能与卵母细胞的成熟度以及后期发育潜能有关,分析形态正常、透明带厚、周隙大、颗粒粗、极体碎的卵母细胞的发生率变化及(In Vitro Fertilization-Embryo Transfer IVF-ET)的临床结局变化情况,为通过卵母细胞形态预测临床结局提供实验依据。子宫内膜异位症卵泡液微环境的变化对卵母细胞质量及其周围颗粒细胞的影响是近年辅助生殖技术领域研究的热点,分析OEM患者卵泡液的中炎性因子IL-6、TNF-α、IL-1变化对卵母细胞成熟、分化、形态的影响及卵丘颗粒细胞的影响,为改善OEM临床结局提供实验依据。方法收集2013年6月至2015年1月某试管婴儿中心152例OEM资料为实验组,输卵管因素不孕患者168例为对照组,回顾性分析。比较两组的临床基本数据包括年龄、不孕年限、基础体重指数、窦卵泡数,FSH、LH、E2以及获卵率、成熟卵(metaphaseⅡMⅡ)率、受精率、补救-卵胞浆内单精子注射(Recovery-Intracytoplasmic Sperm Injection R-ICSI)率、优胚率、生化妊娠率、临床妊娠率以及流产率。比较正常、颗粒粗、透明带厚、周隙大、极体碎五种形态卵母细胞受精率、补救卵胞浆内单精子注射(R-ICSI)率、卵裂率、优胚率、生化妊娠率以及临床妊娠率。ELISA法检测取卵当日卵泡液IL-6、TNF-α、IL-1表达变化。两种不同的卵泡液对小鼠各阶段未成熟卵母细胞进行培养,分析比较各个时间点的成熟率。比较体外培养成熟与正常体内成熟的小鼠卵母细胞的受精率、异常形态率以及优胚率。体外培养观察卵丘颗粒细胞的生长情况,TUNEL法检测颗粒细胞凋亡,化学发光法检测单个卵泡E2水平的变化,分析其与IL-6、TNF-α、IL-1水平、MⅡ卵率和临床妊娠率的相关性。结果1.OEM组和输卵管因素组基本临床数据无显著性差异(P0.05)。OEM组的获卵率、MⅡ卵率、受精率、优胚率、生化妊娠率、临床妊娠率显著低于输卵管因素组,R-ICSI率显著高于输卵管因素组,差异有统计学意义(P0.05)2.OEM组正常形态卵较输卵管因素组显著减少,颗粒粗、周隙大、透明带厚的卵较输卵管因素组显著增多,差异有统计学意义(P0.05)。极体碎的卵增多不显著,差异无统计学意义(P0.05)。正常形态卵的优胚率和生化妊娠率、临床妊娠率较颗粒粗、周隙大、极体碎的卵增高,差异有统计学意义(P0.05)。正常形态卵受精率较透明带厚组显著升高而R-ICSI率显著降低,差异有统计学意义(P0.05),临床结局差异无统计学意义(P0.05)3.OEM组IL-6、TNF-α、IL-1表达均显著高于输卵管因素组,差异有统计学意义(P0.05)。GV、MⅠ、AM卵分别于培养24h、12h、6h成熟率达高峰,OEM组卵成熟率显著低于输卵管因素组,差异具有统计学意义(P0.05)。体内、体外成熟小鼠卵母细胞的受精率、异常形态率差异无统计学意义,但是体外成熟优胚率较体内成熟卵的优胚率显著下降,差异具有统计学意义(P0.05)4.OEM组卵丘颗粒细胞生长情况较差。OEM组卵丘颗粒细胞凋亡率较输卵管因素组升高,单个卵泡的E2值降低,差异具有统计学意义(P0.05).IL-6、TNF-α、IL-1水平与卵丘颗粒细胞凋亡率正相关;卵丘颗粒细胞凋亡率与单个卵泡的E2水平负相关;单个卵泡的E2水平与MⅡ卵率正相关;MⅡ卵率与临床妊娠率正相关(P0.001)结论OEM的IVF临床结局较差,异常形态卵母细胞增多,卵母细胞质量较差;不同形态卵母细胞发育潜能不同;OEM卵泡液中IL-6、TNF-α、IL-1表达显著升高,造成卵母细胞所处的炎性微环境,可能影响小鼠卵母细胞的成熟以及后期分化、发育;不同未成熟卵体外培养需要时间不同;炎性微环境使卵丘颗粒细胞凋亡增加、合成雌激素的功能下降,影响卵母细胞成熟、分化及临床结局,改善OEM的IVF-ET结局可以从改善卵母细胞质量和其所处的炎性微环境入手。
[Abstract]:Objective To provide an experimental basis for the clinical outcome of ovarian endometriosis . The changes of the microenvironment of ovarian endometriotic fluid on the maturation , differentiation and morphology of oocytes and the effect of the changes of IL - 6 , TNF - 伪 and IL - 1 on the maturation , differentiation and morphology of oocytes were analyzed . The results showed that there was no significant difference between the two groups ( P0.05 ) . There was no significant difference in the fertilization rate ( P0.05 ) . There was no significant difference in the fertilization rate and abnormal morphology of the mature oocytes in vitro . However , there was no significant difference in the rate of fertilization between the mature and mature eggs in the OEM group ( P0.05 ) . The apoptosis rate of the eggs in the OEM group was significantly correlated with the E2 level of the single follicle .

【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R714.8

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