RNA结合蛋白La对宫颈癌细胞侵袭转移的影响及其机制
本文关键词: RNA结合蛋白 侵袭 宫颈癌 RNA干扰 出处:《西安交通大学学报(医学版)》2015年03期 论文类型:期刊论文
【摘要】:目的探讨RNA结合蛋白La(La)对宫颈癌细胞侵袭转移的作用及其作用机制。方法采用RNA干扰技术沉默La基因在宫颈癌细胞株HeLa中的表达,并通过G418筛选,构建稳定表达的HeLa的La干扰克隆。采用划痕实验、Transwell小室等检测La对宫颈癌细胞侵袭转移的影响。利用Western blot的方法检测细胞中基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)的表达,并采用明胶酶谱的方法检测细胞培养上清中MMP-2的活性。结果 La干扰后细胞的迁徙和侵袭能力明显降低,对细胞迁徙距离和穿过Transwell小室的细胞数目进行分析后发现,差异有统计学意义;同时发现在细胞中MMP-2的蛋白表达水平及酶活性均降低,而TIMP-2的蛋白表达水平上调。结论 La对宫颈癌的侵袭转移具有促进作用,这种作用可能与其对基质金属蛋白及其抑制剂的调控相关。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of RNA binding protein La-La on invasion and metastasis of cervical cancer cells and its mechanism. Methods RNA interference technique was used to silence the expression of La gene in cervical cancer cell line HeLa. The La interference clone of HeLa was constructed by G418 screening. Scratch test was used. The effect of La on invasion and metastasis of cervical cancer cells was detected by Transwell chamber and Western blot method was used to detect matrix metalloproteinase 2 (MMP-2). And matrix metalloproteinase inhibitor 2 (TIMP-2). The activity of MMP-2 in the supernatant of cell culture was detected by gelatin zymogram. Results the migration and invasion ability of the cells were significantly decreased after La interference. The cell migration distance and the number of cells passing through the Transwell chamber were analyzed and the difference was statistically significant. At the same time, it was found that the protein expression and enzyme activity of MMP-2 were decreased, but the protein expression of TIMP-2 was up-regulated. Conclusion La can promote the invasion and metastasis of cervical cancer. This effect may be related to its regulation of matrix metalloprotein and its inhibitors.
【作者单位】: 西安交通大学医学部第二附属医院妇产科;西安交通大学医学部第二附属医院普通外科;
【基金】:国家自然科学基金资助(No.81070536)~~
【分类号】:R737.33
【正文快照】: 宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤,世界范围内居女性癌症相关死亡病因的第2位[1]。其中转移复发是引起患者死亡的最主要原因[2]。癌症细胞的侵袭转移是一个多种因素参与的复杂过程,包括癌症细胞从原发部位脱离,通过分泌基质金属蛋白酶等分子降解细胞外间质,穿透血管和淋巴管管壁,
【参考文献】
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【共引文献】
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,本文编号:1450063
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