阴道植入物对成纤维细胞增殖和蛋白合成的影响

发布时间：2018-02-15 01:48

本文关键词： 盆底器官脱垂阴道前壁成纤维细胞聚丙烯增殖胶原蛋白　出处：《福建医科大学》2014年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的：不同网片对盆底功能障碍性疾病患者的阴道前壁成纤维细胞增值、胶原蛋白合成的影响。方法：选择2013年3月~2013年5月在南京军区福州总院妇产科行盆底重建术的患者5例作为研究对象。术中切取的阴道前壁组织，组织块培养法于体外行阴道前壁成纤维细胞原代培养。倒置显微镜观察细胞形态，用抗波形蛋白抗体和抗角蛋白抗体进行免疫组织化学染色法鉴定成纤维细胞。将培养至第4~6代成纤维细胞分为4组，分别为加入Prolift网片（Prolift组）、Avaulta网片（Avaulta组）、TVT-O网片（TVT-O组）及不加网片（正常对照组），采用四甲基偶氮唑蓝比色法（MTT法）检测4组培养第2、4、7天时的细胞增殖情况，采用Western bolt法检测成纤维细胞与网片共培养第4天时成纤维细胞分泌I、III型胶原蛋白情况。结果： 1.用阴道前壁筋膜组织行组织块法培养可成功获得大量原代的成纤维细胞，此法取材方便，过程简单，成纤维细胞于体外培养时增殖活跃。用倒置显微镜观察细胞形态：细胞贴壁生长，体积较大，多突起，呈纺锤形或星形，细胞核呈规则的卵圆形，多核仁。待所培养的细胞传至第4代后用抗波形蛋白抗体和抗角蛋白抗体进行免疫组织化学染色后，细胞抗波形蛋白抗体阳性，抗角蛋白抗体阴性，可证实为成纤维细胞。 2.细胞增殖实验(MTT法)：加入网片后培养2天时，正常对照组、Prolift组、Avaulta组和TVT-O组吸光值分别为（0.790±0.023），(0.655±0.017)，(0.644±0.022)和(0.538±0.067)；培养4天时，相应组的吸光值分别为（0.843±0.014），(0.716±0.045)，(0.673±0.025)和(0.283±0.008)；培养7天时分别为（2.040±0.035），(1.201±0.126)，(1.109±0.087)和(0.196±0.017)。正常对照组测得各时期的吸光度值均高于相应时期的三个网片组，经分别比较，差异均具有统计学意义(P0.05)，表明三种网片对成纤维细胞增殖均有影响。成纤维细胞分别与三种不同的网片共培养2天时，Prolift组吸光度值稍高于Avaulta组和TVT-O组，但经组间分别两两比较，差异均无统计学意义(P0.05)；培养第4天和第7天时，Prolift组和Avaulta组吸光值均明显高于TVT-O组，分别比较，，差异均具有统计学意义(P0.05)；Prolift组、Avaulta组各期之间的吸光度值相仿，差异无统计学意义(P0.05)。 3. Western blot法：加入网片后培养4天时，正常对照组、 Prolift组、Avaulta组和TVT-O组I型胶原蛋白表达量分别为（7.801±0.253），(5.421±0.191)，(5.274±0.195)和(4.041±0.154)；Ⅲ型胶原蛋白表达量分别为（1.062±0.104），(0.870±0.051)，(0.865±0.047)和(0.651±0.073)。正常对照组与Prolift组、Avaulta组和TVT-O组之间的I型和Ⅲ型胶原蛋白分别两两比较，差异均有统计学意义(P＜0.05)；其中Prolift组和Avaulta组的I型和Ⅲ型胶原蛋白分别比较，差异无统计学意义(P＞0.05)，但Prolift组、Avaulta组中的I型、Ⅲ型胶原蛋白分别与TVT-O组进行比较，差异均有统计学意义(P＜0.05)。结论： l.应用组织块法体外培养盆底功能障碍性疾病患者的阴道壁成纤维细胞，可获得大量的原代成纤维细胞，增殖良好。 2.三种聚丙烯网片对体外培养条件下的人阴道壁成纤维细胞增殖、胶原蛋白合成均有一定的影响。 3.三种网片之间相比，Prolift网片与Avaulta网片对成纤维细胞增值、胶原蛋白合成的影响相当，且均比TVT-O网片影响小。 4.网片孔径越大，对成纤维细胞增值、胶原蛋白合成影响越小。
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【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R711.5

【参考文献】