10058-F4诱导宫颈癌CaSki细胞凋亡及其机制探索
本文选题:宫颈肿瘤 + 细胞凋亡 ; 参考:《重庆医学》2017年06期
【摘要】:目的探讨10058-F4诱导宫颈癌CaSki细胞凋亡的现象及机制。方法用CCK8的方法检测不同浓度的10058-F4和10058-F4作用不同时间对CaSki细胞生长的影响;流式细胞术检测10058-F4对CaSki凋亡率的影响;Western blot方法检测10058-F4的药物有效性(c-MYC的表达下调)及对CaSki细胞的凋亡诱导作用;Western blot和RT-PCR的方法检测线粒体蛋白的表达情况,流式细胞术检测细胞ROS产生。结果通过CCK8实验检测出10058-F4对CaSki的增殖抑制具有时间依赖性和浓度依赖性,始于第48小时,IC50为122μmmol/L。用122μmmol/L的10058-F4处理CaSki细胞48h,通过流式细胞术检测凋亡发现处理组细胞出现明显凋亡(52%),同时Western blot检测发现剪切型PARP表达量上调。Western blot和RT-PCR检测发现122μmmol/L的10058-F4处理CaSki细胞48h可以明显降低线粒体氧化磷酸化蛋白(NDUFS1、SDHA、UQCRC2、COXIV、OSCP)的表达,引起线粒体活性氧(ROS)产生明显增高,从而诱导细胞凋亡。结论 10058-F4可以通过降低线粒体氧化磷酸化蛋白的表达引起ROS产生来诱导CaSki细胞凋亡。
[Abstract]:Objective to investigate the phenomenon and mechanism of CaSki cell apoptosis induced by 10058-F4.Methods CCK8 was used to detect the effects of different concentrations of 10058-F4 and 10058-F4 on the growth of CaSki cells.The effect of 10058-F4 on the apoptosis rate of CaSki was detected by flow cytometry. Western blot assay was used to detect the pharmacokinetics of 10058-F4 and the expression of c-MYC was down-regulated. Western blot and RT-PCR were used to detect the expression of mitochondrial protein in CaSki cells.ROS production was detected by flow cytometry.Results the inhibition of CaSki proliferation by 10058-F4 was found to be time-and concentration-dependent by CCK8 assay, and the IC50 was 122 渭 mol / L at 48h.CaSki cells were treated with 10058-F4 at 122渭 mmol/L for 48h. Apoptosis was detected by flow cytometry. The expression of shearing PARP was upregulated by Western blot. Western blot and RT-PCR analysis showed that CaSki cells treated with 122 渭 mmol/L 10058-F4 could be treated with CaSki cells for 48h.In order to reduce the expression of mitochondrial oxidative phosphorylated protein (NDUFS1) SDHAA UQCRC2COXIVOSCP,Mitochondrial reactive oxygen species (Ros) production was significantly increased, thus inducing apoptosis.Conclusion 10058-F4 can induce apoptosis of CaSki cells by reducing the expression of mitochondrial oxidative phosphorylated protein and inducing ROS production.
【作者单位】: 华中科技大学附属武汉中心医院妇产科;
【基金】:武汉市卫生局临床医学科研项目资助(WX11B05)
【分类号】:R737.33
【参考文献】
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【共引文献】
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,本文编号:1750320
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