宫颈癌和胃癌中septin9基因甲基化的研究
本文选题：宫颈癌 + 胃癌 ； 参考：《宁波大学》2014年硕士论文
【摘要】：【目的】 研究宫颈癌和胃癌中septin9启动子甲基化率，并观察分析SAMe对宫颈癌和胃癌中septin9表达的影响，进而探讨septin9启动子甲基化在宫颈癌和胃癌中的意义以及SAMe诱导肿瘤细胞凋亡的可能机制。 【方法】 首先，采用甲基化特异性高分辨率熔解曲线分析（methylation sensitive highresolution melting curve analysis, MS-HRM）技术检测宫颈癌细胞系HeLa、胃癌细胞系MGC以及13例宫颈癌肿瘤组织中septin9启动子甲基化情况；并分析septin9启动子甲基化与宫颈癌肿瘤组织临床病理进程的相关性。其次，通过DAPI荧光核染色法观察由SAMe处理24h、48h后宫颈癌细胞系HeLa和胃癌细胞系MGC的细胞凋亡情况。最后，通过实时定量逆转录-聚合酶链反应（quantitative reverse transcriptase-polymerase chainreaction, qRT-PCR）方法和MS-HRM技术分别检测由SAMe处理后宫颈癌细胞系HeLa和胃癌细胞系MGC中septin9-v1,v5,v mRNA表达水平以及septin9启动子甲基化程度。 【结果】 1.发现宫颈癌细胞系HeLa和胃癌细胞系MGC中存在septin9启动子甲基化。 2.发现38.5%（513）的宫颈癌组织存在septin9启动子甲基化，但其与宫颈癌的临床分期、淋巴结有无转移、有无脉管内癌栓以及患者年龄这些临床病理参数之间的差异均无统计学差异（P㧐0.05）。 3.发现由SAMe处理24、48h后宫颈癌细胞系HeLa和胃癌细胞系MGC出现凋亡。 4.与各自的对照组相比，实验组中宫颈癌细胞系HeLa和胃癌细胞系MGC中septin9-v1,v5,v的mRNA表达水平明显降低。 5.与对照组相比，由SAMe处理后宫颈癌细胞系HeLa和胃癌细胞系MGC中septin9启动子甲基化程度基本没有变化。 【结论】 本研究发现宫颈癌和胃癌中存在septin9启动子异常甲基化。虽然SAMe并不能使宫颈癌细胞系HeLa和胃癌细胞系MGC中septin9的甲基化位点发生逆转，但在其作用下septin9-v1表达水平降，并且宫颈癌细胞系和胃癌细胞系发生凋亡。表明SAMe可能通过某种途径作用于septin9，导致septin9-v1mRNA表达水平降低，阻碍了JNK信号途径参与细胞增殖的过程，，因而使宫颈癌和胃癌细胞系发生凋亡。
[Abstract]:[purpose]To study the methylation rate of septin9 promoter in cervical cancer and gastric cancer, and to observe the effect of SAMe on the expression of septin9 in cervical cancer and gastric cancer.To explore the significance of septin9 promoter methylation in cervical cancer and gastric cancer and the possible mechanism of SAMe induced apoptosis of tumor cells.[methods]Firstly, methylation sensitive highresolution melting curve analysis (MS-HRM) technique was used to detect the methylation of septin9 promoter in cervical cancer cell line HeLa, gastric cancer cell line MGC and 13 cases of cervical cancer tissues.The correlation between methylation of septin9 promoter and clinicopathological process of cervical carcinoma was analyzed.Secondly, the apoptosis of cervical cancer cell line HeLa and gastric cancer cell line MGC was observed by DAPI fluorescence nuclear staining after 24 h treatment with SAMe for 48 h.Finally, quantitative reverse transcriptase-polymerase chain reaction (qRT-PCRR) and MS-HRM technique were used to detect the expression of septin9-v1 v5v mRNA and the methylation of septin9 promoter in the cervical cancer cell line HeLa treated with SAMe and the gastric cancer cell line MGC, respectively.[results]1.Septin9 promoter methylation was found in cervical cancer cell line HeLa and gastric cancer cell line MGC.2.It was found that there was methylation of septin9 promoter in the tissues of cervical carcinoma (38.5% and 513), but there was no significant difference between the methylation of septin9 promoter and clinical stages, lymph node metastasis, intravascular cancer thrombus and age of the patients.3.It was found that apoptosis of cervical cancer cell line HeLa and gastric cancer cell line MGC was observed after treatment with SAMe for 24 h for 48 h.4.Compared with the control group, the mRNA expression of septin9-v1v5v in cervical cancer cell line HeLa and gastric cancer cell line MGC was significantly decreased in the experimental group.5.Compared with the control group, the degree of methylation of septin9 promoter in cervical cancer cell line HeLa and gastric cancer cell line MGC was almost unchanged after treated with SAMe.[conclusion]In this study, abnormal methylation of septin9 promoter was found in cervical cancer and gastric cancer.Although SAMe could not reverse the methylation site of septin9 in HeLa and MGC cells, the expression of septin9-v1 decreased, and apoptosis occurred in cervical cancer and gastric cancer cell lines.It is suggested that SAMe may act on septin9 through some way, resulting in the decrease of septin9-v1mRNA expression, which hinders the JNK signaling pathway to participate in the process of cell proliferation and thus induces apoptosis in cervical and gastric cancer cell lines.
【学位授予单位】：宁波大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R737.33;R735.2
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