沉默ATF5对卵巢癌细胞skov-3裸鼠成瘤的研究

发布时间：2018-04-30 22:23

  本文选题：ATF5 + 上皮性卵巢癌　； 参考：《青岛大学》2014年硕士论文

【摘要】：目的： 分析慢病毒转染沉默人转录激活因子5(Activating transcription factor5, ATF5)后,对卵巢癌SKOV-3细胞体外增殖、凋亡及体内成瘤的影响,通过体外和体内的实验研究来探讨卵巢癌的基因治疗,探索沉默ATF5的表达后,能否开辟卵巢癌治疗的新方法。 方法： 1、慢病毒携带小干扰RNA,分别将构建好的携带RNA干扰质粒(沉默ATF5)和空载体的慢病毒感染生长良好的卵巢癌SKOV-3细胞和卵巢癌SKOV-3细胞进行对照,对比观察细胞的生长状态。 2、MTT法检测细胞的增殖生长。 3、罗氏凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡。 4、采用裸鼠皮下接种细胞的方法,于裸鼠皮下接种成瘤,观察各组裸鼠的存活状态、种植瘤生长情况,进一步计算成瘤率。 5、RT-PCR检测移植瘤ATF5mRNA的表达情况。 6、Western-Blot检测移植瘤ATF5蛋白的表达情况。 7、HE染色观察瘤组织组织学变化。 结果： 1、在体外培养条件下,SKOV-3的生物学形态没有明显差异。在相同培养时间内细胞的增殖无统计学意义,但RNA干扰的实验组细胞凋亡数量较其他两组明显增多。 2、皮下接种成瘤后,三组裸鼠的成瘤率没有明显区别,但RNA干扰组肿瘤成瘤时间晚,生长缓慢。 3、移植瘤组织RT-PCR显示RNA干扰组mRNA表达量与其他对照组相比差异有统计学意义(P0.05)； 4、瘤组织Western-Blot显示RNA干扰组ATF5蛋白表达差异有统计学意义(P0.05)； 5、HE染色法观察RNA干扰组分裂相明显减少,凋亡现象明显。 结论： 沉默ATF5的表达后人上皮性卵巢癌裸鼠移植瘤生长缓慢,这可能成为卵巢癌基因治疗的新靶点。
[Abstract]:Objective:
The effect of Activating transcription factor5 (ATF5) on the proliferation, apoptosis and tumor formation of ovarian cancer SKOV-3 cells in vitro was analyzed. The gene therapy of ovarian cancer was explored in vitro and in vivo, and the new method of ovarian cancer treatment could be opened up after the expression of silent ATF5 was explored.
Method锛，

本文编号：1826499