人卵巢颗粒细胞原代培养方法的比较

发布时间：2018-05-03 05:01

  本文选题：卵巢颗粒细胞 + 细胞分离方法　； 参考：《广东医学》2017年S1期

【摘要】：目的对比5种不同方法分离人卵巢颗粒细胞的效果,并选择出高效、稳定的分离纯化、体外培养的有效方法。方法收集不孕症患者行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)穿卵时的卵泡液,采用裂解法、裂解+胰酶法、密度梯度离心法(包括Precoll+胰酶、Precoll+Ⅰ型胶原酶、Precoll+透明质酸酶)分离颗粒细胞后进行活细胞计数,卵泡生成素免疫组化染色鉴定,MTT法检测细胞增殖能力,检测颗粒细胞体外分泌雌激素含量。结果在使用不同方法分离颗粒细胞时,Precoll+胰酶、Precoll+Ⅰ型胶原酶、Precoll+透明质酸酶3种方法得到细胞数量多于裂解法及裂解+胰酶法(P0.05)。各种分离方法的细胞生长趋势并无明显差异。裂解法、裂解+胰酶法雌激素含量高于Precoll+胰酶、Precoll+Ⅰ型胶原酶、Precoll+透明质酸酶(P0.05)。结论 5种方法均成功分离得到颗粒细胞,但每种方法各有优缺点,根据实验目的不同需选择不同的方法。
[Abstract]:Objective to compare the effects of five different methods on the isolation of human ovarian granulosa cells and to select an efficient and stable method for isolation and purification of human ovarian granulosa cells in vitro. Methods the follicular fluid of infertile patients undergoing IVF-ET-IVF-ET in vitro fertilization was collected, and the cleavage method and trypsin method were used. Granulosa cells were isolated by density gradient centrifugation (including Precoll trypsin 鈪，

本文编号：1837062