环境内分泌干扰物双酚A对人子宫内膜细胞SGK1表达的影响

发布时间：2018-05-17 18:47

  本文选题：BPA + 子宫内膜细胞　； 参考：《浙江大学》2017年硕士论文

【摘要】：目的:建立人子宫内膜细胞体外培养模型,探讨BPA对人子宫内膜细胞SGK1表达的影响,为进一步研究BPA是否通过SGK1干扰子宫内膜容受性而导致不孕提供依据。材料与方法:构建人子宫内膜细胞体外混合培养方法;实验设对照组及BPA组。对照组使用常规DEME/F12培养液;BPA组分为3组,分别为DEME/F12培养液中加终浓度为0.01ug/mlBPA、0.1ug/mlBPA、lug/mlBPA。BPA 干预时间为 24 小时。检查细胞形态,同时进行角蛋白和波形蛋白免疫荧光染色,为实验的进行提供体外混合人子宫内膜细胞。利用免疫荧光方法测定4组SGK1蛋白表达情况。通过荧光定量PCR技术,检测4组子宫内膜细胞上基因SGK1的mRNA表达水平。结果:离体培养的人子宫内膜细胞,接种24 h后细胞大多能贴壁。上皮细胞角蛋白呈阳性表达,波形蛋白呈阴性表达;间质细胞波形蛋白呈阳性表达,角蛋白表达阴性。人子宫内膜细胞存在SGK1表达。免疫荧光结果提示,随着BPA暴露浓度的增加,SGK1蛋白荧光强度逐渐下降。RT-PCR结果提示,BPA下调子宫内膜细胞SGK1 mRNA的表达。结论:BPA影响子宫内膜细胞SGK1蛋白及mRNA的表达,提示BPA暴露可能影响子宫内膜容受性。
[Abstract]:Aim: to establish a human endometrial cell culture model in vitro to investigate the effect of BPA on the expression of SGK1 in human endometrial cells, and to provide a basis for further study on whether BPA interferes with endometrial receptivity by SGK1. Materials and methods: the method of mixed culture of human endometrial cells in vitro was constructed, and the control group and BPA group were set up. The control group was divided into three groups using the conventional DEME/F12 medium. The final concentration of DEME/F12 was 0.01ug- / ml BPA-0.1ug- / ml BPA-lug / ml BPA.BPA for 24 hours. Cell morphology was examined and keratin and vimentin immunofluorescence staining were performed to provide a mixture of human endometrial cells in vitro. The expression of SGK1 protein in 4 groups was detected by immunofluorescence method. The level of mRNA expression of SGK1 gene on endometrial cells was detected by fluorescence quantitative PCR technique. Results: most of the cultured human endometrial cells could adhere to the wall 24 h after inoculation. Positive expression of keratin and negative expression of vimentin in epithelial cells, positive expression of vimentin and negative expression of keratin in interstitial cells. There is SGK1 expression in human endometrial cells. The results of immunofluorescence showed that the fluorescence intensity of SGK1 protein decreased gradually with the increase of BPA exposure concentration. RT-PCR results suggested that BPA down-regulated the expression of SGK1 mRNA in endometrial cells. ConclusionThe expression of SGK1 protein and mRNA in endometrial cells was affected by WBPA, suggesting that BPA exposure might affect endometrial receptivity.
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R711.6

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 李洁 ,郑维国 ,辛晓燕 ,赵海波;白介素8和干扰素α对离体培养的子宫内膜细胞的影响[J];解放军医学杂志;2003年11期

2 陈珉媛;秦莉花;李晟;王若光;李春梅;;脂多糖对人子宫内膜细胞活力、周期及凋亡率的影响[J];医学临床研究;2007年09期

3 秦莉花;王若光;李晟;李春梅;谭运福;;脂多糖对子宫内膜细胞的炎症相关基因表达的影响[J];生殖与避孕;2009年04期

4 唐莉;黄荷凤;张云霞;马艳萍;周彩云;;子宫内膜异位症患者子宫内膜细胞与正常人子宫内膜细胞体外生长特性的比较[J];中外医疗;2009年15期

5 ;人体子宫内膜细胞离体培养和染色体的制备[J];浙江医科大学学报;1982年S1期

6 赵昀 ,张宏,李亚里,魏丽惠,田方,关铮;子宫内膜细胞的培养和侵袭性研究[J];解放军医学杂志;2003年05期

7 殷莉,何主强,钟刚;骨桥蛋白在子宫内膜细胞的多因素调节[J];实用医学杂志;2005年09期

8 刘晓瑷,朱岩平,金毓翠;消炎痛对人子宫内膜细胞摄取前列腺素E_2的影响[J];生殖与避孕;1989年04期

9 宿爱琴,涂持坤,张玉华,糜若然,张双革;子宫内膜间质细胞雌二醇的分泌及其调节[J];现代妇产科进展;2002年03期

10 黄冬梅,黄光英,陆付耳;胚泡围着床期子宫内膜细胞的增殖、分化与凋亡[J];生殖医学杂志;2004年05期

相关会议论文 前2条

1 李志刚;郎景和;冷金花;刘东远;刘珠凤;孙大为;朱兰;;环氧合酶——2选择性抑制剂与前列腺素E2对子宫内膜异位症子宫内膜细胞COX-2mRNA表达与凋亡的影响[A];第八次全国妇产科学学术会议论文汇编[C];2004年

2 郭一帆;李卓伦;李启辉;杨树标;何柏松;姚元庆;;重组人类白细胞抗原-G5对子宫内膜细胞容受性的影响[A];中华医学会第十次全国妇产科学术会议产科会场（产科学组、妊高症学组）论文汇编[C];2012年

相关博士学位论文 前2条

1 王永刚;大鼠骨髓间充质干细胞向子宫内膜细胞分化的体外实验[D];中南大学;2012年

2 姚佳;孕酮与干扰素-τ对体外培养的牛子宫内膜细胞基因组表达谱的影响[D];四川农业大学;2011年

相关硕士学位论文 前10条

1 叶幼荣;蛋鸡子宫内膜细胞钙转运及蛋壳钙化早期钙沉积机制的研究[D];石河子大学;2015年

2 李玛俊;羊膜载体对子宫内膜细胞HGF、MMP-9、VEGF表达的影响[D];郑州大学;2015年

3 孙光娟;补肾助孕方对大鼠子宫内膜细胞ER、MMP-9、TIMP-1及卵巢黄体细胞分泌激素的影响[D];南京中医药大学;2014年

4 郑欣欣;绵羊子宫内膜细胞三维培养模式的建立及17-β雌二醇对β-防御素1表达的影响[D];内蒙古农业大学;2016年

5 郑佳;高浓度棕酸条件下奶牛子宫内膜细胞基因表达谱榈差异分析[D];沈阳农业大学;2017年

6 陈秀荔;孕早期家兔子宫内膜细胞分离与培养方法的建立[D];西北农林科技大学;2004年

7 何亚琼;以羊膜为载体培养子宫内膜细胞的实验研究[D];中南大学;2010年

8 方庆仙;二VA英调节人离体子宫内膜细胞表达IL-6和TNF-α的研究[D];浙江大学;2005年

9 王红燕;胰岛素、睾酮、AngⅡ、Ang-（1-7）对体外培养子宫内膜细胞的血管紧张素受体及细胞发育的影响[D];河北医科大学;2013年

10 丁竹筠;钙离子激活的钾离子通道在人子宫内膜蛋白水平的表达及其功能研究[D];浙江大学;2007年

，

本文编号：1902452