慢病毒载体介导的RNAi技术抑制RhoC基因在卵巢癌细胞中表达的体外实验研究

发布时间：2018-06-13 08:30

  本文选题：RNA干扰 + 慢病毒　； 参考：《吉林大学》2014年硕士论文

【摘要】：目的： 构建慢病毒介导的能够稳定沉默卵巢癌SKOV3细胞中RhoC基因的干扰载体,观察其对卵巢癌SKOV3细胞内RhoC基因表达的抑制作用。 材料和方法： 将产生RhoC miRNA分子的携带绿色荧光蛋白（GFP）的重组慢病毒感染卵巢癌SKOV3细胞后，用嘌呤霉素筛选稳定表达的细胞系。应用荧光定量PCR法检测SKOV3细胞中的RhoC mRNA。 结果： 成功构建了特异性干扰载体,将其转染SKOV3细胞后,干扰组细胞中RhoC mRNA的表达率较空白对照组显著降低。 结论： 构建的重组慢病毒RhoC shRNA干扰载体能有效抑制SKOV3细胞中RhoC mRNA的表达，，具有较高的沉默效率。
[Abstract]:Aim: to construct an interference vector mediated by lentivirus to stabilize the expression of RhoC gene in ovarian cancer SKOV3 cells and to observe its inhibitory effect on the expression of RhoC gene in ovarian cancer SKOV3 cells. Materials and methods: the recombinant lentivirus carrying green fluorescent protein (GFP), which produced RhoC miRNA, was infected with ovarian cancer cell line SKOV3, and the stable expressed cell line was screened by purine mycin. RhoC mRNA in SKOV3 cells was detected by fluorescence quantitative PCR. Results: the specific interference vector was successfully constructed and transfected into SKOV3 cells. The expression rate of RhoC mRNA in the interference group was significantly lower than that in the control group. Conclusion: the recombinant lentivirus RhoC shRNA interference vector can effectively inhibit the expression of RhoC mRNA in SKOV3 cells and has a high silencing efficiency.
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R737.31

【参考文献】

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本文编号：2013383