过表达和抑制miR-133a对JEG-3中HLA-G表达的影响

发布时间：2018-07-27 18:32

【摘要】：目的研究微小miR-133a在人绒癌细胞株(JEG-3)中对人类白细胞抗原G(HLA-G)的表达调控作用。方法用脂质体包裹化学合成的miR-133a前体分子并转染JEG-3,从而过表达及抑制miR-133a,逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR)检测转染后miR-133a及HLA-G在mRNA水平的表达情况。Western blot法检测转染miR-133a后细胞中HLA-G蛋白水平的表达。结果 JEG-3细胞中抑制miR-133a后HLA-G在mRNA及蛋白水平均表达增加;在JEG-3细胞中过表达miR-133a后HLA-G在mRNA及蛋白水平均表达下降,差异有统计学意义(P0.05)。结论在JEG-3细胞中miR-133a能够负性调控HLA-G的表达,进一步验证了miR-133a与自然流产、子痫前期等疾病的相关性,并为进一步探索相关疾病机制及临床诊治提供了一定的实验基础。
[Abstract]:Objective to study the regulation of human leukocyte antigen G (HLA-G) expression in human choriocarcinoma cell line (JEG-3) by minimal miR-133a. Methods the chemically synthesized miR-133a precursor molecule was encapsulated by liposome and transfected into JEG-3 to overexpression and inhibit miR-133a. Reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) was used to detect the expression of miR-133a and HLA-G at the mRNA level. Western blot assay was used to detect the miR-133a transfection. Expression of HLA-G protein in cells. Results after inhibition of miR-133a in JEG-3 cells, the expression of HLA-G in mRNA and protein increased, and the expression of HLA-G in mRNA and protein decreased after over-expression of miR-133a in JEG-3 cells, the difference was statistically significant (P0.05). Conclusion miR-133a can negatively regulate the expression of HLA-G in JEG-3 cells, which further verifies the correlation between miR-133a and spontaneous abortion, preeclampsia and other diseases, and provides a certain experimental basis for further exploring the mechanism of related diseases and clinical diagnosis and treatment.
【作者单位】： 西安医学院第一附属医院妇科;西安交通大学医学部法医学院;中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院妇产科;
【基金】：陕西省教育厅科研计划项目(编号:12JK0767)
【分类号】：R714.2

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本文编号：2148771