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沉默Nek2基因对卵巢癌SKOV3细胞周期的影响

发布时间:2018-07-31 11:45
【摘要】:目的研究RNA干扰NIMA相关激酶2(Nek2)表达对卵巢癌细胞SKOV3细胞周期的影响及其相关的分子机制。方法将针对Nek2基因的siRNA转染至SKOV3细胞中,采用流式细胞技术检测SKOV3细胞周期变化,并用Western blot技术检测Nek2-siRNA转染入卵巢癌SKOV3细胞48h后,与细胞周期相关的因子cyclinB1、CDK1及P27蛋白表达水平以及ERK1/2磷酸化水平的变化。结果空白对照组、阴性对照组和RNA干扰组中处于G2/M期的细胞比例分别为13.72%、12.27%和1.56%,与两对照组比较,处于G2/M期的干扰组细胞明显减少(P0.05)。Nek2基因沉默后,与两对照组比较,SKOV3细胞内cyclinB1和CDK1的蛋白表达水平明显下降,P27的蛋白表达水平明显上调,SKOV3细胞内ERK1/2磷酸化水平明显下降(P0.05)。结论沉默Nek2基因,可阻止卵巢癌SKOV3细胞启动有丝分裂,从而抑制其增殖。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of RNA interference on the expression of NIMA associated kinase 2 (Nek2) in ovarian cancer cell line SKOV3 and its molecular mechanism. Methods siRNA targeting Nek2 gene was transfected into SKOV3 cells. The cell cycle changes of SKOV3 cells were detected by flow cytometry and Nek2-siRNA was detected by Western blot technique for 48 h after transfection into SKOV3 cells of ovarian cancer. The expression of cyclin B 1, CDK1 and P27 protein and the phosphorylation of ERK1/2 in the cell cycle. Results the percentage of cells in G _ 2 / M phase in blank control group, negative control group and RNA interference group were 13.72% and 1.56%, respectively. Compared with the two control groups, the number of cells in G _ 2 / M phase interference group was significantly decreased (P0.05). Compared with the control group, the expression of cyclinB1 and CDK1 in SKOV3 cells decreased significantly (P0.05). Conclusion silencing Nek2 gene can inhibit the proliferation of ovarian cancer SKOV3 cells by preventing mitosis.
【作者单位】: 重庆市合川区人民医院妇科;重庆医科大学附属第一医院妇产科;
【基金】:教育部博士点基金资助项目(20080631001) 重庆市卫生局重点项目(2009-1-59)
【分类号】:R737.31

【共引文献】

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