【摘要】：目的：检测卵巢储备功能降低女性颗粒细胞Gremlinl (GREM1) mRNA表达水平,分析Gremlin表达量与体外受精与胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer, IVF-ET)结局的关系,并进一步探讨GREM1参与调控卵丘颗粒细胞扩展从而影响卵巢储备功能。 方法：选取2013年9月-2014年01月在浙江大学附属妇产科医院生殖中心因输卵管因素不孕而行常规IVF治疗的不孕症患者44例,年龄20-37岁。取卵当日收集患者取卵当日静脉血,酶联免疫吸附试验测定血清抗苗勒管激素(anti Mulerian hormone,AMH)水平。卵巢储备功能下降组的纳入标准是：1.血清抗苗勒管激素(anti Mulerian hormone, AMH)1.1ng/ml;2.基础卵泡刺激素(follicle stimulating hormone, FSH10IU/L;3.基础雌二醇(estradiol, E2≥80pg/ml)且窦卵泡数(antral follicle number,AFC)≤5。符合上述3条中的1条。卵巢储备功能正常组的纳入标准是：LAMH2.0ng/ml;2.基础FSH10IU/L;3.基础E280pg/ml且基础AFC5。同时符合上述3条。留取取卵当日所有的卵泡穿刺液用Fiocll梯度离心法分离颗粒细胞,采用定量Real-time PCR检测卵巢储备功能降低患者颗粒细胞GREM1mRNA的表达量及与卵丘颗粒细胞扩展相关的hyaluronan synthase2(HAS2)、tumor necrosis factor alpha-induced protein6(TNFAIP6)、pentraxin3(PTXS)和prostaglandin synthase2(PTGS2)的mRNA表达,详细记录患者临床一般资料及使用促性腺激素的累计剂量、卵泡数、获卵数、受精率、卵裂率及胚胎移植情况,并随访患者妊娠情况。在体外实验中,在KGN细胞的培养基中加入卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)和重组人Gremlin蛋白,分别作用0小时、4小时、6小时和24小时,用定量Real-time PCR检测HAS2、TNFAIP6、PTX3和PTGS2的mRNA表达量。引入SMAD2/3信号通路抑制剂SB431542,与FSH和重组人Gremlin蛋白共同作用于KGN细胞,检测抑制剂SB431542对HAS2、TNFAIP6、PTX3和PTGS2的表达量的影响。所有数据用SPSS16.0for windows软件包进行统计学处理。 结果：1.卵巢储备功能降低患者颗粒细胞GREM1mRNA表达水平显著低于卵巢储备功能正常者；2.颗粒细胞GREM1mRNA表达水平与基础FSH及FSH/LH负相关(p0.05);3.卵巢储备功能降低患者颗粒细胞HAS2.TNFAIP6、PTX3和PTGS2的mRNA表达水平显著低于卵巢储备功能正常者；4.在KGN细胞培养基中加入重组人Gremlin可显著提高HAS2、TNFAIP6、PTX3和PTGS2的mRNA表达水平,且具有时间依赖性,4小时或6小时时表达都显著上升；6.在培养基中同时加入SB431542后,HAS2的mRNA表达水平下降,而TNFAIP6和PTGS2的mRNA表达水平没有显著变化。 结论：1.颗粒细胞3REM1表达水平下降与年轻女性卵巢储备功能降低相关；2.颗粒细胞GREM1mRNA表达水平与基础FSH及FSH/LH负相关；3.卵巢储备功能下降的患者卵丘颗粒细胞扩展过程受阻；4.颗粒细胞GREM1参与调节卵丘颗粒细胞扩展的过程,卵巢储备功能降低患者的颗粒细胞GREM1表达下降,卵丘颗粒细胞扩展过程受阻,是卵巢储备功能降低发生的机制之一；5.GREM1通过SMAD2/3信号通路调控HAS2的表达。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R714.8
【相似文献】
相关期刊论文 前10条
1 ;口腔及颌骨内颗粒细胞病损的临床病理、免疫组化及超微结构研究[J];国外医学.口腔医学分册;1990年04期
2 袁其晓;;卵泡刺激素调节颗粒细胞的甾体生成:钙-钙调制素系统参与其中[J];国外医学.妇产科学分册;1984年02期
3 何真;王亚威;管志信;;人小脑皮质颗粒细胞的发育——扫描电镜研究[J];神经解剖学杂志;1986年02期
4 付娟,邢福祺,陈士岭;酪氨酸蛋白激酶受体B在人卵泡中的表达及意义[J];第一军医大学学报;2003年02期
5 赵玉莲;生长因子影响颗粒细胞分化[J];国外医学.内分泌学分册;1988年04期
6 黄丽丽,庄亚玲,黄荷凤,石一复;粒细胞集落刺激因子在人卵泡颗粒细胞中的表达[J];中华病理学杂志;2003年04期
7 翁静;佐佐木和信;园田yP治;须田满寿美;;排卵后小鼠卵周颗粒细胞在输卵管内死亡过程的研究[J];首都医科大学学报;2005年06期
8 陈毅斐;许程洁;王鑫泉;徐营;;小鼠卵巢颗粒细胞适宜培养体系及激素干预的影响[J];中国组织工程研究;2012年02期
9 濮季行;;生长激素和胰岛素样生长因子-Ⅰ加速孕马血清促性腺激素诱发的颗粒细胞分化[J];生理科学进展;1988年04期
10 赵玉莲,倪江,王京花,程治平,鲁桂琛,王德心,王乃功;某些氨基酸及小分子肽对大鼠卵泡颗粒细胞雌激素与孕激素分泌的影响[J];基础医学与临床;1993年02期
相关会议论文 前10条
1 杨雪;周从容;;胰岛素样生长因子Ⅱ对人颗粒细胞分泌功奶的影响[A];第二届西部地区（12省区）妇产科学术会议论文汇编[C];2006年
2 沈健;冯云;龙雯晴;喇端端;;颗粒细胞水平抑制素B的表达及其在女性生殖中的意义[A];首届沪浙妇产科学术论坛暨2006年浙江省妇产科学学术年会论文汇编[C];2006年
3 丁婷;罗爱月;杨书红;赖志文;卢运萍;马丁;王世宣;;小鼠卵巢颗粒细胞不同分离方法的比较[A];中华医学会第三次全国绝经学术会议暨绝经相关问题学习班论文汇编[C];2011年
4 王春生;李晶;张滕子;宁方勇;朴善花;安铁洙;;拟蜘蛛丝蛋白基因在小鼠颗粒细胞中的整合及其鉴定[A];中国畜牧兽医学会动物解剖学及组织胚胎学分会第十六次学术研讨会论文集[C];2010年
5 翁静;诸定寿;;小鼠卵周围颗粒细胞排卵后在输卵管内死亡过程的研究[A];第九次全国生殖生物学学术研讨会论文摘要集[C];2003年
6 甄t熑，
本文编号：2279730
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/fuchankeerkelunwen/2279730.html
