茶多酚对卵巢癌细胞黏附能力影响及其机制探讨

发布时间：2018-11-06 14:06

【摘要】：目的探讨茶多酚对人卵巢癌SKOV3和3AO细胞黏附能力及对上皮型钙黏蛋白(epithelial cadherin,E-cadherin)和神经型钙黏蛋白(neural cadherin,N-cadherin)表达的影响。方法体外培养人卵巢癌SKOV3和3AO细胞,采用MTT法检测0、5、10、20、40、80和160μg/mL不同浓度茶多酚处理24h后,SKOV3和3AO细胞体外增殖情况,选取后续实验茶多酚的给药浓度。分别选取5、10及20μg/mL茶多酚处理SKOV3细胞24h,10、20及40μg/mL茶多酚处理3AO细胞24h,各自对照组为不含茶多酚的培养液培养24h,采用细胞分离实验观察细胞-细胞间黏附能力的变化;采用细胞黏附实验观察细胞-基质间黏附能力的变化;利用Real-time PCR和蛋白质印迹法检测E-cadherin和N-cadherin在mRNA及蛋白水平的表达变化。结果 MTT实验结果显示,SKOV3(χ2=18.96,P=0.004)和3AO(χ2=16.98,P=0.009)卵巢癌细胞组内增殖抑制率随浓度增高而增强。细胞分离实验结果显示,随着茶多酚给药浓度的增加,SKOV3和3AO细胞在10和20min的分离率逐渐降低,差异均有统计学意义,P值均0.05。细胞黏附率的比较,SKOV3细胞对照组、5、10和20μg/mL组的黏附率分别为100.00%、93.89%、82.50%和67.32%,各组间差异有统计学意义,χ2=9.583,P=0.022;3AO细胞对照组、10、20和40μg/mL组黏附率分别为100.00%、92.65%、86.90%和76.71%,差异有统计学意义,χ2=10.532,P=0.015。Real-time PCR结果显示,SKOV3细胞各实验组的E-cadherin mRNA表达水平增加,χ2=10.532,P=0.015,N-cadherin mRNA表达水平减少,χ2=9.583,P=0.022;3AO细胞中各组N-cadherin mRNA表达水平明显减少,χ2=10.532,P=0.015,但E-cadherin mRNA表达水平无明显变化,χ2=4.499,P=0.212。蛋白质印迹法结果显示,SKOV3细胞中各实验组的E-cadherin蛋白表达水平增加,χ2=10.116,P=0.018,N-cadherin蛋白表达水平减少,χ2=9.804,P=0.02;3AO细胞中实验组与对照比较N-cadherin蛋白表达水平明显减少,χ2=8.868,P=0.031,但E-cadherin蛋白表达水平差异无统计学意义,χ2=1.17,P=0.76。结论茶多酚能够提高卵巢癌SKOV3和3AO细胞-细胞间黏附能力,降低细胞-基质间黏附能力,其机制可能与茶多酚上调E-cadherin及下调N-cadherin表达有关。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of tea polyphenols on the adhesion of human ovarian cancer SKOV3 and 3AO cells and on the expression of epithelial cadherin (epithelial cadherin,E-cadherin) and neuronal cadherin (neural cadherin,N-cadherin). Methods Human ovarian cancer SKOV3 and 3AO cells were cultured in vitro. The proliferation of SKOV3 and 3AO cells was detected by MTT assay after different concentrations of tea polyphenols were treated with different concentrations of tea polyphenols for 24 hours. The concentration of tea polyphenols in subsequent experiments was selected. 10 and 20 渭 g/mL tea polyphenols were used to treat SKOV3 cells for 24 h and 40 渭 g/mL tea polyphenols for 24 h, respectively. The control groups were cultured in culture medium without tea polyphenols for 24 h. Cell separation experiments were used to observe the change of cell-cell adhesion ability. Cell adhesion assay was used to observe the change of cell-matrix adhesion ability, and the expression of E-cadherin and N-cadherin in mRNA and protein levels were detected by Real-time PCR and Western blotting. Results the results of MTT assay showed that the inhibitory rate of proliferation in SKOV3 (蠂 2 + 18.96) and 3AO (蠂 2 + 16.98) ovarian cancer cells increased with the increase of the concentration. The results of cell separation experiment showed that with the increase of tea polyphenol concentration, the isolation rate of SKOV3 and 3AO cells at 10 and 20min decreased gradually, and the difference was statistically significant (P < 0.05). The adhesion rate of SKOV3 cells in the control group, 5 渭 g/mL group and 20 渭 g/mL group was 100.0098.89% and 67.322.50%, respectively. There was significant difference between the two groups (蠂 2, 9.583, P0. 022, P < 0. 022, P 0. 022, P 0. 022). The adhesion rates of 3AO cells in the control group, 100.20 渭 g/mL group and 40 渭 g/mL group were 86.90% and 76.71%, respectively. The difference was statistically significant. The results of 蠂 ~ 2 + 10.532P ~ (0.015) Real-time PCR showed that there was no significant difference between the two groups. The expression level of E-cadherin mRNA was increased in each experimental group of SKOV3 cells, and the expression level of N-cadherin mRNA was decreased in 蠂 2 + 10.532 (P = 0.015), 蠂 ~ (2 +) 9.583 (P ~ (0.022); The expression level of N-cadherin mRNA was significantly decreased in 3AO cells, 蠂 2 + 10.532% P0. 015, but E-cadherin mRNA expression level was not significantly changed. The results of Western blotting showed that the expression level of E-cadherin protein was increased in each experimental group of SKOV3 cells, and the expression level of 蠂 ~ 2 ~ (10. 116) ~ (10. 116) Pu 0.018 ~ (N-cadherin) protein decreased, and that of 蠂 ~ (2) 9.804 ~ (?) Compared with the control group, the expression of N-cadherin protein in the experimental group was significantly lower than that in the control group, and the expression level of E-cadherin protein in the experimental group was significantly lower than that in the control group (蠂 2 + 8.868). However, there was no significant difference in the expression level of E-cadherin protein between the experimental group and the control group. Conclusion Tea polyphenols can increase the ability of SKOV3 and 3AO cell-cell adhesion and decrease the ability of cell-matrix adhesion. The mechanism may be related to the up-regulation of E-cadherin and the down-regulation of N-cadherin expression by tea polyphenols.
【作者单位】： 徐州医学院研究生学院;徐州市中心医院妇产科;
【基金】：江苏省妇幼保健科研项目(F201340) 江苏省第四期“333工程”培养资金资助项目(BRA2013051)
【分类号】：R737.31

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 张思楠;伍春莲;陈杨琼;孙警辉;耿文峰;杨军;;茶多酚诱导卵巢癌COC1细胞凋亡的研究[J];西华师范大学学报(自然科学版);2011年02期

2 付春红;张秦;刘锦霞;李云莉;吴元赭;;茶多酚诱导卵巢癌SKOV3细胞凋亡及其机制的研究[J];医学研究生学报;2012年11期

3 罗伟仁;姚开泰;;间质标志物巢蛋白在鼻咽癌中的表达及其临床意义[J];临床与实验病理学杂志;2013年04期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 江泽;宋振川;李胜水;许华;;人结直肠癌组织中S100P蛋白的表达及临床意义[J];临床误诊误治;2012年11期

2 李红艳;黄健;梁斌;陈志婷;黄一淳;;不同剂量柚皮素介导的促氧化作用及其对CNE2细胞生长的调控[J];医学研究生学报;2014年04期

3 刘yN;陈先国;梁朝朝;;前列腺癌肿瘤组织中E-cadherin和N-cadherin的表达及意义[J];中华男科学杂志;2014年09期

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前8条

1 姚开泰;从死因回顾调查资料看湖南省鼻咽癌流行病学的一些特点并探索其发病机理[J];湖南医学院学报;1982年01期

2 刘洋;翁姗姗;赵玲辉;周显礼;肖建兵;李晓冬;叶桐;徐晓红;;E-cadherin/β-catenin和LYVE-1在人肺癌细胞、血管及淋巴管的表达[J];哈尔滨医科大学学报;2007年03期

3 刘冲;石群立;;卵巢癌免疫标记物研究进展[J];医学研究生学报;2010年09期

4 刘琦;;卵巢癌治疗的决策[J];医学研究生学报;2010年11期

5 苏云涛;许妍洁;仇金荣;周越;殷咏梅;;上皮间质转化分子标记物在乳腺浸润性导管癌组织中的表达及临床意义[J];临床肿瘤学杂志;2012年06期

6 张众;李连宏;王丽辉;谢丰培;;癌的上皮和间叶状态转变[J];临床与实验病理学杂志;2010年03期

7 黎思怡;李丽霞;邹振宁;唐加步;罗伟仁;;鼻咽癌组织中S100A4蛋白的表达及其临床意义[J];临床与实验病理学杂志;2011年12期

8 王翠翠;张巍;刘春霞;齐妍;李洪安;蒋金芳;李锋;;滑膜肉瘤中E-、N-cadherin和β-catenin的表达及意义[J];临床与实验病理学杂志;2012年08期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 ;Analysis of metastasis suppressing function of E-cadherin in gastric cancer cells by RNAi[J];World Journal of Gastroenterology;2005年13期

2 ;Relationship between Expression of CEA,E-cadherin and Liver Metastasis in Colorectal Cancer[J];Chinese Journal of Clinical Oncology;2008年06期

3 张志发;黄志勇;陈孝平;严群;肖振宇;吴在德;;T-cadherin启动子甲基化与人肝癌T-cadherin表达的关系[J];世界华人消化杂志;2008年11期

4 任剑珍;霍继荣;;5-杂氮-2’-脱氧胞苷对人结肠癌细胞E-cadherin基因表达及甲基化的影响[J];癌症;2010年01期

5 伍洲颂;张树友;;E-cadherin的表达与癌症发生、发展及预后关系的探讨[J];临床合理用药杂志;2011年18期

6 曹莉;熊正文;黄勇;苏红;李伟;;乳腺浸润性导管癌中N-cadherin mRNA及蛋白的表达与预后分析[J];临床与实验病理学杂志;2013年05期

7 张自森;张艳艳;韩仙芝;李灿宇;梁欣凤;薛长年;夏兴洲;吴敏;;胃癌组织中E-cadherin和血清中可溶性E-cadherin的表达[J];肿瘤基础与临床;2013年04期

8 吴艳;林云;刘厚君;李家文;;Inhibition of Invasion and Up-regulation of E-cadherin Expression in Human Malignant Melanoma Cell Line A375 by(-)-Epigallocatechin-3-gallate[J];Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences);2008年03期

9 张瑞;徐江;;β-catenin和E-cadherin在肿瘤发展中的研究[J];现代生物医学进展;2009年13期

10 徐胜美;马红梅;郭东;;E-cadherin在结直肠癌中的表达及其与侵袭转移的关系[J];国际病理科学与临床杂志;2009年04期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 ;Epigenetic regulation of E-cadherin in HBV associate human Hepatocellular carcinoma[A];江苏省遗传学会第八届会员代表大会暨学术研讨会论文集[C];2010年

2 王冰晶;张志谦;;癌细胞cadherin亚型转变及其分子机制[A];中国细胞生物学学会2005年学术大会、青年学术研讨会论文摘要集[C];2005年

3 ;Core Fucosylation Regulates E-cadherin Binding Affinity in Human Lung Cancer Cells[A];2008年全国生物化学与分子生物学学术大会论文摘要[C];2008年

4 ;Suppressed survival and proliferation of ovarian cancer cells by repressed MEK-ERK activation via knocking-down of E-cadherin[A];中华医学会肿瘤学分会第七届全国中青年肿瘤学术会议——中华医学会肿瘤学分会“中华肿瘤 明日之星”大型评选活动暨中青年委员全国遴选论文汇编[C];2011年

5 ;N-cadherin:a potential receptor of GDNF[A];Proceedings of the 8th Biennial Conference of the Chinese Society for Neuroscience[C];2009年

6 Zhiyang Xu;Dechang Li;Baohua Ji;;Quantification of the stiffness and strength of cadherin ectodomain binding with different ions[A];北京力学会第20届学术年会论文集[C];2014年

7 贾文亮;张庆瑜;;关于E-cadherin在胃癌和肺癌中表达情况的研究[A];天津市生物医学工程学会第三十三届学术年会论文集[C];2013年

8 乌新春;倪志超;段昕所;宋有鑫;;绿色荧光蛋白标记的T-cadherin基因稳定转染黑素瘤细胞株的建立[A];第五届全国中医药免疫学术研讨会——暨环境·免疫与肿瘤防治综合交叉会议论文汇编[C];2009年

9 ;Manipulation of N-cadherin level and function through different methods results in distinct functional changes in hippocampal neurons[A];Proceedings of the 7th Biennial Meeting and the 5th Congress of the Chinese Society for Neuroscience[C];2007年

10 张宪真;陈随芹;耿秀东;;N-Cadherin与E-Cadherin在非小细胞肺癌中的表达及相关性研究[A];中国肿瘤内科进展 中国肿瘤医师教育（2014）[C];2014年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 黎景佳;E-cadherin在喉鳞状细胞癌中的表达及其与肿瘤侵袭转移的关系[D];中南大学;2010年

2 吴扬;VE-cadherin重组腺病毒偶联氧化型甘露聚糖抗肿瘤实验研究[D];四川大学;2005年

3 胡军;E-cadherin与卵巢癌转移的相关性及机制研究[D];大连医科大学;2007年

4 来明名;肌球蛋白X与N-cadherin相互作用调节皮层神经元辐射迁移[D];东北师范大学;2013年

5 任剑珍;结肠癌T-cadherin基因的表达及甲基化影响的探讨[D];中南大学;2011年

6 张自森;E-cadherin在胃癌中的表达与化疗疗效的关系及对胃癌细胞化疗敏感性的影响[D];郑州大学;2013年

7 张莹莹;乙肝病毒HBx蛋白诱导E-cadherin表观遗传沉默促进细胞迁移的机制研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2011年

8 唐亚萍;T-cadherin在胃癌中的表达以及对人胃癌细胞株HGC-27生物学性状的影响[D];中南大学;2012年

9 余琼芳;Li-cadherin与结肠癌LoVo细胞侵袭转移相关性实验研究[D];武汉大学;2009年

10 王博;E-cadherin在急性噪声损伤中的分子机制研究[D];中国人民解放军医学院;2014年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 马修平;E-cadherin表达下调致GSK-3β磷酸化失活的分子机制研究[D];南京医科大学;2012年

2 韩晓青;E-cadherin在胃癌发病机制中的作用及去甲基化药物对其表达的调控[D];安徽医科大学;2014年

3 钟锦宜;E-cadherin和KAI1蛋白在人乳腺癌中的表达及其相关性研究[D];中南大学;2009年

4 郑丽娟;Ets-1和E-cadherin在食管鳞状细胞癌中的表达及临床意义[D];兰州大学;2010年

5 付伟伟;E-cadherin和β-catenin在胃癌演进过程中的改变及意义[D];青岛大学;2005年

6 韩秀晶;N-cadherin、E-cadherin对不同转移方式的肿瘤细胞行为的影响[D];大连医科大学;2007年

7 王林华;全反式维甲酸对糖尿病肾病肾小球p-cadherin表达的影响[D];吉林大学;2008年

8 龚宗敏;Twist和E-cadherin在舌鳞状细胞癌中的表达及临床意义[D];安徽医科大学;2012年

9 张茜;SPA-1调控乳腺癌细胞E-cadherin表达的初步研究[D];华中科技大学;2013年

10 张正平;E-cadherin在Saos-2细胞亚群中的表达和转移抑制作用及兔胸部微波照射中的温度监测与照射方式优化[D];第四军医大学;2008年

，

本文编号：2314496