14-3-3ζ、ER-β与SF-1基因启动子区甲基化水平在子宫腺肌病中的作用及意义

发布时间：2019-06-15 16:46

【摘要】：目的： 通过对子宫腺肌病异位子宫内膜间质细胞中14-3-3ζ、雌激素β受体（estrogenreceptor beta, ER-β)与孤儿核受体类固醇生成因子1（steroidogenic factor-1, SF-1）基因启动子区去甲基化状况及细胞生物学功能改变的研究，为进一步探讨相关基因启动子区去甲基化在子宫腺肌病发生、发展过程中的关系奠定基础。 方法： 选择因子宫腺肌病行子宫次/全切除术的患者，取其异位内膜组织标本为实验组（术后病理组织学证实为子宫腺肌病），因输卵管阻塞导致不孕症行宫腹腔镜检查的患者，取其子宫内膜组织标本为对照组，经消化、滤网、差速贴壁等分离、纯化培养间质细胞；RT-PCR及Western blot（WB）法检测14-3-3ζ、ER-β与SF-1mRNA和蛋白表达情况；甲基化特异性PCR（methylation specific PCR,MSP）法检测14-3-3ζ、ER-β与SF-1基因启动子区的甲基化状态；CCK-8法检测细胞增殖情况，Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力，，流式细胞法检测细胞周期与凋亡情况。 结果： （1）分离、纯化培养的细胞经免疫细胞化学鉴定vimentin呈阳性，cytokeratin呈阴性；（2）RT-PCR及WB检测结果显示：14-3-3ζ、ER-β与SF-1mRNA和蛋白在实验组间质细胞中的表达水平均显著高于对照组间质细胞；（3）MSP法检测结果显示：与对照组间质细胞相比，在实验组间质细胞中14-3-3ζ、ER-β与SF-1基因启动子区CpG岛均存在去甲基化状况；（4）与对照组间质细胞相比，实验组间质细胞的增殖、迁移能力均显著增强，细胞凋亡减少。 结论： 子宫腺肌病子宫内膜间质细胞中14-3-3ζ、ER-β与SF-1mRNA及蛋白表达水平均显著上调，且基因启动子区CpG岛均存在去甲基化状况，参与了子宫腺肌病病因分子生物学过程，其相关机制还有待进一步研究。
[Abstract]:Objective: to study the demethylation status and cellular biological function of the promoter region of 14 鈮

本文编号：2500366