BNIP3介导的线粒体自噬异常在子痫前期发病中的作用

发布时间：2019-07-13 18:45

【摘要】：目的:探讨胎盘组织中Bcl-2家族的前凋亡因子BCL2腺病毒E1B19 k Da相互作用蛋白3(BCL2/adenovirus E1B 19 k Da protein-interacting protein 3,BNIP3)的表达及其介导的线粒体自噬在子痫前期(Preeclampsia,PE)胎盘滋养细胞功能异常中的作用。方法:收集2015年1月至2015年8月重庆医科大学附属第一医院产科分娩的11例PE和12例正常剖宫产的胎盘组织。应用Western blot(WB)方法检测BNIP3和Cleaved-caspase3在对照和PE胎盘中的表达差异;通过气相色谱质谱联用仪(Gas chromatograph-mass spectrometer,GC-MS)检测胎盘线粒体的代谢活动情况;荧光素酶报告基因系统检测胎盘总的ATP含量;以早孕人绒毛外滋养细胞株(Human transformed primary extravillous trophoblast cell line,HTR8/SVneo)通过缺氧/复氧(Hypoxia/reoxygenation,H/R)构建PE细胞模型;构建BNIP3小干扰RNA。Transwellassay检测敲低BNIP3对HTR8/SVneo细胞的侵袭力的影响;H/R处理两组细胞,通过DCFH-DA检测细胞ROS(Reactive oxygen species)生成,流式细胞仪检测细胞的凋亡。结果:与正常胎盘相比,在PE胎盘组织中BNIP3表达显著降低(P0.05),而凋亡蛋白cleaved-caspase3显著增加(P0.05);GC-MS结果显示PE组胎盘处线粒体的代谢活动较正常组显著被抑制(P0.05);荧光素酶报告基因显示子痫前期胎盘总ATP含量著下降(P0.01);敲低BNIP3显著抑制滋养细胞的侵袭能力(P0.01);在PE细胞模型中,BNIP3敲低组较对照组的ROS产量显著增加,且细胞的凋亡增加(P0.05)。结论:BNIP3介导的线粒体自噬不足引起受损线粒体堆积导致代谢异常和ROS清除障碍,引起滋养细胞的功能异常,参与PE的发病。
文内图片：
图片说明： 图 1 Western blot 检测 BNIP3 和 Cleaved-caspase3 在晚孕期正常胎盘和 PE 胎盘中的表达Fig.1 The expression of BNIP3 and cleaved-caspase3 in placentas from normal and PEpatients.
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图片说明：胎盘ATP含量检测和偏最小二乘法判别分析
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R714.244

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本文编号：2514202