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Tie2-siRNA表达载体对子宫内膜癌Ishikawa细胞株化疗敏感性的研究

发布时间:2019-07-17 16:07
【摘要】:目的:研究Tie2表达对子宫内膜癌细胞株化疗敏感性的影响,探索子宫内膜癌辅助治疗新方法。方法:将表达Tie2-siRNA的碱基片段插入含有CMV启动子、新霉素抗性基因及绿色荧光蛋白报告基因的质粒中,应用脂质体包涵体技术将质粒转染入子宫内膜癌Ishikawa细胞株,以减少Tie2基因表达,采用逆转录PCR及蛋白印迹方法鉴定。DAPI染色检测各组细胞凋亡。不同浓度卡铂处理细胞,检测各组细胞的化疗敏感性。结果:成功转染后,Ishikawa细胞中Tie2 mRNA及蛋白表达水平的抑制率分别为75.5%及56.4%,Tie2-siRNA组细胞凋亡增加,化疗敏感性增加。Tie2-siRNA组的卡铂IC50为(29.95±0.68)μg/ml,低于空白对照组(80.55±1.05)μg/ml。结论:降调Tie2基因的转录及表达可促进子宫内膜癌细胞凋亡,增加子宫内膜癌细胞对化疗药物的敏感性。
文内图片:荧光显微镜下观测各组绿色荧光蛋白的表达A:Ishikawa细胞组;B:N-siRNA组;C:Tie2-siRNA组
图片说明: OD550nm处测量各孔的吸光值。计算细胞生长抑制率及细胞半数抑制率(IC50),实验重复3次。统计分析结果。1.8统计学处理采用SPSS17.0统计软件分析,,数据用xs

本文编号:2515526

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