PKCε-siRNA对人宫颈癌ME180细胞增殖与侵袭能力影响的实验研究

发布时间：2019-11-08 05:25

【摘要】：目的:探讨PKCε-siRNA对人宫颈癌ME180细胞蛋白激酶Cε(PKCε)mRNA、蛋白表达及ME180细胞增殖与侵袭能力影响。方法:建立PKCε-siRNA转染组(实验组)、NC-siRNA转染组(阴性对照组)、未行处理组(对照组)。Real-time PCR法检测各组细胞PKCεmRNA表达。Western-blot法检测各组PKCε、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)蛋白表达。采用MTT比色法观察各组细胞增殖能力,采用划痕实验观察各组细胞迁移能力,采用Transwell法观察各组细胞侵袭能力,荧光素酶报告基因检测丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的活性。结果:与对照组相比,实验组PKCεmRNA明显降低,表达量为对照组的18.3%,两组差异有统计学意义(P0.05)。PKCε、Cyclin D1、MMP-2蛋白表达水平明显降低。在MTT实验中,实验组细胞72小时的A值为0.517±0.031,与对照组(0.925±0.063)相比增殖能力明显降低,两组差异有统计学意义(P0.05)。实验组迁移和侵袭能力明显低于对照组。实验组MAPK转录活性(4.5±0.2)低于对照组(16.3±0.9),差异有统计学意义(P0.05)。结论:通过siRNA技术降低PKCε表达,可有效干扰MAPK通路,明显抑制宫颈癌ME180细胞增殖及迁移侵袭能力。

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