超声激发携氧载紫杉醇脂质微泡抑制裸鼠卵巢癌皮下移植瘤的实验研究

发布时间：2019-12-03 08:33

【摘要】：第一部分携氧载紫杉醇脂质微泡对裸鼠移植瘤的靶向显影及药物控释能力研究第一节携氧载紫杉醇脂质微泡对裸鼠皮下移植瘤的靶向显影能力观察目的：探讨携氧载紫杉醇微泡对裸鼠卵巢癌SKOV3皮下移植瘤的靶向显影能力。方法：采用机械震荡法分别制备普通紫杉醇脂质微泡及携氧载紫杉醇脂质微泡，取建模成功的荷瘤裸鼠6只，随机分为三组：(a)：PBS组、(b)：普通紫杉醇脂质微泡（PLMBs）、(c)：携氧载紫杉醇脂质微泡（OPLMBs），尾静脉分别注入生理盐水及相应脂质微泡0.2ml（浓度2×107/ml)，彩色多普勒诊断超声连续观察注射前及注射后20min内肿瘤的超声图像. 结果：b、c组于微泡注入小鼠体内约3s肿瘤区域显影开始增强，于5s强度达到最大，持续10min左右逐渐消失，二者声像图改变无明显差异，a组注射前后肿瘤局域回声无明显变化。结论：普通紫杉醇脂质微泡(PLMBs)及携氧载紫杉醇脂质微泡(OPLMBs)均可对人卵巢癌SKOV3裸鼠皮下移植瘤进行靶向显影。第二节超声介导携氧载紫杉醇脂质微泡对药物及氧气的定向控释能力研究目的：探讨超声定向控释携氧载紫杉醇脂质微泡提高肿瘤组织药物靶向沉积的可行性及对HIF-1α和P糖蛋白表达的影响。方法：建模成功14d后将35只模型鼠随机分为7组：a组紫杉醇组(PTX)，b组普通载紫杉醇微泡组(PLMBs)，c组携氧载紫杉醇微泡组（OPLMBs），d组紫杉醇+超声组(PTX+US)，e组普通载紫杉醇微泡+超声组（PLMBs+US），f组携氧载紫杉醇微泡+超声组（OPLMBs+US)，g组生理盐水组，每组5只。按紫杉醇20mg/Kg的药量，分别尾静脉注入紫杉醇溶液或载紫杉醇脂质微泡悬液，超声组在微泡注射完毕立即给予肿瘤部位超声辐照。每天一次，连续7d，末次治疗结束后4h后处死小鼠，迅速取出心、肝、脾、肺、肿瘤组织，高效液相色谱法检测各组织中的药物浓度（g组除外），Western Blot法检测肿瘤组织中HIF-1α及P糖蛋白的表达。结果：PLMBs+US组及OPLMBs+US组肿瘤组织内药物浓度分别为279±77.89μg/g、300.60±93.18μg/g，明显高于其他组（p0.05）,但这两组肿瘤组织内药物浓度无统计学差异（p0.05）； PTX+US组肿瘤组织内药物浓度较紫杉醇组稍高,但二者无统计学差异（p0.05）；PLMBs组及OPLMBs组肿瘤组织内药物浓度较紫杉醇组稍高,但无统计学差异（p0.05）。与PTX组比较，，PLMBs组及OPLMBs组荷瘤鼠肝脏及脾脏组织内紫杉醇浓度升高（p0.05），但联合超声对肝、脾组织内的药物浓度没有明显影响（p0.05）。Western blot检测结果显示，携氧载紫杉醇微泡+超声组HIF-1α及P糖蛋白表达明显下降，与其他各组相比，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：超声可对载紫杉醇脂质微泡进行定向控释，提高紫杉醇在肿瘤组织内的沉积；超声联合携氧载紫杉醇微泡能有效降低HIF-1α、P糖蛋白的表达。第二部分超声激发携氧载紫杉醇脂质微泡对裸鼠卵巢癌皮下移植瘤的抑制作用及机制研究目的：探讨超声激发辐照携氧载紫杉醇脂质微泡对裸鼠卵巢癌皮下移植瘤的生长抑制效应及其机制。方法：将35只模型鼠随机分为7组:(a)对照组(Saline)，(b)紫杉醇组(PTX)，(c)非载药微泡联合超声组(MBs+US，(d)普通载紫杉醇微泡组(PLMBs)，(e)携氧载紫杉醇微泡组（OPLMBs），(f)普通载紫杉醇微泡联合超声组（PLMBs+US），(g)携氧载紫杉醇微泡联合超声组（OPLMBs+US)，每组5只。给予相应处理，每日一次，连续7d，每日观察动物一般情况并测量肿瘤体积。末次治疗结束后24h（第8d）处死小鼠，测定肿瘤组织的质量，计算抑瘤率。TUNEL检测肿瘤细胞的凋亡情况、免疫组化法测定肿瘤组织内VEGF表达。结果：与对照组（生理盐水组）相比，各处理组肿瘤生长明显减缓，肿瘤质量下降，其中以携氧载紫杉醇脂质微泡联合超声组下降最为明显,肿瘤质量明显低于其他处理组（P＜0.05），其肿瘤生长抑制率为94.49%。TUNEL检测肿瘤细胞的凋亡显示携氧载紫杉醇微泡+超声组凋亡程度明显高于其它处理组（p0.05），而VEGF表达明显低于其它处理组（p0.05）。结论：超声定向控释携氧载紫杉醇微泡可明显抑制人卵巢癌细胞SKOV3裸鼠皮下移植瘤生长，并可降低肿瘤组织VEGF表达、促进肿瘤细胞凋亡。
【图文】：

移植瘤,微泡,紫杉醇,光镜

图 1 SKOV3 移植瘤组织学特征（HE×400）gy feature of xenografted human ovarian cancer SKOV3(图 2 携氧载紫杉醇微泡光镜图(×200)Fig.2 Light microscope of OPLMBs(×200)

微泡,紫杉醇,光镜,学位论文

重庆医科大学硕士研究生学位论文附图图 1 SKOV3 移植瘤组织学特征（HE×400）gy feature of xenografted human ovarian cancer SKOV
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R737.31

【参考文献】