IL-17AsiRNA对子宫内膜异位症大鼠的治疗作用

发布时间：2020-01-24 00:37

【摘要】：目的观察IL-17Asi RNA对子宫内膜异位症(Endometriosis,EMs)大鼠在位内膜及异位内膜的影响,通过检测IL-17A及其下游基因的表达,探讨IL-17Asi RNA在子宫内膜异位症大鼠中的作用机制及治疗效果。方法1随机将30只健康雌性、未交配的8周龄SD大鼠分为假手术组(开腹后不做任何处理)、子宫内膜异位症模型组(模型组)、si RNA干扰组(治疗组),其中,模型组和治疗组各又分为在位内膜组和异位内膜组。2本实验大鼠模型建立是按照Vernon等方法进行自体子宫内膜移植。模型制备成功后于第8周末将IL-17Asi RNA与体内转染试剂按比例混合后,采用局部多点注射方法将混合物导入模型大鼠体内,72h后取材。3计算各组中异位病灶体积;用免疫组织化学法检测CD34在各组内膜中表达情况,并计算微血管密度;用Western blotting法检测各组内膜组织中IL-17A、p-ERK、MMP-7、VEGF蛋白表达水平。4采用SPSS17.0统计软件分析数据,用均数±标准差(x±s)表示计量资料,组间比较采用单因素方差分析,P0.05表示差异有统计学意义。结果1与假手术组相比,内异症模型组中IL-17A、VEGF蛋白表达增加,使血管生成增加,以异位组增高最明显(P0.01),差异有统计学意义;与内异症模型组相比,si RNA干扰组的在位内膜及异位内膜中IL-17A、VEGF蛋白表达显著减少(P0.01);si RNA干扰组中异位内膜VEGF蛋白降低更明显,差异有统计学意义,IL-17A蛋白水平在si RNA干扰组在位内膜、异位内膜之间差异无统计学意义。2 IL-17A通过激活ERK信号通路,在模型组中,p-ERK蛋白表达水平异位组最高、在位组次之;在si RNA干扰组中,异位组、在位组p-ERK蛋白表达量均显著下降。除si RNA干扰组在位内膜与异位内膜间无显著差异外,其余各组组间比较差异均有统计学意义。3 IL-17A下游基因表达情况:模型组异位内膜MMP-7蛋白表达增加,干扰组异位内膜MMP-7表达明显下降,均高于假手术组,差异均有统计学意义。4假手术组大鼠内膜组织可见散在阳性细胞表达,模型组和干扰组阳性细胞数均增多,CD34标记的微血管密度(MVD)增加(P0.05);与模型组相比,si RNA干扰组MVD显著下降(P0.01),差异有统计学意义。5计算异位病灶的体积:模型组治疗前比治疗后子宫内膜异位病灶体积增大,差异无统计学意义(P0.05);si RNA干扰组治疗后比治疗前显著减小(P0.05),差异有统计学意义。结论IL-17A参与调控子宫内膜异位症的发生、发展,si RNA靶向沉默IL-17A基因,使IL-17A蛋白表达显著降低,减弱异位内膜与盆腔组织之间的黏附作用,抑制局部免疫应答及炎症反应。IL-17Asi RNA使p-ERK、MMPs、VEGF基因表达,明显抑制异位子宫内膜黏附、侵袭和血管生成,从而达到治疗的目的。
【图文】：

第 1 章 实验研究20 只模型大鼠中，1 只因感染及手术操作不当死亡，1 只建模失败，1 只出现严重的肠梗阻，其余各只均有不同程度的肠管、大网膜粘连。建模成功率达85%。存活大鼠于建模第 4 周末，，开腹肉眼观察，可见子宫内膜异位病灶成活，体积增大，呈椭球形、透明囊性，淡黄色液体，外覆结缔组织及血管，质软。取材后镜下可见，异位内膜组织含有在位内膜样腺体、血管、泡沫样细胞，组织中有大量中性粒细胞浸润，内皮细胞可见少许含铁血黄素颗粒沉积。（图 1）

将两组大鼠模型的异位病灶体积进行比较发现，与治疗前相比，siRNA干扰组治疗后异位病灶体积显著降低（P＜0.05），差异有统计学意义；内异症模型组治疗后异位病灶体积增大（P＞0.05），差异无统计学意义。结果如表1，图2，图3。
【学位授予单位】：华北理工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R711.71

【参考文献】

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本文编号：2572465