【摘要】：目的:稽留流产(Missed abortion,MA)是流产中的一种特殊类型,随着二胎政策的放开,发病率逐渐升高,目前稽留流产的发病机制尚不十分明确,且缺乏早期预测靶标。有研究认为氧化应激及凋亡可能参与了稽留流产的发生,本研究筛选参与氧化应激,凋亡等多种代谢途径的临床常用血液指标:γ-谷氨酰转移酶(gamma glutamyltransferase,GGT),乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH),腺苷脱氨酶(adenosine deaminase,ADA)和纤维蛋白原(Fibrinogen,FIB),分析其在稽留流产患者及正常妊娠(Normal pregnancy,NP)孕妇外周血中的表达情况,并分析各项指标的诊断价值。同时,检测自噬关键因子Beclin-1及LC3在正常妊娠和稽留流产患者的妊娠组织(绒毛及蜕膜)中的表达情况,探究自噬与稽留流产发病机制之间的关系,为稽留流产筛选预测靶标。通过Beclin-1相关的生物信息学分析,探索其可能涉及的致病机制。方法:1.回顾性分析2014年3月-2017年3月收治的795例稽留流产患者及694例正常妊娠患者其GGT,LDH,ADA和FIB的表达情况,并根据年龄平均分为年龄组1(17-27岁),年龄组2(28-38岁)和年龄组3(39-49岁)。分别统计每一年龄组的表达差异,以了解年龄因素与各指标表达差异之间的关系。应用ROC曲线对各项血液学指标进行分析。2.选取2017年1月-2017年3月收治的36例稽留流产患者作为稽留流产组,同期收治的36例自愿终止妊娠的正常妊娠孕妇作为正常妊娠组。利用HE染色观察两组绒毛及蜕膜组织的特点,利用免疫组化观察Beclin-1在两组绒毛及蜕膜组织中的定位情况,利用RT-PCR检测两组绒毛及蜕膜组织中Beclin-1mRNA的表达水平,利用Western Blot检测两组绒毛及蜕膜组织中Beclin-1蛋白、LC3II/LC3I比值的表达水平。3.应用STRING在线软件绘制Beclin-1蛋白互作网络图,进而应用DAVID在线分析软件对筛选到的相互作用蛋白进行信号通路富集分析,以预测Beclin-1参与的作用机制及可能调控的下游蛋白。结果:1.与正常妊娠患者相比,血清GGT和ADA水平在稽留流产患者中明显增加(GGT:MA:17.68±9.85IU/L;NP:14.57±7.93 IU/L,P0.0001;ADA:MA:6.05±3.94 IU/L;NP:5.67±3.36 IU/L,P0.05),血浆FIB水平在稽留流产患者中呈下降趋势(MA:4.31±0.91g/L;NP:4.44±0.96g/L,P0.01)。血清LDH水平在两组之间没有明显差异(MA:148.05±30.46 IU/L;NP:149.34±27.88 IU/L,P0.05)。进一步年龄分组发现:ADA与FIB的表达仅在17-27岁年龄组有统计学差异,GGT在各年龄组中均有明显的统计学差异。2.GGT、ADA、FIB、LDH的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.643、0.548、0.539、0.527。3.HE染色显示:与正常妊娠患者的绒毛及蜕膜组织相比,稽留流产绒毛组织的合体滋养层及细胞滋养层明显萎缩变薄,滋养细胞中出现核固缩,绒毛组织出现不同程度的退行性改变,绒毛间质出现纤维样变性。稽留流产患者蜕膜组织的血管数目相对减少,血管腔不规则,表现为组织结构疏松,腺上皮细胞肿胀,腺腔显示不清,蜕膜细胞体积增大,染色较浅,表现出明显的水肿。4.免疫组化显示Beclin-1蛋白在稽留流产绒毛及蜕膜组织中的表达模式呈上调趋势。5.与正常妊娠组相比,Beclin-1 mRNA在稽留流产绒毛(NP:1.00±0.17;MA:1.48±0.24,P0.001)及蜕膜组织(NP:1.00±0.37;MA:2.30±0.37,P0.001)中均呈上调趋势,差异有统计学意义。Beclin-1蛋白在稽留流产绒毛(NP:1.00±0.34;MA:2.90±0.60,P0.001)及蜕膜组织(NP:1.00±0.29;MA:3.00±0.73,P0.001)中均呈上调趋势,差异有统计学意义。LC3II/LC3I在稽留流产绒毛(NP:1.00±0.27;MA:2.34±0.46,P0.001)及蜕膜组织(NP:1.00±0.02;MA:1.89±0.33,P0.001)中均呈上调趋势,差异有统计学意义。6.通过STRING筛选到30个与Beclin-1相互作用的蛋白质,其中下游蛋白ATG14和PIK3C3有至关重要的作用。信号通路富集分析显示,Beclin-1及其相互作用蛋白显著富集在自噬、凋亡、癌症、炎症等途径中。结论:1.与正常妊娠孕妇相比,稽留流产患者外周血中GGT及ADA水平均呈上调趋势,FIB水平呈下调趋势,且均有统计学差异,进一步年龄分组后发现血清ADA与FIB的表达仅在17-27岁年龄组有统计学差异,GGT在各年龄组中均有明显的统计学差异。同时,GGT的ROC曲线下面积最大,诊断价值相对较高,因此GGT有望成为稽留流产可靠的预测靶标。2.Beclin-1 mRNA及蛋白的表达、LC3II/LC3I的比值在稽留流产患者的绒毛及蜕膜组织中均表现为上调趋势,提示细胞自噬参与了稽留流产的发生。3.ATG14和PIK3C3可能是与Beclin-1密切相关的下游蛋白,同其他相关蛋白相互作用构成的网络系统可能作用于细胞自噬、凋亡、肿瘤、炎症等通路,为今后进一步研究Beclin-1在稽留流产中的作用机制提供了方向。
【图文】：
pregnancy例数 年龄（岁） 流产患者 36 27.6±5.1 妊娠患者 36 28.3±4.4 >0.05 常妊娠患者及稽留流产患者绒毛及蜕膜组织组绒毛组织光镜下的区别妊娠患者的绒毛组织大小均匀一致，光镜下可见 层，绒毛间质及血管。绒毛表面有 2 层滋养层质呈空泡状或细颗粒状，为合体滋养层；内层滋多角形，边界清楚，细胞质透明，为细胞滋养层
图 3.3 稽留流产患者绒毛组织 HE 染色图片（200X）.3 HE staining picture of villus tissue in patients with missed ab蜕膜组织光镜下的区别妊娠患者的蜕膜组织结构比较致密，可见到比较多的方状或扁平状，排列整齐，腺腔形态规则，腺体分泌正常，胞质丰富，细胞核结构清晰，，未见明显炎性细.4）
【学位授予单位】：江苏大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R714.21
【相似文献】
相关期刊论文 前10条
1 杨芳;朱学东;;稽留流产的病因分析[J];中国当代医药;2018年35期
2 赵方;胡昌华;张远远;;甲状腺功能异常孕产妇发生稽留流产的临床分析[J];中国妇幼保健;2019年03期
3 高丽;;稽留流产患者实施整体护理的效果分析[J];首都食品与医药;2019年07期
4 陆妍;;米非司酮配伍米索前列醇治疗稽留流产的临床效果[J];大医生;2019年02期
5 张羽;张钗红;唐丹;林换弟;曹丽;李红梅;;稽留流产高危因素的相关研究进展[J];临床误诊误治;2017年12期
6 张艺玮;郝亚楠;潘晓伟;;稽留流产发病因素临床分析[J];河北医药;2018年03期
7 李辞妹;;米非司酮配伍米索前列醇治疗稽留流产和终止10～16周妊娠的效果[J];北方药学;2018年08期
8 杨家春;;雌、孕激素水平与稽留流产的关系研究[J];实用妇科内分泌杂志(电子版);2018年20期
9 吴春春;李爱禄;李丽春;;胎盘生长因子及可溶性血管内皮生长因子受体的表达与稽留流产的关系研究[J];中外医学研究;2018年27期
10 曹小红;杨玲;;彩超监护、引导下稽留流产的操作配合体会[J];中国卫生产业;2017年05期
相关会议论文 前10条
1 陈勤芳;郑薇;李玉宏;陈瑞玉;;药物和手术方法治疗妊娠12周内稽留流产临床研究[A];第四届长三角妇产科学术论坛暨浙江省2009年妇产科学术年会论文汇编[C];2009年
2 于桂敏;;稽留流产原因分析及健康教育[A];全国妇产科新技术、新理论进展研讨会、全国助产专业护士培训班论文汇编[C];2011年
3 接雪梅;;米非司酮配伍米索前列醇治疗稽留流产的研究摘要[A];第八次全国妇产科学学术会议论文汇编[C];2004年
4 齐进;张恩娣;;宫腔镜在探寻稽留流产病因中的应用价值[A];中华医学会第八次全国计划生育学术会议论文汇编[C];2012年
5 侯冠英;王吉云;戴慧雅;庞淑琴;刘明霞;张秀芬;;芬吗通用于稽留流产刮宫术后对患者子宫内膜修复的效果观察[A];中国医药教育协会神经外科专业委员会第二届学术年会论文集[C];2018年
6 朱韫春;杨吟秋;;血清孕酮诊断稽留流产的临床价值[A];第三届长三角围产医学学术论坛暨2006年浙江省围产医学学术年会论文汇编[C];2006年
7 袁银娣;董其兵;韩贤斌;;稽留流产法医学分析1例[A];法医临床学专业理论与实践——中国法医学会·全国第二十届法医临床学学术研讨会论文集[C];2017年
8 张长英;王秋红;;腹腔妊娠误诊稽留流产1例[A];2005年浙江省妇产科学暨计划生育学术会议论文汇编[C];2005年
9 于冰;杨
本文编号：2615856
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/fuchankeerkelunwen/2615856.html
