中枢氧化应激参与卵巢切除大鼠交感神经活动亢进的作用机制研究

发布时间：2017-03-23 06:12

  本文关键词：中枢氧化应激参与卵巢切除大鼠交感神经活动亢进的作用机制研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：[研究目的]绝经主要是由于卵巢功能衰退和雌激素水平降低所致。雌激素作为内环境的一个因素,影响全身各系统的生理功能,是女性保持健康必不可少的内分泌激素。研究发现,女性绝经前,心血管疾病的发生率低于男性；而绝经后,心血管疾病如动脉粥样硬化,冠心病发病率迅速增加,并随年龄的增长呈指数上升,故绝经前体内的雌激素可能是保护妇女免于心血管疾病的重要原因。但绝经后心血管功能异常的机制并不十分明确,替代治疗效果也不是十分满意。研究证实,慢性心衰、高血压等心血管疾病的发生与交感神经兴奋性增强有关。血压升高与交感兴奋性增强是心血管疾病的主要病理改变。而调节交感神经活动与血压变化的关键中枢位于脑干的头端延髓腹外侧区(rostral ventrolateral medulla RVLM).已有文献报道,在心血管疾病状态中RVLM神经元功能异常是导致交感活动亢进的重要机制,抑制交感神经元活动能有效降低血压。氧化应激是指机体在遭受各种有害刺激时,体内超氧化物如活性氧族(ROS)、活性氮族(RNS)在体内产生和清除失衡,从而导致超氧化物聚集,引起机体损伤。无论外周还是中枢,氧化应激在调节心血管功能方面发挥了一定作用。在针对心血管功能外周调节方面的研究已经证实绝期后动物和人体其体内氧化应激水平增加,而且绝经后雌激素替代治疗能明显降低体内的氧化应激水平,并导致血压下降。另有研究表明：交感活动的激活、血压升高与RVLM内氧化应激后活性氧的增加密切相关。本研究的第一个目标是明确在OVX大鼠RVLM水平上,氧化应激是否参与绝经后心血管功能的异常调节及雌激素低下对RVLM氧化应激的作用。在交感输出亢进的高血压和心力衰竭等动物模型上发现RVLM内生成和降低氧化应激活性氧族主要成分超氧阴离子·O2-的NADPH氧化酶(NOX4)和过氧化物歧化酶SOD的活性和表达分别增强和降低。·02-通过影响细胞膜上的离子通道或通过细胞内信号转导通路增加神经元的兴奋性,进而导致血压升高和交感神经兴奋性增加等心血管功能异常表现。那么雌激素能否通过影响RVLM内NADPH氧化酶或SOD的活性通路介导的氧化应激的途径实现其中枢抗高血压和抑制交感神经活动的作用。因此本研究主要观察是雌激素减弱RVLM中氧化应激水平与抗高血压的机制,进而研究发挥该心血管调节效应的分子通路,为绝经后心血管功能异常的形成和发展机制研究提供重要的理论内容。[研究方法]实验动物采用Sprague-Dawley(SD)雌性大鼠,体重约190-230g。实验组行卵巢去势手术,对照组做假手术。所有实验动物分为四组：Sham+Veh组、sham+E2组、OVX+Veh组与OVX+E2组；OVX组大鼠术后正常饲养四周后,每天按照30μg/kg颈部皮下给予雌激素(溶于生理盐水,购自于Sigma公司),以生理盐水作为溶剂(Vehicle, Veh)对照,雌激素替代治疗4周后,整体动物水平监测大鼠血压、心率、24小时尿液去甲肾上腺素含量,DHE荧光探针染色及光泽精检测RVLM区超氧阴离子含量,western blot检测氧化应激有关的蛋白N0X4、SOD1的改变。[结果]一、动物模型评价OVX+Veh组大鼠与Sham+Veh组相比,子宫体重比明显下降(0.0004±0.0001 vs0.0018±0.0004mg/g)。OVX+Veh组大鼠血中雌激素含量明显降低(9.667±.374 pmol/L vs 5.358±.165 pmol/L),可认为模型建立成功。给予雌激素E2替代治疗(30μg/kg.d)一月后,可显著改善子宫萎缩情况,子宫体重比较OVX+Veh组明显增高。二、雌激素对OVX大鼠心血管活动的影响OVX术后的大鼠,血压、心率及肾交感放电活动明显增加,24小时尿中去甲肾上腺素(间接反映了肾交感活动性的变化)含量增高。给予激素替代治疗后,与OVX+Veh组相比,血压上升、心率增快,肾交感神经活动增强的效应均被逆转。三、雌激素可以减少RVLM区内超氧阴离子的含量染色探针DHE定性检测超氧化物的含量,而光泽精可以定量检测超氧阴离子的含量。在OVX手术后,DHE染色和光泽精检测结果显示,OVX+Veh组的RVLM内超氧阴离子的含量与对照Sham+Veh组RVLM内超氧阴离子的含量相比明显增多(P0.05)。给予激素替代治疗后,与OVX+Veh组相比,RVLM区内超氧阴离子的含量减少。四、雌激素可以下调NADPH氧化酶(Nox4)蛋白表达,上调SOD1蛋白达OVX+Veh组大鼠与Sham+Veh相比SOD1含量明显下降,Nox4表达含量明显升高,激素替代治疗后,SOD1表达含量升高,Nox4表达含量下降。而对于Sham组大鼠无论有无雌激素替代治疗,SOD1、NADPH氧化酶蛋白表达水平均无明显变化。[结论]雌激素可通过降低RVLM氧化应激抑制交感亢进从而改善大鼠绝经后心血管功能。
【关键词】：绝经 雌激素 延髓头端腹外侧区 氧化应激 交感亢进
【学位授予单位】：第二军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R711.75
【目录】：

• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 英文缩略词对照表10-11
• 前言11-13
• 材料与方法13-29
• 一、实验动物13
• 二、所用仪器和试剂13-19
• 三、实验方法19-29
• 实验结果29-36
• 一、OVX动物模型的建立及激素替代治疗效果29-30
• 二、OVX大鼠模型血压、心率升高,肾交感活动亢进30-32
• 三、建立动物模型后测定各组大鼠RVLM区超氧阴离子含量32-33
• 四、RVLM区NOX4表达增强,SOD1表达下降33-36
• 讨论36-38
• 小结38-39
• 参考文献39-43
• 综述43-50
• 参考文献46-50
• 在读期间科研收获50-51
• 致谢51-52

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前5条

1 郭雅琼;张笠;汪湄;刘媛;宁燕;;CBS mRNA在自发性高血压大鼠脑组织中的表达和分布[J];国际检验医学杂志;2014年10期

2 Hairuo Wen;Judith K Gwathmey;Lai-Hua Xie;;Oxidative stress-mediated effects of angiotensin Ⅱ in the cardiovascular system[J];World Journal of Hypertension;2012年04期

3 陈們螈;刘斌;;先天性心脏病诊断及治疗进展[J];西南军医;2012年03期

4 杨维维;许媛媛;荣超;权素玉;张源淑;;山羊血管紧张素转换酶2基因的克隆表达与生物信息学分析[J];南京农业大学学报;2015年01期

5 姚灿坤;刘学耀;唐新征;林华;蔡智刚;;不同病性证素对老年高血压病患者氧化应激的影响[J];黑龙江中医药;2015年01期

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1 郝新忠;辣椒素激活TRPV1预防高盐膳食小鼠高血压的机制研究[D];第三军医大学;2011年

2 黄晓;血管过氧化物酶1介导肺动脉高压血管重构及机制研究[D];中南大学;2013年

3 李晶晶;阿托伐他汀和过氧化氢抑制血管收缩的机理[D];南开大学;2012年

4 刘妍如;更年期综合征及贯叶连翘治疗机制的代谢组学研究[D];沈阳药科大学;2014年

5 乔国芬;主动脉压力感受器神经元与反射调节的性别差异及其机制[D];哈尔滨工业大学;2013年

6 李淑均;VPO1在ox-LDL诱导的内皮功能不全及炎症反应中的作用及机制研究[D];中南大学;2014年

7 杨静;高水平FSH促进肾上腺髓质儿茶酚胺合成增加引发绝经后妇女血管功能紊乱的机制研究[D];浙江大学;2015年

8 刘岗;茶多酚对脂代谢基因的调控作用及对人群血压影响的荟萃分析[D];北京协和医学院;2015年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 马瑞新;钙通道阻滞剂为基础的联合降压方案对高血压病患者降压质量和生活质量的影响[D];兰州大学;2011年

2 赵兵;氢盐水改善急性心肌梗死大鼠压力感受性反射功能及机制探讨[D];泰山医学院;2012年

3 王大海;MPO反应体系与高血压并不稳定型心绞痛患者血管病变的互联性研究[D];吉林大学;2013年

4 藏好晶;经下丘脑室旁核给予NF-κB抑制剂PDTC对高血压大鼠血压的影响及其机制的研究[D];山西医科大学;2013年

5 陈平岐;贝那普利抗氧化作用对血管损伤小鼠血管重构的影响[D];遵义医学院;2013年

6 韩东宁;β-酪啡肽-7对Ⅰ型糖尿病大鼠心肌损伤的干预作用及其机制[D];南京农业大学;2011年

7 陈元;高血压病伴肥胖患者醛固酮合成酶基因-344C/T多态性与血浆ET-1/NO浓度的相关性[D];南华大学;2013年

8 焦亚男;胶霉毒素对HEK-293细胞氧化应激性DNA损伤作用及机制探讨[D];大连医科大学;2013年

9 彭海洋;VPO1介导高血压内皮功能不全作用及机制[D];中南大学;2013年

10 沈长波;白藜芦醇预处理对氧糖剥夺/再灌注损伤神经干细胞的保护作用及机制研究[D];重庆医科大学;2014年

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本文编号：263106