一种用于检测高危型HPV的多重实时荧光PCR方法研究

发布时间：2020-04-24 21:12

【摘要】：研究目的:建立一种可以同时检测13种高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)的多重实时荧光PCR方法,为进一步开发新的宫颈癌临床筛查检测试剂盒提供可能。研究方法:选择高危型HPV的非L1区域(如E6、E7、E1区域)和全基因组相对保守区基因序列作为靶序列,采用Primer Express 3.0软件设计特异性的引物和探针,建立和优化该检测方法。通过评价其准确性、灵敏度和特异性,建立一种多重实时荧光PCR方法。研究结果:用HPV全基因组分型参考品进行检测,该试剂盒具有较好的准确性、灵敏度和特异性;检测灵敏度约为500拷贝/ml;用不同菌株进行测试时,没有HPV特异性扩增信号出现;用临床样本检测时,检测结果阳性符合率为96.43%,阴性符合率为100%,总符合率为97.22%。研究结论:建立的多重实时荧光PCR方法具有较好的准确性、特异性,具有较低的检测限和较好的检测性能,可用于临床宫颈癌的筛查。
【图文】：

由图 5 可知，11 株标准品菌株靶基因及 IC 均无扩增，，阳性对照扩增正常，本研究方法中建立的反应体系与这 11 种标准品菌株均无交叉反应，特异性符合要4. 多重实时荧光 PCR 方法的灵敏度

c—100 拷贝体系阳性检出率：每种参考品均稀释三个浓度，每个浓度均检测 24 次图 6 三个不同浓度水平待测物的阳性检出率验数据统计结果，本研究方法中的 13 中高、51、52、56、58、59、68 在 500 拷贝
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R737.33

【参考文献】

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本文编号：2639407