白藜芦醇对多囊卵巢综合征小鼠卵巢和卵母细胞的保护作用

发布时间：2020-04-29 17:45

【摘要】：目的:多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是目前最常见的内分泌和代谢紊乱性疾病,会造成功能障碍(多囊卵巢形态、高雄激素血症、慢性无排卵或月经过少)和伴随糖尿病、高血压、肥胖等疾病的发生。然而,多囊卵巢综合征的病因及其病理生理机制仍不清楚。研究发现PCOS的不排卵及临床方面变化的病理基础都和卵泡生长发育异常有关,卵泡的生长发育又受卵巢颗粒细胞的凋亡调控,卵巢颗粒细胞的增殖和凋亡异常会直接影响卵泡的发育成熟和闭锁。白藜芦醇是从葡萄皮、花生等植物中提取出来的多酚类化合物,有非常广的生物药理学活性,比如抗肿瘤、抗炎、抗衰老、抗氧化等。本实验旨在研究白藜芦醇能否减缓PCOS小鼠卵巢和卵母细胞的损伤。方法:本课题选用ICR小鼠,随机分为四组(DHEA组、白藜芦醇低剂量组(50 mg/(kg·d))、白藜芦醇高剂量组(100 mg/(kg·d))和对照组;每组55只)。前三组每日进行皮下注射脱氢表雄酮(DHEA)(6mg/100g),连续注射21天。对照组每日皮下注射等量油剂。白藜芦醇组除了每天皮下注射DHEA之外,分别用50、100 mg/(kg·d)剂量的白藜芦醇(1%羧甲基纤维素钠(carboxymethylcellulose sodium,CMC)助溶)的生理盐水溶液灌胃。对照组和模型组用等量生理盐水灌胃。造模第14天以后,连续观察各组小鼠的动情周期。造模结束后,对各组实验小鼠禁食不禁水12小时后用10%水合氯醛麻醉、眼球取血以及分离血清测激素水平。对其余各组小鼠进行断颈处死,迅速从体内取出卵巢,用于电镜、免疫荧光等检测。结果:①实验中发现:皮下注射脱氢表雄酮后,小鼠活动量减少,体重增加,饮食、饮水量变多。白藜芦醇组小鼠活动量增加,体重减轻,饮食、饮水量减少。②小鼠血清检测结果:DHEA组睾酮(T)、胰岛素(INS)、瘦素(LEP)以及雌二醇(E2)水平高于对照组;与DHEA组相比,白藜芦醇组T、INS、LEP以及E2水平有降低。③对各组小鼠的卵巢进行组织形态学及凋亡检测,并进行比较,明显看出DHEA组小鼠卵巢组织有多个囊泡,颗粒细胞凋亡等。白藜芦醇组卵巢结构的破坏程度相比DHEA组减轻。④小鼠卵母细胞免疫荧光染色、电镜和RT-PCR测定结果:DHEA组卵母细胞质量下降,白藜芦醇组能使细胞的毒性降低。结论:①白藜芦醇增加了 PCOS小鼠窝产仔数。②白藜芦醇使PCOS小鼠内分泌功能趋于正常,激素水平接近于对照组。③白藜芦醇改善PCOS小鼠的卵巢组织形态结构,使其卵巢的功能趋于正常,纠正PCOS小鼠卵母细胞内活性氧代谢,缓解卵母细胞的细胞毒性。
【图文】：

卵巢,柱形图,标准误,小鼠

图３．１图（Ａ）显示的是各组卵巢ＨＥ染色图。（ａ）对照组；（ｂ）邋ＤＨＥＡ组；（ｃ）白藜逡逑芦醇低剂量组和（ｄ）白藜芦醇高剂量组。４０Ｘ放大倍数下拍摄。图（Ｂ）显示的是各逡逑组平均每只小鼠的卵母细胞个数。柱形图的实验数据以百分比表示为均值逡逑（ｍｅａｎｓ）邋±标准误（ＳＥＭ），柱形图上的＊代表本组的数据与ＤＨＥＡ组相比存逡逑在显著性差异（Ｐ＜邋０．０５）。图（Ｃ）是记录各组小鼠的体重（２天记录一次），逡逑连续２１天。折线图的实验数据每个点表示为均值（ｍｅａｎｓ）邋±标准误（ＳＥＭ）。逡逑图（Ｄ）显示是各组小鼠第２１天时的体重。柱形图的实验数据以百分比表示为均逡逑值（ｍｅａｎｓ）邋土标准误（ＳＥＭ），柱形图上的＊代表本组的数据与ＤＨＥＡ组相比逡逑存在显著性差异（Ｐ＜邋０．０５）。逡逑Ｆｉｇｕｒｅ邋３．１邋（Ａ）邋Ｈｅｍａｔｏｘｙｌｉｎ－ｅｏｓｉｎ邋ｓｔａｉｎｉｎｇ邋ｏｆ邋ｏｖａｒｉｅｓ邋ａｆｔｅｒ邋ｔｈｅ邋ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ邋ｓｈｏｗｅｄ逡逑２５逡逑

多囊卵巢综合征,白藜芦醇,凋亡

第三章实验结果及分析逡逑ｇ，白藜芦醇高剂量组２５．１３±０．３０ｇ邋（如图３．１Ｄ所示）。逡逑３．２白藜芦醇对多囊卵巢综合征小鼠血清激素的影响逡逑表３．１各组小鼠血清激素水平的比较（Ｓ±ＳＥＭ）逡逑组别逦小鼠总数（只）邋Ｔ（ｎｇ／ｍＬ）邋Ｅ２（ｐＭｏｌ／Ｌ）邋ＩＮＳ（ｍＩＵ／Ｌ）邋ＬＥＰ（ｎｇ／ｍＬ）逡逑对照组逦１０逦５１．９３±１．５３逦９４．８０±３．５８逦４０．３６±２．０８逦１１．４５±０．２９逡逑ＤＨＥＡ邋组逦１０逦５９．０４±１．３７邋＊逦１０４．００±３．６３逦４２．０７±１．７９逦１２．１０±０．１９逡逑白呭芦醇低剂邋ｆｔ邋组逦１０逦５１．２０±１．７３邋＊＊逦９８．０２±３．１１逦４０．０７±０．８０逦１１．６９士邋０．２９逡逑白藜芦酵高剂量组逦１０逦５１．６５±０．８９＊＊逦９７．８３±２．９９逦３６．３４±１．３１逦１０．７３±０．３２＊＊逡逑＊邋Ｐ＜邋０．０５邋ｖｅｒｓｕｓ邋Ｃｏｎｔｒｏｌ邋ｇｒｏｕｐ．邋＊＊邋ｐ＜邋0．0５邋ｖｅｒｓｕｓ邋ＤＨＥＡ邋ｇｒｏｕｐ．逡逑研宄表明，Ｌｅｐｔｉｎ是肥胖基因６编码的蛋白产物，它主要由脂肪合成和分泌逡逑来影响着全身的代谢。Ｌｅｐｔｉｎ和多囊卵巢综合征有着密切的联系，影响多囊卵逡逑巢综合患者的病情进展和临床特征，主要体现在多囊卵巢综合征患者的体重、逡逑神经分泌、卵巢功能以及生育功能等方面［１３５］。实验表明，ＤＨＥＡ组中Ｌｅｐｔｉｎ水逡逑平高于正常组，升高的机理可能和高胰岛素血症有关，两者之间存在密切的联逡逑系［１３６］。此外
【学位授予单位】：厦门大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R711.75

【参考文献】