RACK1通过RhoA激酶对宫颈癌SiHa细胞的侵袭能力的影响

发布时间：2020-05-07 11:30

【摘要】：目的:1.检测过表达质粒组、空白质粒组、未处理组宫颈癌细胞株SiHa的RACK1、RhoA的表达量,并探讨两者之间的相关性;2.检测不同浓度梯度的RhoA激酶抑制剂处理过表达质粒组、空白质粒组、未处理组宫颈癌细胞株SiHa后RhoA的表达量,并测定其侵袭能力。方法:1.培养SiHa细胞,通过脂质介导,一组转染过表达质粒,一组转染空白质粒,另外一组无任何处理,Real-time qPCR和Western blot两种方法检测三组Si Ha中的RACK1、RhoA的表达量;2.检测不同浓度梯度的RhoA激酶抑制剂处理三组后RhoA的表达量,用transwell小室检测三组侵袭能力是否有变化;3.采用SPSS 16.0软件分析,所有数据均采用均数±标准差(`x±s)形式表示,P0.05为存在统计学意义。结果:1.PCR检测过表达质粒组中RACK1和RhoA的表达量分别为1.25±0.59、1.36±0.04,Western blot检测过表达质粒组中RACK1和RhoA的表达量分别为0.94±0.08、0.52±0.07,均高于其它两组,空白质粒组与未处理组的RACK1、RhoA的表达量之间无显著性差异。Pearson积差相关系数分析,RACK1、RhoA两者正相关,且相关系数r:0.929、0.601。2.不同浓度梯度的Y-27632抑制三组中RhoA激酶,随着抑制剂浓度的增加,RhoA的表达量及侵袭能力降低。结论:1.在宫颈癌SiHa细胞中成功转染过表达质粒,同时获得稳定过表达RACK1的宫颈癌SiHa细胞;2.过表达RACK1通过RhoA激酶对宫颈癌细胞株SiHa侵袭能力有影响。
【图文】：

*与过表达质粒组相比，P＜0.05图-1 三组中 RACK1、RhoAmRNA 的相对表达量（2）三组中 RACK1、RhoA 蛋白的表达量Western Blot 检测三组中 RACK1 和 RhoA 蛋白相对含量。采用单因素方差分析（SNK）法对 3 组整体的差异进行统计分析，结果显示：3 组 RACK1 和 RhoA 蛋白的相对含量的差异具有统计学意义（P＜0.05）。组内差异采用单因素方差分析（LSD 法）进行统计分析，结果显示：过表达质粒组 RACK1 和 RhoA 蛋白的相对含量高于其他 2 组，差异具有统计学意义（P＜0.05）；但空白质粒组与未处理组的 RACK1 和 RhoA 蛋白的相对含量之间无显著性差异。（表 8、图-2）表-10 三组中 RACK1、RhoA 蛋白的相对含量组别 RACK1 蛋白 RhoA 蛋白过表达质粒组0.94±0.08 0.82±0.07空白质粒组0.74±0.07*0.42±0.07*未处理组0.72±0.09*0.39±0.05*F 值62.848 32.460P 值0.000 0.000*与过表达质粒组相比，P＜0.05

*与过表达质粒组相比，P＜0.05图-2 三组中 RACK1、RhoA 蛋白的相对含量（3）三组中 RACK1、RhoA 的两者之间的相关性分析RT-PCR 测出 RACK1、RhoA 的 mRNA 的相对表达量，，经过 Pearson 直线相关系数分析，两者的表达具有正相关性，相关系数 r 为 0.929，P＜0.05（图-3A）。Western blot 测出 RACK1、RhoA 蛋白的相对含量，经过 Pearson 直线相关系数分析，两者的表达具有正相关性，相关系数 r 为 0.601，P＜0.05（图-3B）。图-3 RACK1、RhoA 两者之间相关性分析
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R737.33

【参考文献】

相关期刊论文 前1条

1 顾颖;韩素萍;张晔;;RhoA、RAC1在宫颈癌组织中的表达及其临床意义[J];苏州大学学报(医学版);2008年01期

本文编号：2652905