miR-203调控ΔNP63对宫颈癌细胞株生物学特性的影响及作用机制研究

发布时间：2017-03-25 17:06

  本文关键词：miR-203调控ΔNP63对宫颈癌细胞株生物学特性的影响及作用机制研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:探究mi RNA-203和ΔNp63二者的功能关系,进一步明确mi RNA-203能否通过调控ΔNp63影响宫颈癌细胞的生物学行为,以揭示mi R-203参与宫颈癌变的作用机制。方法:1.应用靶基因预测网站,明确mi RNA-203与ΔNp63的靶向关系。2.在宫颈癌细胞株Caski和C33A中,利用细胞转染技术过表达或沉默mi R-203,采用RT-PCR法定量检测mi R-203的表达并对转染效果进行验证。3.在mi R-203过表达或沉默的Caski和C33A细胞中,采用CCK-8法、流式细胞检测法、细胞划痕实验对细胞增殖、凋亡、迁移的生物学行为进行检测。4.在mi R-203过表达或沉默的Caski和C33A细胞中,采用westem blot法对ΔNp63蛋白进行检测,进而研究mi R-203通过调控ΔNp63对宫颈癌细胞的作用机制。结果:1.通过生物信息学靶基因预测网站ΔNp63被预测为mi R-203的一个靶点,mi R-203可以与ΔNp63的m RNA 3′UTR高度结合。2.在HPV16阳性的宫颈癌细胞Caski和HPV16阴性的宫颈癌细胞C33A中成功转染mi R-203 mimics和mi R-203 inhibitor。3.过表达或沉默mi R-203对宫颈癌细胞生物学特性的影响:过表达mi R-203可抑制Caski和C33A细胞增殖、促进细胞凋亡、延缓细胞迁移;而沉默mi R-203可加快Caski和C33A细胞增殖、延缓细胞凋亡、促进细胞迁移。4.mi R-203与ΔNp63的关系:在mi R-203 mimics转染的Caski和C33A细胞中,mi R-203表达明显升高,ΔNp63蛋白表达明显下降;而在mi R-203 inhibitor转染的Caski和C33A细胞中,mi R-203表达降低,ΔNp63表达升高。结论:1.在宫颈癌细胞中,mi R-203过表达可抑制细胞增殖和迁移、促进细胞凋亡;而沉默mi R-203可促进细胞增殖和迁移、延缓细胞凋亡。提示mi R-203能够影响Caski和C33A细胞增殖、凋亡、迁移的生物学行为。2.过表达mi R-203可下调ΔNp63的表达,沉默mi R-203可上调ΔNp63的表达。ΔNp63可能是mi R-203的负调控靶基因,mi R-203可能通过调控ΔNp63发挥抑癌作用。
【关键词】：宫颈癌 miR-203 ΔNp63 microRNA
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.33
【目录】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 常用缩写词中英文对照表9-10
• 前言10-12
• 1 材料与方法12-28
• 1.1 材料12-15
• 1.2 实验方法15-26
• 1.3 统计学方法26-28
• 2 结果28-38
• 2.1 miR-203 与ΔNP63 的靶向关系28
• 2.2 Caski和C33A细胞成功转染miR-203 模拟物及抑制物28-29
• 2.3 转染48小时后Caski和C33A细胞miR-203 的表达量29-31
• 2.4 miR-203 对Caski和C33A细胞增殖能力的影响31-33
• 2.5 miR-203 对Caski和C33A细胞凋亡能力的影响33-35
• 2.6 miR-203 对Caski和C33A细胞迁移能力的影响35-36
• 2.7 转染72小时后Caski和C33A细胞ΔNP63 的表达水平36-38
• 3 讨论38-41
• 4 结论41-42
• 参考文献42-44
• 综述44-53
• 参考文献50-53
• 致谢53-54
• 在学期间承担/参与的科研课题与研究成果54-55
• 个人简历55

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 杨君;王彬;周德平;张轩珍;李云霞;;P16、△NP63在宫颈上皮内瘤变及宫颈癌组织中的表达及相关性研究[J];重庆医学;2009年24期

2 敬鹏;吴小候;罗春丽;陈刚;何云峰;;ΔNp63基因对TCCB 5637细胞侵袭作用的影响[J];重庆医科大学学报;2011年04期

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本文编号：267499