母体高同型半胱氨酸血症状态对早期胚胎发育及表观遗传学的影响

发布时间：2020-06-02 09:07

【摘要】：目的:探究母体高同型半胱氨酸血症状态对早期胚胎发育的影响及表观遗传学改变方法:使用含3%蛋氨酸的动物繁殖饲料喂食6周大小C57/BL6雌鼠6周,建立高同型半胱氨酸血症小鼠模型,小鼠血值17 umol/L为建模成功的高同型半胱氨酸血症小鼠。以PMSG+HCG序贯促排法对建模成功的小鼠进行超促排卵后体外受精并且进行体外胚胎培养,观察并记录胚胎不同时期的发育率,收集囊胚,摘取模型鼠卵巢组织。另外,对建模小鼠进行合笼实验,一部分用于产仔计数活产数;一部分在14.5dpc时取雌性胎鼠卵巢用于检测胚胎发育及表观重编程过程和同型半胱氨酸代谢关键基因表达水平。结果:高同型半胱氨酸血症组囊胚形成率(50.6%)显著低于正常组(75.5%),两组之间有统计学差异(p0.05)。高同型半胱氨酸血症组囊胚甲基化水平较正常组低,与甲基化重编程密切相关的两个蛋白DNMT1、DPPA3表达水平低于正常组。模型组(F0)卵巢中与同型半胱氨酸代谢相关的关键基因表达水平上调,而模型组14.5dpc(F1)卵巢中该通路相关基因表达水平无明显改变。模型组(F0)和14.5dpc(F1)卵巢中与表观重编程密切相关的两个关键蛋白DNMT1、DPPA3表达下调,14.5dpc(F1)卵巢中参与胚胎发育的关键基因OCT4、SOX2表达下调。高同型半胱氨酸血症组活产数(4.2±1.9)较正常组活产数(7.6±1.7)低,两组有统计学差异(P0.05)。
【图文】：

SDSL、GLYCTK、CTH、DAO、DLD、AGXT 、ALAS1、ALAS2、 GCGAMT、PHGDH、GATM、GCSH、GNMT、GLDC、AMT 、PSAT1、AOC2、MAOB、PGAM4、PIPOX、PGAM1、PGAM2、PSPH、SRR、AGXT2、BPGM、ACBS、GRHPR10.2 通过 STRING 数据库(version-10-5.string-db.org)，将以上三路分别构建 PPI 蛋白互做网络。（图 1-3）10.3 通过网络中蛋白互做的关联程度及大量文献查询，筛选出 6 个发育及其表观重编程的关键基因，，7 个同型半胱氨酸代谢通路的基因，设计引物，进行后续实验样本实时定量 PCR 实验。13 个核因及其 PPI 网络模式如下。（图 4）DNMT1、DNMT3A、DPPA3、NANOG、SOX2、OCT4/POU5F1、CBS、GBHMT、MTR、AHCYL2、MAT2A、MAT2B

叶酸与一碳单位代谢通路图
【学位授予单位】：华中科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R714.2

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本文编号：2692929