ALDH1和CD133在上皮性卵巢癌中的表达及侵袭转移中的作用
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【摘要】:目的:研究ALDH1和/或CD133的表达在卵巢癌患者疾病进展与临床预后评估方面的作用,同时进一步探讨ALDH1和/或CD133的表达对卵巢癌细胞生物学行为的影响,从而评估其作为卵巢癌肿瘤干细胞标志物的意义。方法:1.收集湖南省肿瘤医院2011~-2014年确诊为卵巢癌的手术切除标本205例,同时收集卵巢良性肿瘤组织及正常卵巢组织各30例。采用免疫组化的方法分别检测ALDH1与CD133在不同类型的卵巢组织中的表达,并进一步分析这两种蛋白与205例上皮性卵巢癌患者临床病理特征的关系以及两个蛋白之间的相关性,同时探讨ALDH1和CD133的表达对卵巢癌患者生存预后的影响。2.流式细胞术检测并分选ALDH1~+和/或CD133~+细胞以及ALDH1~-和/或CD133~-细胞群,采用划痕实验、transwell迁移和侵袭实验以及平板克隆实验分别检测不同亚群细胞的迁移、侵袭和克隆形成能力。结果:1.ALDH1和CD133在上皮性卵巢癌中的表达均高于正常卵巢(P0.05),在卵巢良性肿瘤和正常卵巢之间的表达均无显著性差异(P0.05)。但在上皮性卵巢癌和卵巢良性肿瘤的比较中,CD133的表达亦存在显著性差异(P0.05),而ALDH1表达的差异无统计学意义(P0.05)。2.在上皮性卵巢癌中,ALDH1的阳性表达与组织学分级、淋巴结转移情况、术前CA125水平以及MDACC分型有显著相关性(P0.05);CD133的阳性表达则与FIGO分期以及淋巴结转移呈正相关(P0.05)。3.Kaplan-Meier生存分析显示ALDH1~+组和CD133~+组的卵巢癌患者分别相较于ALDH1~-组和CD133~-组的患者而言,其无瘤生存率和总生存率均明显降低(P0.05);同时,ALDH1~+CD133~+组卵巢癌患者的无疾病生存期和总生存期也明显低于非双阳性组患者(P0.001);Cox多因素分析显示,ALDH1的阳性表达、CD133的阳性表达以及淋巴结的转移是影响卵巢癌患者无进展生存期的危险因素(P0.05),而较晚的FIGO分期、ALDH1的阳性表达、CD133的阳性表达均是影响卵巢癌患者总生存期的危险因素(P0.05)。4.Spearman相关性分析显示ALDH1和CD133的蛋白表达存在正相关(P0.05,r=0.169)。5.ALDH1~+较ALDH1~-、CD133~+较CD133~-以及ALDH1~+CD133~+较ALDH1~-CD133~-的细胞亚群的侵袭、迁移以及细胞克隆形成能力均明显增强(P0.05)。结论:1.ALDH1和CD133在上皮性卵巢癌中的阳性表达与患者的临床不良预后密切相关,提示两者的联合检测可能作为卵巢癌不良预后的分子标志物。2.上皮性卵巢癌中ALDH1和CD133的表达可能存在一定的正相关性。3.ALDH1~+和/或CD133~+上皮性卵巢癌细胞具有更强的增殖、侵袭与迁移能力,提示ALDH1和CD133可能是有效的卵巢癌干细胞标志物。
【关键词】:上皮性卵巢癌 ALDH1 CD133 侵袭 转移
【学位授予单位】:南华大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R737.31
【目录】:
- 摘要4-6
- Abstract6-12
- 第1章 绪论12-14
- 第2章 材料与方法14-28
- 2.1 实验材料14-17
- 2.1.1 标本14-15
- 2.1.2 细胞系15
- 2.1.3 实验试剂15-16
- 2.1.4 实验器材16-17
- 2.2 实验方法17-28
- 2.2.1 组织病理学实验17-21
- 2.2.2 细胞学实验21-26
- 2.2.3 统计分析26-28
- 第3章 实验结果28-46
- 3.1 ALDH1、CD133在卵巢癌、卵巢良性肿瘤以及正常卵巢中的表达28-30
- 3.1.1 ALDH1在卵巢癌、卵巢良性肿瘤以及正常卵巢中的表达28-29
- 3.1.2 CD133在卵巢癌、卵巢良性肿瘤以及正常卵巢中的表达29-30
- 3.2 ALDH1、CD133蛋白的表达与临床病理资料的关系30-32
- 3.3 ALDH1、CD133和ALDH1/CD133的表达与患者生存预后的关系32-35
- 3.3.1 ALDH1的表达与卵巢癌患者的PFS和OS的关系32
- 3.3.2 CD133的表达与卵巢癌患者的PFS和OS的关系32-33
- 3.3.3 ALDH1和CD133双阳性组与ALDH1和CD133非双阳性组的PFS和OS的关系33-34
- 3.3.4 Cox多因素分析34-35
- 3.4 ALDH1和CD133的相关性分析35
- 3.5 ALDH1~+比ALDH1~-细胞群具有更高的体外迁移、侵袭及集落形成能力35-38
- 3.5.1 流式检测ALDH1在卵巢癌细胞系A2780中的表达35-36
- 3.5.2 划痕实验36
- 3.5.3 transwell迁移与侵袭实验36-38
- 3.5.4 平板克隆实验38
- 3.6 CD133~+细胞比CD133~-细胞具有更高的体外迁移、侵袭能力38-42
- 3.6.1 流式检测CD133在卵巢癌细胞系A2780中的表达38-39
- 3.6.2 划痕实验39-40
- 3.6.3 transwell迁移与侵袭实验40-41
- 3.6.4 平板克隆实验41-42
- 3.7 ALDH1~+CD133~+比ALDH1~-CD133~-细胞具有更高的体外迁移、侵袭及集落形成能力42-46
- 3.7.1 流式检测并分选ALDH1~+CD133~+细胞与ALDH1~-CD133~-细胞42
- 3.7.2 划痕实验42-43
- 3.7.3 transwell迁移与侵袭实验43-45
- 3.7.4 平板克隆实验45-46
- 第4章 讨论46-52
- 第5章 结论52-54
- 参考文献54-60
- 综述60-72
- 参考文献67-72
- 作者攻读学位期间取得的研究成果72-74
- 致谢74
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