二甲双胍联合卡铂对人宫颈癌Hela细胞的体外抗肿瘤作用

发布时间：2020-07-16 12:13

【摘要】：目的:探讨二甲双胍联合卡铂对人宫颈癌Hela细胞增殖抑制情况、抑制方式、分子机制及阐明二甲双胍与卡铂的药物协同作用。方法:将培养的宫颈癌Hela细胞分为空白对照组;实验组:不同浓度(0.01、0.5、1、5、10mmol/L)二甲双胍、不同浓度(25mg/L、50 mg/L)卡铂和联合用药组(不同浓度二甲双胍和卡铂联合用药),用MTT还原法检测各组作用24、48、72小时后的宫颈癌Hela细胞增殖抑制情况;以含5、10mmol/L浓度二甲双胍及25mg/L、50 mg/L的卡铂联合培养Hela细胞48小时,收获作用后的细胞,通过AO/EB染色在荧光显微镜下观察并记录细胞凋亡数;应用流式细胞仪检测经Annexin V/PI染色后的细胞凋亡情况;应用流式细胞仪检测线粒体膜电位和核酸蛋白检测仪检测caspase酶活性,分析研究其凋亡的分子机制。结果:1.不同浓度二甲双胍及联合用药对宫颈癌Hela细胞的增殖抑制的影响:MTT法检测:随着二甲双胍浓度的增加,宫颈癌Hela细胞细胞增殖抑制率明显增加,并呈浓度依赖性和时间依赖性,与空白对照组比较,差异具有统计学意义(P0.05);二甲双胍和卡铂联合用药组细胞增殖抑制率高于单独卡铂组的细胞增殖抑制率,差异有统计学意义(P0.05)。2.不同浓度二甲双胍及联合用药对宫颈癌Hela细胞的凋亡影响:1)AO/EB染色:与对照组比较,随着二甲双胍浓度的增加,宫颈癌Hela细胞细胞凋亡数增加,差异具有统计学意义(P0.05),且二甲双胍和卡铂联合用药组细胞凋亡数高于单独卡铂组的细胞凋亡率,差异具有统计学意义(P0.05)。2)Annexin V/PI染色:随着二甲双胍浓度的增加,宫颈癌Hela细胞细胞凋亡率增加,差异具有统计学意义(P0.05);二甲双胍和卡铂联合用药组的细胞凋亡数高于单独卡铂组细胞凋亡率,差异具有统计学意义(P0.05)。3.不同浓度二甲双胍及联合用药对宫颈癌Hela细胞线粒体膜电位影响:随着二甲双胍的浓度增加,线粒体膜电位降低,与空白对照组比较,差异具有统计学意义(P0.05);二甲双胍和卡铂联合用药组的线粒体膜电位低于单独卡铂用药组的线粒体膜电位,差异具有统计学意义(P0.05)。4.不同浓度二甲双胍及联合用药对宫颈癌Hela细胞的Caspase酶活性检测:与空白对照组比较,二甲双胍组能增强人宫颈癌Hela细胞caspase 1、3、6、8活性,差异具有统计学意义(P0.05);二甲双胍和卡铂联合用药组的人宫颈癌Hela细胞caspase 1、3、6、8活性高于单独卡铂用药组的人宫颈癌Hela细胞caspase1、3、6、8活性,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。结论:1.二甲双胍对体外培养的人宫颈癌Hela细胞具有增殖抑制作用;且二甲双胍与卡铂联合应用能够增强卡铂对人宫颈癌Hela细胞的增殖抑制作用;2.二甲双胍能诱导人宫颈癌Hela细胞的凋亡作用;且二甲双胍与卡铂联合应用能够增强卡铂对人宫颈癌Hela细胞的凋亡作用;3.二甲双胍对人宫颈癌Hela细胞增殖抑制作用的肿瘤分子机制,即通过降低细胞线粒体膜电位、激活caspase酶活性;4.二甲双胍对卡铂在化疗增敏作用的同时减少卡铂用量,降低化疗药物毒性。
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R737.33
【图文】：

了确定二甲双胍是否能够对体外的宫颈癌 Hela 细胞具有增殖抑制作用，双胍与卡铂联合应用能够增强卡铂对人宫颈癌 Hela 细胞的增殖抑制作们选取对数期的宫颈癌 Hela 细胞进行实验，于 37℃、5％C02培养二中过细胞贴壁。继之用不同浓度的二甲双胍处理宫颈癌 Hela 细胞 24h、48h通过 MTT 法检测其细胞增殖抑制情况。实验数据可知，与对照组相比，二甲双胍组随着二甲双胍的浓度增加，细抑制率增加，从图 3.1 所示，宫颈癌 Hela 细胞的细胞增殖抑制率在各浓.01、0.5、1、5、10mmol/L）二甲双胍作用 72 h 后，分别是(44.39±8.2)%±9.26)%、(16.22±4.12)%、(5.27±0.74)%、(4.20±0.20)%。如图 3.1 到图示，二甲双胍随着药物作用浓度的增加及药物作用时间的延长，细胞增殖呈现明显的浓度依赖性和时间依赖性。

二甲双胍对宫颈癌Hela细胞的增殖抑制作用（48小时）

分别是(44.39±8.2)%、(25.39±9.26)%、(16.22±4.12)%、(5.27±0.74)%、(4.20±0.20)%。如图 3.1 到图3.3 所示，二甲双胍随着药物作用浓度的增加及药物作用时间的延长，细胞增殖抑制率呈现明显的浓度依赖性和时间依赖性。图 3.1 二甲双胍对宫颈癌 Hela 细胞的增殖抑制作用（24 小时）

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本文编号：2757989