妊娠期无症状高胆汁酸血症的临床特点和尿液胆汁酸代谢轮廓分析

发布时间：2020-09-18 09:58

　　目的探讨妊娠期无症状高胆汁酸血症(Asymptomatic hypercholanemia of pregnancy,AHP)的临床特点和尿液胆汁酸代谢特征。通过尿液胆汁酸代谢轮廓分析,筛选诊断及鉴别诊断AHP的潜在生物标志物。方法1.收集2015年7月至2018年4月重庆医科大学附属第一医院的94例AHP孕妇、257例ICP孕妇和284例健康孕妇的临床信息,进行回顾性分析。2.采集其中28例AHP孕妇、48例ICP孕妇的初诊随机尿液和43例健康孕妇孕中晚期(孕28周~32周)的随机尿液。3.基于超高效液相色谱-高分辨三重四级杆飞行时间质谱(UPLC-Triple TOF-MS/MS)平台,联合靶标与非靶标策略,分析三组孕妇的尿液胆汁酸代谢轮廓。4.运用偏最小二乘判别分析(Partial least squares discriminant analysis,PLS-DA),挖掘AHP孕妇、ICP孕妇和健康孕妇的尿液胆汁酸代谢轮廓信息,建立诊断和鉴别诊断AHP的模型;5.综合受试者工作特征曲线(Receiver operating characteristic curve,ROC)和回归分析,筛选并评估AHP诊断与鉴别诊断的潜在尿液胆汁酸标志物,并通过验证集验证其诊断效能。结果1.AHP组不良妊娠结局的发生率(28.7%)高于对照组(10.9%),低于ICP组(50.2%);早发型(28周)AHP孕妇所占比例高于早发型ICP孕妇(44.7%vs.13.2%,P0.05)。2.本研究对孕妇尿液中14种已知胆汁酸进行定量分析,初步鉴定42种可能的胆汁酸。AHP组尿液总胆汁酸水平高于正常对照组(P0.017),低于ICP组(P0.017)。与对照组比较,AHP孕妇的三羟基胆汁酸包括α-鼠胆酸(α-muricholic acid,α-MCA),牛磺ω-鼠胆酸(Tauro-ω-muricholic acid,T-ω-MCA),牛磺胆酸(Taurocholic acid,TCA),甘氨胆酸(Glycocholic acid,GCA)和六种可能的胆汁酸明显增高(P0.017);与ICP孕妇比较,AHP孕妇的20种可能的硫酸化胆汁酸、牛磺猪胆酸(Taurohyocholic acid,THCA)、牛磺鹅脱氧胆酸(Taurochenodeoxycholic acid,TCDCA)和7种可能的非硫酸化胆汁酸明显降低(P0.017)。3.采用PLS-DA,以已检测的56种胆汁酸作为变量,两组间尿液胆汁酸代谢轮廓的PLS-DA模型显示,AHP组和对照组能够明显区分,AHP组和对照组的诊断正确率分别为90.0%和100.0%,总诊断正确率为96.4%;AHP组和ICP组能够明显区分,AHP组和ICP组的诊断正确率分别为100.0%和93.9%,总诊断正确率为96.2%;ICP组和对照组能够明显区分,ICP组和对照组的诊断正确率分别为84.5%和100%,总诊断正确率为92.7%。4.通过ROC曲线和二元logistics回归模型分析,将GCA和T-ω-MCA作为联合标志物诊断AHP,曲线下面积(The area under the curve,AUC)达0.960(95%CI:0.915 1.000),灵敏度和特异性分别为95.0%和85.3%,验证集中,该联合标志物诊断AHP灵敏度和特异性分别为87.5%、100.0%;将硫酸化单羟基胆汁酸(Momo-S)、硫酸化甘氨三羟基胆汁酸-2(Gtri-S-2)和硫酸化牛磺石胆酸(Taurolithocholic acid 3-sulfate,TLCA-S)作为联合标志物鉴别诊断AHP和ICP,AUC高达0.999(95%CI:0.972 1.000),灵敏度和特异性分别为91.2%和100.0%。验证集中,该联合标志物鉴别诊断AHP和ICP灵敏度和特异性分别为88.9%、93.8%。结论AHP孕妇增加不良妊娠结局风险。AHP孕妇与健康孕妇和ICP孕妇比较,其尿液胆汁酸代谢轮廓均有明显差异。这提示AHP可能不是一种亚健康状态,也区别于ICP。尿液成分胆汁酸可诊断和鉴别诊断AHP。
【学位单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R714.2
【部分图文】：

曲线,尿液,胆汁酸,检测线

表示检测过程稳定可靠，见图1。表 4 尿液成分胆汁酸的标准曲线与检测线性范围Table 4 The standard curves and linearity ranges of the detection of urinary individual bileacidBile acid Calibration curve r2 Linearity range (μmol/L )UDCA y = 1.2769x - 0.1967 0.9973 0.0030 - 10.0HDCA y = 1.1713x - 0.3449 0.9939 0.0030 - 20.0CDCA y = 0.0477x + 0.0290 0.9948 0.0030 - 20.0DCA y = 0.0410x + 0.0199 0.9968 0.0030 - 20.0TUDCA y = 0.1554x - 0.0301 0.9948 0.0030 - 20.0THDCA y = 0.1131x - 0.0020 0.9963 0.0030 - 20.0TCDCA y = 0.1345x - 0.0408 0

离子色谱,孕妇,胆汁酸,尿液

19图 2AHP 孕妇（A）、ICP 孕妇（B）和健康孕妇（C）的尿液胆汁酸提取离子色谱图Fig 2 The extraction ion chromatogram of urinary bile acids in AHP women (A), ICPpatients (B) and normal pregnancies (C).1:Gtri-1; 2: Gtri-2; 3: GHCA; 4: GCA; 5: Ttri-1; 6. Ttri-2; 7: Ttri-3;8: Ttri-4; 9: Ttri-5;10: T-ω-MCA; 11: T-α-MCA; 12: THCA; 13: TCA; 14: Tdi-1; 15: Tdi-2; 16: TUDCA; 17:Tdi-3; 18: TCDCA; 19: Gdi-1; 20: GUDCA; 21: GHDCA; 22: Gdi-2; 23:GCDCA; 24:GDCA; 25: tri-1; 26: tri-2; 27: α-MCA; 28: mono-S; 29: Gdi-S-1; 30: Gdi-S-2; 31:Gdi-S-3; 32: Gdi-S-4; 33: Gtri-S-1; 34: Gtri-S-2; 35: Tmono-1; 36: di-S-1; 36: di-S-1; 37:di-S-2; 38: di-S-3; 39: di-S-4; 40: di-S-5; 41: di-S-6; 42: di-S-7; 43: di-S-8; 44: mono-S; 45:Tdi-S-1; 46: Tdi-S-2; 47: Tdi-S-3; 48: Tdi-S-4; 49: Tdi-S-5; 50: Tdi-S-6; 51: Ttri-S-1; 52:Ttri-S-2; 53: Gmono-S-1; 54: Gmono-S-2; 55: Gmono-S-3; 56: Gmono-S-4.2.3.3 尿液已知胆汁酸的定量分析

胆汁酸,硫酸化,尿液,双羟基

2.3.5 成分胆汁酸的构成分析AHP 组尿液成分胆汁酸峰面积比/肌酐浓度的总和高于对照组，而低于 ICP 组（P < 0.017）。AHP 组和 ICP 组的非硫酸化胆汁酸水平均高于对照组（P < 0.017），但前两者间无统计学差异（P > 0.017）；AHP 组和对照组的硫酸化胆汁酸水平低于ICP 组（P < 0.017），而前两者间无统计学差异（P > 0.017）；三组的单羟基胆汁酸水平均较低；AHP 组和对照组的双羟基胆汁酸水平均低于 ICP 组（P < 0.017），而前两者间无统计学差异（P > 0.017）；AHP 组和 ICP 组的三羟基胆汁酸水平均高于对照组（P < 0.017），而前两者间无统计学差异（P > 0.017），如图 3 所示。对照组、AHP 组和 ICP 组的尿液胆汁酸均以硫酸化胆汁酸为主，分别为 51.73%、57.32%和 79.31%。且 ICP 组的硫酸化胆汁酸所占比例明显高于 AHP 组和对照组的硫酸化胆汁酸所占比例（P > 0.017），如图 4 所示。

【参考文献】