Fibrillin-1、Elastin在女性盆腔器官脱垂患者阴道前壁的表达及意义
本文关键词：Fibrillin-1、Elastin在女性盆腔器官脱垂患者阴道前壁的表达及意义，由笔耕文化传播整理发布。
【摘要】：盆腔器官脱垂(POP)即会阴疝是一个世界性的卫生问题,中老年妇女发病率较高,随着社会经济的发展,人口老龄化程度的加重,其发病率有逐年增高的趋势。其虽然不是致死性疾病,但严重影响人们的身体健康及生活质量。在美国,年龄50~79岁的妇女中约有40%患有不同程度的POP。POP的发病原因是多方面的,但其发生机制尚不明确。近年来研究发现盆底组织弹性纤维的薄弱、破坏或是POP发生的病理基础之一。弹性纤维是结缔组织中重要的组成成分,弹性纤维可赋予组织良好的伸缩性和可逆的变形性,从而可以维持组织正常的结构和功能。弹性蛋白(Elastin)是弹性纤维最主要和最核心蛋白,原纤维蛋白-1(Fibrillin-1)是弹性蛋白形成的支架,对弹性蛋白的形成发挥着至关重要的作用。有研究者发现腹股沟直疝患者腹横筋膜中弹性纤维稀疏、分离,Fibrillin-1含量显著降低,且分布异常,是导致腹股沟直疝患者腹横筋膜抵抗能力减弱的原因。弹性纤维在女性盆底组织中含量丰富,在POP患者中,Elastin、Fibrillin-1是否也参与了POP的发生及发展国内外文献却未见报道,因此,本实验试图通过研究非POP患者、II°脱垂患者、III°脱垂患者组织中Elastin、Fibrillin-1在蛋白水平及基因水平的表达情况,探索两者在POP的形成及发展中的作用及相互关系,从而为POP的发生原因及发展提供新的思路。目的通过研究非POP患者、II°脱垂患者、III°脱垂患者组织中Elastin、Fibrillin-1在蛋白水平及基因水平的表达情况,探索两者在POP的形成及发展中的作用及相互关系,从而为POP的发生原因及发展提供新的思路。材料和方法1.实验材料:收集我院2013年7月~2014年2月郑州大学第三附属医院妇科收治的患有盆腔器官脱垂的患者60例(均为绝经后妇女),其中经POP-Q评分II°脱垂30例,平均(59.93±1.98)岁,III°脱垂30例,平均(60.16±1.43)岁,术中均取其12点方位阴道壁全层,大小约1.0cm*1.0cm作为研究组。选择同期因宫颈癌Ia1期至Ib1期患者的阴道前壁12点方位大小约1.0cm*1.0cm全层组织标本30例作为对照组,平均(59.83±1.62)岁。所有标本常规取材,离体后立即分为两份,一份在离体的30分钟内储存在-80℃冰箱里,另一部分离体后立即置于10%甲醛溶液中固定,常规石蜡包埋。所有病例均无雌激素相关疾病及肝硬化、类风湿性关节炎等影响胶原和弹性蛋白代谢的疾病,近6个月内均未使用过皮质激素类及性激素类药物。各组病例组在年龄、产次、孕次、体重指数等进行单因素方差分析,组间各因素比较,差异无统计学意义。术前患者均签署了知情同意书。术后经病理专家证实,诊断明确。2.研究方法:分别采用免疫组化SP法及RT-PCR(逆转录聚合酶链反应)法,严格按照试剂盒用法说明,检测3组阴道壁组织中Elastin和Fibrillin-1在蛋白水平及基因水平的表达情况。3.统计学方法:采用SPSS17.0统计学软件包进行数据分析。计数资料采用均值加减标准差表示,组间采用单因素方差分析,c2检验及关联性分析,各检验方法均以a=0.05为检验水准。结果1.Elastin主要定位于细胞质中。Elastin在非POP患者阴道壁、II°脱垂患者阴道壁、及III°脱垂患者阴道壁组织中均有表达,随着脱垂程度的加重,细胞染色程度逐渐变浅,阳性染色细胞比例逐渐减少,三组样本中阳性表达率分别为73.3%、46.67%、20.00%,差异有统计学意义(P㩳0.05)。2.Fibrillin-1主要定位于细胞质中。Fibrillin-1在非POP患者阴道壁、II°脱垂患者阴道壁、及III°脱垂患者阴道壁组织中均有表达,随着脱垂程度的加重,细胞染色程度逐渐变浅,阳性染色细胞比例逐渐减少,三组样本中阳性表达率分别为83.33%、33.33%、10.00%,差异有统计学意义(P㩳0.05)。3.根据关联性分析显示,阴道壁组织中Elastin和Fibrillin-1蛋白的表达呈正相关(r=0.957,p0.01)。4.琼脂糖凝胶电泳显示:1560bp处为Fibrillin-1表达的目的条带,203bp处为Elastin表达的目的条带,564bp处为内参β-actin表达的条带。其半定量测定的结果显示:Elastin m RNA和Fibrillin-1 m RNA在三组中均为阳性表达,Elastin m RNA在电泳中半定量测定的结果显示:对照组表达量为(0.247±0.0039),II°脱垂组表达量为(0.184±0.0035),III°脱垂组表达量为(0.095±0.0031),各组两两比较差异均有统计学意义(p0.01)。Fibrillin-1 m RNA在电泳中半定量测定的结果显示:对照组表达量为(0.158±0.0021),II°脱垂组表达量为(0.085±0.0023),III°脱垂组表达量为(0.048±0.0024),各组间两两比较差异均有统计学意义(p0.01)。结论1.Elastin和Fibrillin-1蛋白在非POP患者阴道前壁、II°脱垂患者阴道前壁、及III°脱垂患者阴道前壁组织中均有表达,但随着脱垂程度的加重,其表达量减少,其在盆腔器官脱垂形成过程中起重要作用。2.在脱垂患者阴道前壁组织中Elastin和Fibrillin-1蛋白表达呈正相关,它们在盆腔器官脱垂的发生发展中有促进作用。
【关键词】：盆底器官脱垂 弹性纤维 原纤维蛋白-1 弹性蛋白
【学位授予单位】：郑州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R711.2
【目录】：
- 摘要4-7
- Abstract7-12
- 中英文缩略词12-13
- 1 引言13-18
- 2 实验标本、试剂及仪器18-22
- 3 实验方法22-28
- 4 实验结果28-31
- 5 讨论31-37
- 6 结论37-38
- 附图38-41
- 参考文献41-45
- 综述部分 盆腔器官脱垂的病因学研究进展45-65
- 参考文献59-65
- 个人简历 在学校期间发表的学术论文和研究成果65-66
- 致谢66
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