脂肪间充质干细胞激活EZH2促进卵巢上皮性癌增殖及侵袭能力的研究
发布时间:2020-12-12 15:27
目的:探讨脂肪间充质干细胞(AD-MSCs,Adipose-derived mesenchymal stem cells)调节EZH2促进卵巢癌的转移、侵袭的机制。方法:(1)体外分离、培养健康人大网膜脂肪间充质干细胞,形态学和流式细胞仪检测获得原代细胞是否是脂肪间充质干细胞,收集制备脂肪间充质干细胞条件培养基(ADSCs-CM)。(2)建立稳定增殖的卵巢癌细胞系SKOV3、HO8910和ES2,脂肪间充质干细胞条件培养基处理上述细胞株,所有细胞置于37℃、5%CO2培养箱培育。(3)Real-time PCR(实时定量PCR)及Western blot检测经条件培养基处理后上述卵巢癌细胞EZH2表达水平的变化。Cell Counting Kit-8、细胞划痕试验检测卵巢癌细胞增殖及迁移能力,Transwell小室检测卵巢癌细胞侵袭能力的变化。(4)EZH2shRNA稳定转染SKOV3、HO8910和ES2卵巢癌细胞系,获得稳定转染细胞株。(5)条件培养基处理稳定转染卵巢癌细胞,Cell Counting Kit-8增殖、细胞划痕试验和Transwell小室检测其EZH2表达水平、迁移...
【文章来源】:青岛大学山东省
【文章页数】:63 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
abstract
引言
第一部分 大网膜脂肪来源的脂肪间充质干细胞原代培养及鉴定
材料和方法
1 实验材料
2 实验试剂与设备
2.1 实验试剂
2.2 实验仪器与设备
3 主要溶液配制
3.1 浓缩胶和分离胶的配置方法
4 实验方法
实验结果
1 脂肪间充质干细胞形态学特征
2 脂肪间充质干细胞成骨及成脂鉴定
3 流式细胞学表面
讨论
结论
第二部分 脂肪间充质干细胞提高卵巢癌EZH2 表达
材料和方法
1 实验材料
2 主要试剂及仪器
3 实验方法
实验结果
1 卵巢癌细胞株基因水平检测结果
2 卵巢癌细胞株蛋白水平检测结果
3 构建稳定转染细胞株
讨论
结论
第三部分 脂肪间充质干细胞对卵巢癌增殖、迁移及侵袭能力的影响
材料和方法
1 实验材料
2 主要试剂及仪器
3 实验方法
实验结果
讨论
结论
第四部分 脂肪间充质干细胞激活卵巢癌EZH2 促进其迁移和侵袭的体外研究
材料与方法
1 实验材料
2 实验试剂和仪器
3 实验方法
实验结果
结论
第五部分 脂肪间充质干细胞通过激活卵巢癌EZH2促进其增殖和侵袭的体内研究
材料与方法
1 实验材料
2 实验试剂和仪器
3 实验方法
实验结果
讨论
结论
参考文献
综述
综述参考文献
中英文缩略词表
攻读学位期间研究成果
致谢
【参考文献】:
期刊论文
[1]脂肪来源的干细胞移植对大鼠脑缺血后神经细胞凋亡及Bcl-2、caspase-12表达的影响[J]. 林小惠,刘楠,肖迎春,陈荣华,杜厚伟,王杰华,张逸仙,刘德山. 细胞与分子免疫学杂志. 2011(01)
本文编号:2912818
【文章来源】:青岛大学山东省
【文章页数】:63 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
abstract
引言
第一部分 大网膜脂肪来源的脂肪间充质干细胞原代培养及鉴定
材料和方法
1 实验材料
2 实验试剂与设备
2.1 实验试剂
2.2 实验仪器与设备
3 主要溶液配制
3.1 浓缩胶和分离胶的配置方法
4 实验方法
实验结果
1 脂肪间充质干细胞形态学特征
2 脂肪间充质干细胞成骨及成脂鉴定
3 流式细胞学表面
讨论
结论
第二部分 脂肪间充质干细胞提高卵巢癌EZH2 表达
材料和方法
1 实验材料
2 主要试剂及仪器
3 实验方法
实验结果
1 卵巢癌细胞株基因水平检测结果
2 卵巢癌细胞株蛋白水平检测结果
3 构建稳定转染细胞株
讨论
结论
第三部分 脂肪间充质干细胞对卵巢癌增殖、迁移及侵袭能力的影响
材料和方法
1 实验材料
2 主要试剂及仪器
3 实验方法
实验结果
讨论
结论
第四部分 脂肪间充质干细胞激活卵巢癌EZH2 促进其迁移和侵袭的体外研究
材料与方法
1 实验材料
2 实验试剂和仪器
3 实验方法
实验结果
结论
第五部分 脂肪间充质干细胞通过激活卵巢癌EZH2促进其增殖和侵袭的体内研究
材料与方法
1 实验材料
2 实验试剂和仪器
3 实验方法
实验结果
讨论
结论
参考文献
综述
综述参考文献
中英文缩略词表
攻读学位期间研究成果
致谢
【参考文献】:
期刊论文
[1]脂肪来源的干细胞移植对大鼠脑缺血后神经细胞凋亡及Bcl-2、caspase-12表达的影响[J]. 林小惠,刘楠,肖迎春,陈荣华,杜厚伟,王杰华,张逸仙,刘德山. 细胞与分子免疫学杂志. 2011(01)
本文编号:2912818
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