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脂肪间充质干细胞激活EZH2促进卵巢上皮性癌增殖及侵袭能力的研究

发布时间:2020-12-12 15:27
  目的:探讨脂肪间充质干细胞(AD-MSCs,Adipose-derived mesenchymal stem cells)调节EZH2促进卵巢癌的转移、侵袭的机制。方法:(1)体外分离、培养健康人大网膜脂肪间充质干细胞,形态学和流式细胞仪检测获得原代细胞是否是脂肪间充质干细胞,收集制备脂肪间充质干细胞条件培养基(ADSCs-CM)。(2)建立稳定增殖的卵巢癌细胞系SKOV3、HO8910和ES2,脂肪间充质干细胞条件培养基处理上述细胞株,所有细胞置于37℃、5%CO2培养箱培育。(3)Real-time PCR(实时定量PCR)及Western blot检测经条件培养基处理后上述卵巢癌细胞EZH2表达水平的变化。Cell Counting Kit-8、细胞划痕试验检测卵巢癌细胞增殖及迁移能力,Transwell小室检测卵巢癌细胞侵袭能力的变化。(4)EZH2shRNA稳定转染SKOV3、HO8910和ES2卵巢癌细胞系,获得稳定转染细胞株。(5)条件培养基处理稳定转染卵巢癌细胞,Cell Counting Kit-8增殖、细胞划痕试验和Transwell小室检测其EZH2表达水平、迁移... 

【文章来源】:青岛大学山东省

【文章页数】:63 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
abstract
引言
第一部分 大网膜脂肪来源的脂肪间充质干细胞原代培养及鉴定
    材料和方法
        1 实验材料
        2 实验试剂与设备
            2.1 实验试剂
            2.2 实验仪器与设备
        3 主要溶液配制
            3.1 浓缩胶和分离胶的配置方法
        4 实验方法
    实验结果
        1 脂肪间充质干细胞形态学特征
        2 脂肪间充质干细胞成骨及成脂鉴定
        3 流式细胞学表面
    讨论
    结论
第二部分 脂肪间充质干细胞提高卵巢癌EZH2 表达
    材料和方法
        1 实验材料
        2 主要试剂及仪器
        3 实验方法
    实验结果
        1 卵巢癌细胞株基因水平检测结果
        2 卵巢癌细胞株蛋白水平检测结果
        3 构建稳定转染细胞株
    讨论
    结论
第三部分 脂肪间充质干细胞对卵巢癌增殖、迁移及侵袭能力的影响
    材料和方法
        1 实验材料
        2 主要试剂及仪器
        3 实验方法
    实验结果
    讨论
    结论
第四部分 脂肪间充质干细胞激活卵巢癌EZH2 促进其迁移和侵袭的体外研究
    材料与方法
        1 实验材料
        2 实验试剂和仪器
        3 实验方法
    实验结果
    结论
第五部分 脂肪间充质干细胞通过激活卵巢癌EZH2促进其增殖和侵袭的体内研究
    材料与方法
        1 实验材料
        2 实验试剂和仪器
        3 实验方法
    实验结果
    讨论
    结论
参考文献
综述
    综述参考文献
中英文缩略词表
攻读学位期间研究成果
致谢


【参考文献】:
期刊论文
[1]脂肪来源的干细胞移植对大鼠脑缺血后神经细胞凋亡及Bcl-2、caspase-12表达的影响[J]. 林小惠,刘楠,肖迎春,陈荣华,杜厚伟,王杰华,张逸仙,刘德山.  细胞与分子免疫学杂志. 2011(01)



本文编号:2912818

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