NOS1在宫颈癌干细胞中的表达及对化疗敏感性的影响

发布时间：2020-12-15 17:30

　　目的探讨一氧化氮合酶1（NOS1）在宫颈癌干细胞（CCSCs）中的表达水平,并分析NOS1对CCSCs顺铂（Cisplatin, DDP）化疗敏感性的影响及作用机制。方法 qRT-PCR检测NOS1在宫颈癌细胞系HeLa、Siha、Caski及人正常宫颈上皮细胞系Hucec中的表达水平。选择高表达NOS1的宫颈癌细胞培养CCSCs。Western blot检测肿瘤干细胞（CSCs）中Nanog、SOX2、OCT4干性标志蛋白及NOS1的表达。MTS检测宫颈癌细胞和CCSCs对DDP的IC50值。对照siRNA和NOS1 siRNA（si-NOS1）转染CCSCs分为NC组和si-NOS1组,MTS检测两组CCSCs对DDP的IC50值。DDP处理NC组和si-NOS1组CCSCs后流式细胞仪实验检测细胞凋亡,Western blot检测细胞中ABCG蛋白和凋亡相关蛋白的表达。结果 qRT-PCR结果显示NOS1在宫颈癌细胞系中的表达高于在人正常宫颈上皮细胞系Hucec中的表达水平,在HeLa细胞中表达最高（P<0.05）。OCT4、Nanog、SOX2干细胞标志物NOS1在CSC... 

【文章来源】：西部医学. 2020年09期

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

NOS1在CCRCs细胞中的表达水平

选择表达NOS1最高的宫颈癌细胞系HeLa培养CCSCs,在显微镜下可观察到肿瘤球形成,且透光性较强(见图2A)。肿瘤球制成单个细胞后,与抗体包被的磁珠孵育筛选出CD133/CD44双阳性的细胞。扩大培养后可观察到其形成的肿瘤球体积更大(见图2B)。Western blot检测CD133/CD44双阳性中干性标志蛋白的表达,结果显示Nanog、OCT4和SOX2在CD133/CD44双阳性细胞(CCSCs)中的表达高于在CD133/CD44非双阳性细胞(HeLa)中的表达,NOS1在CCSCs中的表达高于在HeLa细胞中的表达(P<0.05),见图2C。2.3 CCSCs对DDP的敏感性

用不同浓度的DDP处理CCSCs和HeLa细胞,MTS结果显示DDP对HeLa细胞作用48h的IC50值为(8.21±0.14)μg/mL,对CCSCs为(17.46±0.75)μg/mL(t=8.39, P=0.026),与Hela细胞相比,CCSCs对DDP敏感性降低(P<0.05)。见图3。2.4 NOS1siRNA转染效率的检测

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：2918626