葡萄糖调节蛋白78（GRP78）通过MEK/Erk信号通路调控卵巢癌侵袭转移的研究

发布时间：2020-12-21 00:06

　　目的:1.观察葡萄糖调节蛋白78（glucose regulated protein 78,GRP78）对卵巢癌侵袭、转移的影响。2.探讨MEK/Erk信号通路在GRP78调控卵巢癌侵袭、转移中的作用。方法:1.免疫组化法检测60例卵巢浆液性癌组织和40例卵巢浆液性囊腺瘤组织中GRP78的表达情况,并以western blot法检测GRP78的表达水平;SPSS分析GRP78表达量和卵巢浆液性癌临床指标之间的关系。2.Western blot 法检测 HO-8910 细胞和 HO-8910PM 细胞中 GRP78、p-MEK、MEK、p-Erk、Erk的表达水平。3.Transwell小室法检测HO-8910细胞和HO-8910PM细胞侵袭、迁移能力。4.构建pcDNA-GRP78和GRP78-shRNA真核表达质粒载体,应用LipofectamineM2000将其分别转染至HO-8910细胞和HO-8910PM细胞中,分别过表达和沉默GRP78的表达;采用western blot法检测HO-8910细胞和HO-8910PM细胞中GRP78的表达水平,transwell法检测HO-89... 

【文章来源】：蚌埠医学院安徽省

【文章页数】：47 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１?ＧＲＰ７８在卵巢浆液性癌组织和卵巢浆液性囊腺瘤组织中的表达

为进一步证实ＧＲＰ７８在卵巢癌细胞中与其侵袭、迁移能力的关系，我们分别??在ＨＯ－８９１０细胞中过表达ＧＲＰ７８，在ＨＯ－８９１０ＰＭ细胞中干扰ＧＲＰ７８的表达。??结果如图４Ａ－Ｆ，在ＨＯ－８９１０细胞中过表达ＧＲＰ７８，细胞的侵袭、迁移能力显著??升高，升高比例分别为６８．３２％，７２．５３％?（尸＜０．０５）。而在ＨＯ－８９１０ＰＭ细胞中??干扰ＧＲＰ７８的表达，细胞的侵袭、转移能力显著降低，降低比例分别为６２．４５％，??７０．１８％?（Ｐ＜０．０５）（见图４Ｇ－Ｋ）。以上结果说明ＧＲＰ７８可调控卵巢癌细胞的侵??袭、迁移能力。??ｎｅｇａｔｉｖｅ??Ａ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｐｃＯＮＡ?ｐｃＯＮＡ－ＧＲＰ７８?ｑ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｓｈＲＮＡ－ＧＲＰ７８??ＧＲＰ７８?—－＊？?一晰?ｒｎｍｍｍ＊?ＧＲＰ７８?ｊｊＭｉ?？＇??Ｂ?Ｈ??２５?＊?１＊２?１?ｃｏ??２〇?ｆ—Ｉ?１－〇???ｒ－＾－，?＾??Ｉ?２０?Ｉ?８?％??Ｉ?１．５?ｗ?｜?Ｉ?Ｉ??笔?１．０???ｒ—Ｃ—ｌ?Ｉ?Ｓ?＇６?８?｜??０?９?Ｏ?．４?ｏ??Ｉ＿??Ｉ?Ｉ?１?．２?１?Ｉ??ｇａｓ．?８?Ｉ??〇．〇?????????０．０??????????ｃ?：：？?＾?－??ｃｏｎｔｒｏｌ?ｐｃＯＮＡ?ｐ＜ｒｆＤＮＡ－ＧＲＰ７８?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｎｅｇａｔｉｖｅ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｓｈＲＮＡ－ＧＲＰ７８??Ｄ１００?ｉ?８０??ｒ—Ｊ—

牐ǎ校迹埃?埃担??崾荆停牛耍?牛颍胄藕磐?罚崳?被抑制。ＰＤ９８０５９抑制ＭＥＫ／Ｅｒｋ信号通路后，ＨＯ－８９１０ＰＭ细胞侵袭、迀移能力??显著降低，降低比例分别为２０．１６％?，?３４．２８％?（见图７Ｂ和Ｃ）（尸＜０．０５）。结果??提示，抑制ＭＥＫ／Ｅｒｋ信号通路可降低ＨＯ－８９１０ＰＭ细胞的侵袭、迁移能力（Ｐ＜０．０５）。??以上所有结果提示，在卵巢癌细胞中，ＧＲＰ７８可能是通过调节ＭＥＫ／Ｅｒｋ信号通??路的活性影响细胞的侵袭、迁移能力。??＊?ｃｏｎｔｒｏｌ?ＰＯ９８０５９??＿?一…??ＭＥＫ??Ｐ－Ｅｒｋ?楚??■ｐ＿ｉ＿??１１１Ｋ?ｍｍｍ??＾－ａｃｔｉｎ??Ｂ??８０??Ｔ??ｇ?６０?一＂＂?—?？??〇?２??Ｓ?§??？?４０?Ｑ??ａ?＾??＂２〇?Ｉ?ｒ－１－！??Ｉ??Ｕ??０?????＂．．．??侵袭??Ｃ??１２０??彻?￣Ｌ－１??Ｑ?＊〇??§?５０?｜??２?Ｑ??？６０?Ｉ??：?〇??２０?ｆ??ｕ??０????????迁移??图７．?ＨＯ－８９１０ＰＭ细胞中阻断ＭＥＫ／Ｅｒｋ信号通路后可显著降低细胞的侵袭、迁移能力。（Ａ－Ｃ）??ＰＤ９８０５９细胞作用于ＨＯ－８９１０ＰＭ细胞２４小时后

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博士论文
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本文编号：2928812