RUNX1基因敲除对卵巢癌细胞凋亡的影响
发布时间:2020-12-26 00:40
背景卵巢恶性肿瘤死亡率居妇科恶性肿瘤首位,卵巢上皮癌患者5年生存率始终低于30%的一个重要原因是化疗耐药的产生,即初始有效的化疗药物在复发时所诱导的肿瘤细胞凋亡被抑制。RUNX1(Runt-related transcription factor 1),也叫AML1(acute myeloid leukemia 1 protein),是造血功能的主调控基因,它不仅是控制造血干细胞产生的基本转录因子,而且是调控造血干细胞分化产生骨髓细胞和淋巴细胞的关键转录因子,RUNX1属于RUNX转录调控家族,该家族包括RUNX1、RUNX2和RUNX3三个成员,小鼠基因敲除结果说明,RUNX1与造血功能和神经发育、RUNX2与骨骼形成、RUNX3与肠道上皮细胞增殖相关。近年来发现,RUNX1在肺癌、乳腺癌、结肠直肠癌等多种实体瘤中表达失调,其所起作用随不同肿瘤而变化。在食道癌、乳腺癌、结肠癌和小肠癌等肿瘤中,RUNX1低表达,具有抑癌作用;而在多种上皮性肿瘤包括皮肤癌和头颈部鳞癌中,RUNX1常常高表达,是癌症起始所必须的,起癌基因作用。在上皮性卵巢癌中,最近报道RUNX1高表达,并且与卵巢癌细胞的...
【文章来源】:广州医科大学广东省
【文章页数】:63 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
质粒测序图
29图 2 细胞图,B 是 OVCAR-RUNX1KO-sg2-2 单克隆细胞系Figure 2 Cell graphe OVCAR3 parental cell line,B represents the OVCAR-R line验证 RUNX1 基因是否敲除成功个单克隆细胞的部分做 PCR 测序鉴定(图 2.1),比与 OVCAR-RUNX1KO-sg2-2 细 胞 系 的 测 序 峰X1KO-sg2-2 单克隆细胞系中 RUNX1 基因同一位置分失,从而导致 RUNX1 编码读框改变,说明该基因已经 基因的单克隆细胞系 OVCAR-RUNX1KO-sg2-2 建立
图 2.1 OVCAR-RUNX1KO-sg2-2 单克隆细胞系的 PCR 测序峰图卵巢癌细胞 OVCAR3 亲本细胞系,sg2-2 代表 OVCAR-RUNX1KO-sg2-2 单克隆细序峰图表示 OVCAR-RUNX1KO-sg2-2 单克隆细胞系的基因编辑情况。igure 2.1 PCR Sequencing Plot of OVCAR-RUNX1KO-sg2-2 Monoclonal Cell Linepresents the parental ovarian cancer cell line OVCAR3, sg2-2 represents -RUNX1 KO-sg2-2 monoclonal cell line, and the sequencing peak map representsiting of the OVCAR-RUNX1 KO-sg2-2 monoclonal cell line.T-PCR 验证 RUNX1 基因 mRNA 的表达水平得 OVCAR-RUNX1KO-sg2-2 单克隆细胞系后,继续扩大培养,取部分的细胞用 Trizol 法提取细胞总 RNA,取 1ul RNA 溶液进行 1.0%琼脂糖泳 检 测 RNA 完 整 性 ( 图 2.2.1) , OVACAR 亲 本 细 胞 系R-RUNX1KO-sg2-2 单克隆细胞系的 RNA 琼脂糖凝胶电泳图像均见完整个条带,表示 RNA 提取完整。接着,我们应用 qRT-PCR 方法检测 RUN mRNA 表达水平(图 2.2.2)。结果显示,OVCAR-RUNX1KO-sg2-2 细胞
【参考文献】:
期刊论文
[1]MDR1基因在卵巢癌组织中的表达及其临床意义[J]. 林小萍,王立梅,王庆生. 实用癌症杂志. 2001(01)
[2]耐药相关基因在卵巢癌组织中的表达及其临床意义[J]. 程国钧,祝华,孙丽亚,李亚里,李春海,杨秀玉. 中华妇产科杂志. 2000(02)
本文编号:2938693
【文章来源】:广州医科大学广东省
【文章页数】:63 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
质粒测序图
29图 2 细胞图,B 是 OVCAR-RUNX1KO-sg2-2 单克隆细胞系Figure 2 Cell graphe OVCAR3 parental cell line,B represents the OVCAR-R line验证 RUNX1 基因是否敲除成功个单克隆细胞的部分做 PCR 测序鉴定(图 2.1),比与 OVCAR-RUNX1KO-sg2-2 细 胞 系 的 测 序 峰X1KO-sg2-2 单克隆细胞系中 RUNX1 基因同一位置分失,从而导致 RUNX1 编码读框改变,说明该基因已经 基因的单克隆细胞系 OVCAR-RUNX1KO-sg2-2 建立
图 2.1 OVCAR-RUNX1KO-sg2-2 单克隆细胞系的 PCR 测序峰图卵巢癌细胞 OVCAR3 亲本细胞系,sg2-2 代表 OVCAR-RUNX1KO-sg2-2 单克隆细序峰图表示 OVCAR-RUNX1KO-sg2-2 单克隆细胞系的基因编辑情况。igure 2.1 PCR Sequencing Plot of OVCAR-RUNX1KO-sg2-2 Monoclonal Cell Linepresents the parental ovarian cancer cell line OVCAR3, sg2-2 represents -RUNX1 KO-sg2-2 monoclonal cell line, and the sequencing peak map representsiting of the OVCAR-RUNX1 KO-sg2-2 monoclonal cell line.T-PCR 验证 RUNX1 基因 mRNA 的表达水平得 OVCAR-RUNX1KO-sg2-2 单克隆细胞系后,继续扩大培养,取部分的细胞用 Trizol 法提取细胞总 RNA,取 1ul RNA 溶液进行 1.0%琼脂糖泳 检 测 RNA 完 整 性 ( 图 2.2.1) , OVACAR 亲 本 细 胞 系R-RUNX1KO-sg2-2 单克隆细胞系的 RNA 琼脂糖凝胶电泳图像均见完整个条带,表示 RNA 提取完整。接着,我们应用 qRT-PCR 方法检测 RUN mRNA 表达水平(图 2.2.2)。结果显示,OVCAR-RUNX1KO-sg2-2 细胞
【参考文献】:
期刊论文
[1]MDR1基因在卵巢癌组织中的表达及其临床意义[J]. 林小萍,王立梅,王庆生. 实用癌症杂志. 2001(01)
[2]耐药相关基因在卵巢癌组织中的表达及其临床意义[J]. 程国钧,祝华,孙丽亚,李亚里,李春海,杨秀玉. 中华妇产科杂志. 2000(02)
本文编号:2938693
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