GRIM19对多囊卵巢综合征颗粒细胞VEGF调控的研究

发布时间：2021-01-03 08:28

　　目的研究维甲酸/干扰素诱导细胞死亡相关基因19（Gene associated with retinoid interferon induced mortality 19,GRIM19）对多囊卵巢综合征（Polycystic ovary syndrome,PCOS）患者颗粒细胞的血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor,VEGF）的调节作用,并探讨其潜在的分子调控机制。方法选取PCOS患者及正常人的卵巢原代颗粒细胞（Primary granulosa cells,PGC）作为研究对象,研究GRIM19对PCOS患者PGC的VEGF的调控作用。同时,利用siRNA沉默技术以及质粒过表达技术来下调或上调PCOS患者PGC细胞中GRIM19基因的表达,并检测处理前后VEGF的mRNA及蛋白相对表达量的差异。同样,分别用不同浓度梯度的睾酮（Testosterone）孵育正常人的PGC,模拟PCOS患者体内的高雄激素环境。并检测PGC细胞中的GRIM19、VEGF及STAT3的mRNA和蛋白的相对表达量,以探究PCOS中GRIM19对VEGF可能的调... 

【文章来源】：海南医学院海南省

【文章页数】：63 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

人卵巢原代颗粒细胞的显微鉴定（40×）

海南医学院硕士学位论文在前面的实验中发现 PCOS 患者与正常人比，其 PGC 中的 VEGF 表达量较高而 GRIM19 的表达水平较低，为了探究二者是否具有关联，我们采用针对GRIM19 的特异性 siRNA 来沉默 PCOS 患者 PGC 的 GRIM19 基因，并通过 qPCR和 WB 检测 GRIM19 沉默后 VEGF 表达水平的变化。结果如图 3 所示：经 qPCR 检测发现 3 条干扰 RNA 均能沉默 GRIM19，其中 siRNA1-GRIM19 的沉默效果最好，其 GRIM19 的 mRNA 相对表达量与阴性对照组比，减少 5.14 倍（P < 0.001）。与此同时我们发现下调 GRIM19 的表达后，siRNA1-GRIM19 组 VEGF 的 mRNA 相对表达量较阴性对照组增加 3.93 倍（P < 0.001）。上述结果表明在 PCOS 患者的 PGC 中 GRIM19 与 VEGF 的表达密切相关，GRIM19 可在 mRNA 水平对 VEGF 的表达起负调节作用。

18图 4. GRIM19 基因沉默后 GRIM19 及 VEGF 的蛋白相对表达量。（A）GRIM19 基因被小干扰 RNA 沉默后的 GRIM19 及 VEGF 的 WB 图；（B）siRNA1 沉默 GRIM19 基因后 GRIM19及 VEGF 蛋白的相对表达量；（C）siRNA2 沉默 GRIM19 基因后 GRIM19 及 VEGF 蛋白的相对表达量；（D）siRNA3 沉默 GRIM19 基因后 GRIM19 及 VEGF 蛋白的相对表达量。

【参考文献】：
期刊论文
[1]多囊卵巢综合征患者血清血管内皮生长因子、内皮抑素水平及对卵巢间质血流的影响研究[J]. 刘梅梅,丁慧,尹晓静,王珊,于彩虹,李肖肖.  中国全科医学. 2017(04)



本文编号：2954660