宫颈癌细胞系中HPV16 E6、E7及E6/E7基因对STK31基因甲基化状态及表达的影响

发布时间：2021-01-03 22:58

　　背景与目的:丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶31（serine/threonine kinases 31,STK31）基因在人类多种癌症中扮演重要角色,且STK31基因的表达受其启动子及第一外显子区甲基化状态的影响;病毒感染与肿瘤组织中某些抑癌基因启动子区高甲基化有关。本研究旨在探讨宫颈癌细胞系中HPV16 E6、E7及E6/E7癌基因对STK31基因甲基化状态及表达的影响,以及不同种类甲基转移酶（DNA methyltransferases,DNMTs）基因在STK31基因甲基化中的潜在作用。方法:构建外源性HPV16 E6、E7以及E6/E7基因共表达慢病毒,分别感染人乳头瘤病毒（human papillomavirus,HPV）阴性宫颈癌细胞系HT-3及C33A,获得稳定转染的细胞系;采用亚硫酸氢盐基因组测序法（bisulfite genomic sequencing,BGS）和甲基化特异性PCR（methylation-specific PCR,MSP）检测3种HPV阳性宫颈癌细胞系HeLa、SiHa和CasKi以及HPV阴性宫颈癌细胞系HT-3和C33A转染前后STK31基因的甲基化状... 

【文章来源】：中国癌症杂志. 2015年09期 北大核心

【文章页数】：11 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 细胞转染和培养
    1.2 细胞DNA提取及DNA亚硫酸盐修饰
    1.3 BGS及MSP检测
    1.4 RNA提取及荧光定量PCR检测
    1.5 Western blot检测
    1.6 统计学处理
2 结果
    2.1 外源性HPV16 E6、E7及E6/E7蛋白在HPV阴性宫颈癌细胞系HT-3及C33A中稳定表达
    2.2 宫颈癌细胞系转染前后及HPV阴、阳性宫颈癌组织中STK31基因的甲基化状态的差异
    2.3 宫颈癌细胞系中HPV感染通过调节STK31基因启动子及第1外显子甲基化状态影响其基因的表达
    2.4 DNMT、DNMT2、DNMT3a、DNMT3b和DNMT3L基因m RNA在外源性HPV16 E6/E7转染前后宫颈癌细胞系及HPV阴阳性宫颈癌标本中表达水平的比较
3 讨论



本文编号：2955642