miR-34a-5p通过调控CDK6表达和PI3K/AKT信号通路调节滋养层细胞的增殖、浸润和凋亡

发布时间：2021-01-04 06:15

　　目的探讨miR-34a-5p及CDK6对滋养层细胞增殖,浸润和凋亡的作用和下游机制以及二者的调节关系。方法培养滋养层细胞HTR-8/Svneo和人绒毛膜癌细胞系BeWo和JEG-3HTR-8/Svneo,使用RTqPCR法检测3种细胞中miR-34a-5p的表达差异。根据对HTR-8/Svneo细胞的不同处理进行如下分组:无处理的HTR-8/Svneo细胞（对照组）;miR-34a-5p拟似物mimic转染细胞（mimic组）,pcDNA-CDK6和mimic共转染HTR-8/Svneo细胞（pcDNA-CDK6+mimic组）,miR-34a-5p抑制剂inhibitor转染HTR-8/Svneo细胞（inhibitor组）。MTT法检测细胞增殖,ELISA法测定caspase 3活性检测细胞凋亡水平,Transwell实验检测细胞浸润能力;Western blot检测细胞周期依赖性蛋白激酶CDK6,凋亡标记物cleaved-caspase 3,浸润标记物MMP-9的表达;荧光素酶报告基因实验确认miR-34a-5p对CDK-6的直接靶向关系。结果过表达miR-34a-5p抑制HTR... 

【文章来源】：南方医科大学学报. 2020年01期 北大核心

【文章页数】：8 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 细胞培养
        1.2.2 细胞转染和细胞处理
        1.2.3 实时荧光定量
        1.2.4 MTT检测细胞增殖活性g
        1.2.5 Western blot检测
        1.2.6 检测细胞的caspase 3活性
        1.2.7 Transwell实验检测
        1.2.8 萤光素酶报告基因分析
    1.3 统计学分析
2 结果
    2.1 miR-34a-5p在滋养层细胞中表达下调
    2.2 miR-34a-5p-mimic抑制HTR-8/Svneo的增殖活性
    2.3 miR-34a-5p-mimic促进HTR-8/Svneo细胞的凋亡
    2.4 miR-34a-5p-mimic抑制HTR-8/Svneo细胞的浸润
    2.5 CDK6是miR-34a-5p的靶基因之一
    2.6 PI3K/AKT信号通路参与调控miR-34a-5p介导的滋养层细胞增殖、凋亡和浸润
3讨论



本文编号：2956304