rsa基因通过mbk-2调控秀丽隐杆线虫胚胎发育

发布时间：2021-01-05 04:55

　　目的使用秀丽隐杆线虫作为模式生物,观察rsa基因对mbk-2突变型线虫胚胎发育和虫卵孵化的影响,初步探讨mbk-2的在胚胎发育中的作用及机制。方法以RNAi技术定向干扰mbk-2突变型线虫rsa基因的表达,并对rsa沉默后线虫的虫卵孵化水平及胚胎发育情况进行分析,检测其在线虫生长发育、生殖能力等方面的变化。结果与L4440喂养的mbk-2基因突变组相比,rsa-1和rsa-2RNAi细菌处理mbk-2基因突变组虫卵未孵化率显著升高,达到41.8%和49.2%（P<0.05）,且rsa-2处理组显著高于rsa-1组（P<0.05）;rsa-1和rsa-2 RNAi细菌处理的N2野生型线虫虫卵未孵化率分别为3.9%和5.7%,显著低于rsa-1和rsa-2 RNAi细菌处理的mbk-2突变型线虫（P<0.05）。rsa-2 RNAi处理mbk-2突变型线虫组,线虫胚胎发育异常显著增加。结论 mbk-2是线虫发育的一个重要因子,rsa是mbk-2的重要修饰基因,两者相互作用调节线虫的胚胎发育和虫卵孵化。 

【文章来源】：河北医科大学学报. 2020年10期

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

图4 两细胞阶段发育异常情况

在两细胞阶段,观察到rsa-2 RNAi喂养的mbk-2突变型线虫胚胎表现为AB和P1细胞显著的不对称,也表现为细胞卵裂沟异常,可见于电镜拍摄图(图4)。这种缺陷与rsa-2 RNAi处理的对照N2线虫相似,这表明胚胎表型的异常可能仅由rsa-2的缺失引起。图4 两细胞阶段发育异常情况

采用含rsa-1和rsa-2的RNAi细菌喂养线虫,观察抑制rsa对线虫孵化率的影响,对照组采用含L4440质粒的细菌喂养。结果显示,抑制rsa-1和rsa-2表达后,虫卵未孵化率高于对照组(P<0.05)。同时,RNAi筛选结果显示,rsa-1和rsa-2可能是mbk-2的增强子,调控其表达。为验证其调控作用,采用rsa-1和rsa-2的RNAi细菌喂养mbk-2突变型线虫。结果显示,与N2组相比,mbk-2突变会增加虫卵的未孵化率。而采用RNAi抑制rsa-1和rsa-2后,mbk-2突变线虫的虫卵未孵化率显著增加,显著高于mbk-2突变组,见表1。从培养皿的拍摄图片也可以直观的看出,使用L4440的对照组,幼虫的数量多,孵化率很高。rsa-1和rsa-2喂养的mbk-2突变线虫,卵子数量明显增多,幼虫数量减少(图1～2)。图2 mbk-2突变线虫的孵化检测


本文编号：2958063