线粒体靶向KillerRed增强辐射诱导HeLa细胞自噬作用及其机制

发布时间：2021-01-07 00:21

　　目的:探讨线粒体靶向KillerRed （mtKR）增强辐射诱导HeLa细胞线粒体失能及细胞自噬作用,并阐明其相关分子机制。方法:线粒体靶向质粒PTEN诱导激酶1 （Pink1）-mtKR转染HeLa细胞后,进行可见光和4Gy X射线照射,实验分为对照组、空载体组、Pink1-mtKR组、对照+4Gy X射线照射组、空载体+4Gy X射线照射组和Pink1-mtKR+4Gy X射线照射组。X线照射后24h,采用流式细胞术检测线粒体膜电位（MMP）和细胞自噬率,采用生化试剂盒检测线粒体呼吸链复合物Ⅰ和Ⅲ水平,采用Western blotting法检测自噬分子P62、Pink1、帕金蛋白（parkin）和线粒体外膜转换酶20 （Tom20）的表达量。结果:Pink1-mtKR瞬时转染HeLa细胞后,给予可见光联合4Gy X射线照射,与对照组比较,Pink1-mtKR组细胞MMP、线粒体呼吸链复合物Ⅰ和Ⅲ水平均明显降低（P<0.05）,细胞自噬率明显升高（P<0.05）,Pink1-mtKR+4GyX射线照射组细胞MMP、线粒体呼吸链复合物Ⅰ和Ⅲ水平进一步降低（P<0.05... 

【文章来源】：吉林大学学报(医学版). 2020,46(04)北大核心

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

可见光和4Gy X射线照射后流式细胞术检测各组HeLa细胞MMP

与对照组比较，可见光照射后12h，空载体组和Pink1-mtKR组细胞自噬率明显变化（P>0.05）；照射后24h,Pink1-mtKR组细胞自噬率明显升高（P<0.05）。可见光和4Gy X射线联合照射后12和24h，与对照组比较，对照+4Gy X射线照射组、空载体+4Gy X射线照射组和Pink1-mtKR+4Gy X射线照射组细胞自噬率均明显升高（P<0.05）。与对照+4Gy X射线照射组比较，照射后24 h,Pink1-mtKR+4Gy X射线照射组细胞自噬率明显升高（P<0.05）；照射后12和24 h,Pink1-mtKR+4Gy X射线照射组细胞自噬率明显高于Pink1-mtKR组（P<0.05）。见表2和图2。2.4 各组细胞中自噬相关蛋白表达量

在总蛋白中，各组细胞中Pink1、parkin和Tom20蛋白表达量无明显变化，但Pink1-mtKR组P62蛋白表达量增加，Pink1-mtKR+4Gy X射线照射组增加更明显；在线粒体蛋白中，Pink1-mtKR组和Pink1-mtKR+4Gy X射线照射组细胞中Pink1、parkin和Tom20蛋白表达量均增加。见图3。3 讨论

【参考文献】：
期刊论文
[1]新型肿瘤靶向纳米颗粒联合光动力治疗对人宫颈癌Hela细胞的体外杀伤作用[J]. 赵艳,张婷婷.  西安交通大学学报(医学版). 2019(04)
[2]线粒体靶向KillerRed诱导的ROS增强辐射对HeLa细胞的增殖抑制作用[J]. 李鑫,马云飞,唐庚,韦麒,纪红池,田嘉安,申延男,王志成.  吉林大学学报(医学版). 2018(04)



本文编号：2961521