C/EBP β介导β-catenin信号分子在子痫前期氧化应激发病机制中的研究

发布时间：2021-01-08 00:57

　　目的：检测正常足月妊娠及子痫前期孕妇胎盘组织C/EBPβ和P-catenin蛋白的定位及表达；采用缺氧/复氧模型体外模拟胎盘氧化应激损伤,研究C/EBPβ和β-catenin在调控人滋养细胞迁移和侵袭中的作用；探讨C/EBPβ是否介导β-catenin信号分子在子痫前期氧化应激发病机制中的作用,为后者的早期诊断和治疗提供借鉴。方法：（1）选择2013年3月至2014年3月在我校附一院产科住院分娩的22例子痫前期孕妇为研究对象,另以20例正常足月妊娠孕妇设对照组,收集两组孕妇胎盘组织。免疫组化SP法定位各组胎盘组织中C/EBPβ和β-catenin蛋白,蛋白印迹法（Western Blotting, WB）检测各组胎盘组织中C/EBPp和β-catenin蛋白的表达水平。（2）通过shRNA慢病毒转染质粒干扰早孕期绒毛外植体和HTR8/SVneo细胞株的C/EBPβ基因表达,通过氯化锂激活β-catenin信号分子；同时,对早孕期绒毛组织和HTR8/SVneo细胞株进行缺氧/复氧培养。Transwell侵袭实验检测阻断C/EBPβ和激活β-catenin对HTR8/SVneo细胞侵袭能力... 

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

【文章页数】：63 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１?Ｃ／ＥＢＰｐ的结拘示患困??

化０２）、（０．５５?±?０．０７）。子搁前期中Ｃ化ＢＰｐ蛋白表达水平升高，ｐ－ｃａｔｅｎｉｎ蛋白则??降低。两者的表达水平，均分别与各自对照组比较，差异均有统计学意文（八：〇．〇１）。??见图１．３。??Ａ?Ｂ?〇＇７?．?ＱＮｏｒｍａｌ??０．６?Ｔ?■巧??１?，?一一??Ｎｏｒｍａｌ?ＰＥ?Ｓ?〇＇５?■??Ｃ做巧禱篇?Ｉ?０．４??Ｐ－ｃａｔｅｎｉｎ?一?｜?〇，３?Ｔ??Ｐ－ａｃｔｉｎ?？ｉ＿?０．２?ｍ??Ｓ。：；圓圓??Ｃ／Ｅ?目?Ｐｐ?（３－ｃａｔｅｎｉｎ??图１．３胎盘组巧中Ｃ７ＥＢＰ０、０－ｃａ化ｎｉｎ蛋白的表达水平??Ａ：蛋白印化法Ｂ；蛋白表达灰度值困??Ｆｉｇｕｒｅ?１．３?Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?Ｃ／ＥＢＰ?０?ａｎｄ?目－ｃａ化ｎｉｎ?ｐｒｏ化ｉｎｓ?ｏｂｔａｉｎｅｄ?ｆｒｏｍ?ｐｌａｃｅｎｔａ．??Ａ．Ｗｅｓ化ｒｎ?ｂｌｏｔｔｉｎｇ．?Ｂ．Ｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ?ｏｆ?ｒｅｌａｔｉｖｅ?ｐｒｏ化ｉｎ?ｌｅｖｅｌｓ?ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ?ｉｎ?ｐｌａｎｃｅｎｔａｌ?ｔｉｓｓｕｅｓ．??尸＊?＜０．０１?ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ｎｏｒｍａｌ?化ｒｍ?ｐｒｅｇｎａｎｃｙ．?（ｎ＝３?ｉｎ?ｔｒｉｐｌｉｃａ化）??４讨论??ＣＣＡＡＴ／增强结合蛋白?ｐ?（ＣＣＡＡＴＶＥｎｈａｎｃｅｒ?Ｂｉｎｄｌｉｎｇ?Ｐｒｏｔｅｉｎ?Ｂｅｔｅ，ＣＶＥＢＰＰ）??作为核转录因子，在多种细胞中能调节细胞代谢、周期调控和增殖分化等重要生??命活动。曾有研究指出口?１

ＨＴＲ８／ＳＶｎｅｏ细胞稳转ＣＶＥＢＰｐ?ｓｈＲＮＡ，流式细胞仪检测转染效率为９２．４５％。??Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔｔｉｎｇ?检测结果显示：ｓｈ－ａＥＢＰｐ?组（０．２１＋０．０３）较?ｓｈ－ＮＣ?组（０．５７?＋??０．０１）降低５０％。两组进行比较，差异显著，具有统计学意义（尸＜０．０５）。见图２．３。??Ａ?Ｂ?０７??些０后?３－???＿?＾??＿５?０．Ｓ??ｓｈ－ＮＣ?ｃＥＢｐｐ?§?０，４??Ｇ汇ＢＰ口?？立０?３??ｐ－ａｃｔｉｎ?一—?１０，??０??ｓｈ－ＮＣ?ｓｈ－Ｃ／ＥＢＰｐ??图２．３?ＨＴＲ８／ＳＶｎｅｏ细胞ＣＹＥＢＰｐ干扰效率的鉴定??Ａ：蛋白印迹法Ｂ：蛋白表达灰度值图??Ｆｉｇｕｒｅ?２．３?Ｉｎ化ｒｆｅｒｅｎｃｅ?ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ?ｉｎ?ＨＴＲ８／ＳＶｎｅｏ?ｃｅ化．??Ａ．Ｗｅｓ化ｒｎ?ｂｌｏｔｔｉｎｇ．?Ｂ．Ｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ?ｏｆ?ｒｅｌａｔｉｖｅ?ｐｒｏ化ｉｎ?ｌｅｖｅｌｓ?ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ?ｍ?ＨＴＲ８／ＳＶｎｅｏ?ｃｅｌｌｓ．??户＜０．０１．?（ｎ＝


本文编号：2963588